无创产前筛查采血操作规范

v1.0可编辑可修改v1.0可编辑可修改v1.0可编辑可修改附件3胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测样本采集手册一、受检者准备1．检测对象：孕周范围为孕12-24周的孕妇。2．采样体位：坐位取血，且在采血前患者需要有10分钟时间稳定自己的体位。【注意事项】要求受检孕妇先进行B超检测，确认胎儿为单活胎。采血前24小时内避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。二、样本采集前准备1、知情同意书签署：送检医生与受检者及其家属作良好沟通，告知该检测的重要性、临床意义及潜在的风险，并指导受检者签署知情同意书。对于孕周大于24周并坚持要求进行该检测的受检者，由送检医生指导其签署知情同意书补充条款。2、送检单填写：要求用钢笔或签字笔填写，并使用正楷字体，字迹清晰，填写完整。3、送检单必填信息：送检单位、送检医生、采血日期、受检者姓名、年龄、孕周、B超检查结果、身份证号码、联系电话。4、信息核对：仔细核对送检单和受检者的基本信息，确保一致；检查受检者是否按照医嘱准备，并向其解释操作目的以取得配合。5、样本标识：在采集管、知情同意书、送检单上贴上样本唯一条码，并注明受检者姓名、年龄、孕周、检验项目等信息，确保与送检单一致。【注意事项】1．粘贴条码标签时，应使条码与采集管的管长平行，字母朝管口方向，避免以环绕管壁粘贴的方式使管周被遮挡，而无法清晰看到管内样本情况。（条码7个，分配：患者一个、采血机构一个、保健所3个、保健院一个、检测中心一个）2.样本采集后使用的条码必须为抗冻条码，并且粘贴牢固，确保在运输、检测、储存过程中不会脱落或字迹模糊不清。三、样本采集1、采样器：医用一次性采血针、10mLEDTA抗凝管、灭菌棉签、止血带、消毒液。2、采集操作：全血标本的采集—使用普通的10mlEDTA采血管：严格按照《实验室操作技术规范》的要求采取10mL孕妇外周血，采血后请立即缓慢颠倒6次使血液与管内成分混匀（如图1），拖延颠倒混匀时间可能会造成检测失败。混匀后立即放直立于4℃冰箱内，并在6个小时内进行血浆分离。按照无创产前检测血浆分离要求操作（见附件），分离后样本放入-20℃冰箱储存。血浆样本需在0℃以下冷冻运输，不应超过72小时图1.颠倒混匀示意图【注意事项】1.不可使用肝素抗凝的采血管进行取样.。2.颠倒混匀时动作应轻柔，防止溶血，影响检测结果的准确性。3.禁止将普通EDTA抗凝样本和血浆样本在室温状态下放置。4.全血离体后必须在6小时进行血浆分离，防止母体有核细胞破裂，增加检测背景，影响检测结果的准确性5.未采血的StreckCell-FreeDNABCT储存温度为18-25℃，禁止将已采血的StreckCell-FreeDNABCT存放于4℃或以下。四、标本递送1．甲方采集血标本后，4小时内连同送检单、知情同意书、知情同意书补充条款（如适用），该部分资料医院均需留有备，一同送到旗县区约定的标本收集机构（有能力分离血浆的医疗机构）进行血浆分离及保存。（血浆分离操作见附件）2．血浆样本应保存于标准的2mLEP管，并用封口膜密封管口，以防止样本溢出；3．寄送包装箱应为壁厚6cm以上的硬质泡沫箱，泡沫箱内容量视样本量可适当调整；4．血浆样本寄送采用干冰运输，寄送所用的干冰量为10公斤/2-3天，15公斤/4-5天，可根据运输时间长短适当增加用量。保证样本到达生产地，干冰有剩余。5．将复核后需寄送的血浆样本及收集的白细胞管放入冻存盒内，并用保鲜袋将冻存盒封好，所有将纸质送检单、知情同意书装入自封袋中封好，置于泡沫箱内最上层6．乙方按规定的时间到旗县约定的标本收集机构收取标本附件血浆分离步骤一、低温离心血样离心（15min）：将采血管按编号顺序放入离心桶中，用托盘天平严格配平，将配平好的离心桶放在位置相对的吊篮中，设置离心机“xg：1600xg，tem：4℃time：10min，ACC：5。按“star”开始第一次离心，并在血浆制备中“第一次离心”下打“√”。在离心10分钟内做其他准备工作：清洁超净台，给垃圾桶套上黄色医疗垃圾袋、准备2ml无菌EP管，根据每份血样3个2mlEP管准备，将EP管的开口朝内放到双面板上，同一血样标记相同的标号1、1、1、2、2、2……20、20、20。同样标号的管子并排放置，根据标号顺序依次排列。分离血浆：离心完成后从离心机中取出样本，此时样本分为三层，下层为红细胞层，中间为白细胞和血小板，上层为我们所需要的血浆，将采血管按编号从小到大顺序放到采血管架的相应位置。用移液器将上清液移到与采血管编号对应的其中2个EP管中，每管2ml共约4ml。吸取白细胞层：血浆分离后吸取中间白细胞1ml到与采血管编号对应的另1ml个EP管中(贴上与申请单一致的条形码)。【注意事项】血样离心后已经分层，从离心机中取出时要轻拿轻放，不可倾斜采血管，避免破坏分层。吸取血浆时吸头要垂直伸入采血管，从液面下3-6mm处吸取，接年白细胞层时要缓慢吸取，为确保不吸到白细胞层，可留有3mm左右血浆不吸。吸取白细胞层时，需将吸头贴近中间层缓慢吸取，避免吸取过多的红细胞和血浆。二、高速离心血浆离心（15min）：将EP管中体积接近的血浆放在微量台式离心机转子的相应位置，盖上离心机黄色内盖，并通过向上提内盖确保盖好，设置离心机参数“xg：6000xg，time：10min，按“star”开始第二次离心，并在血浆制备中“第二次离心”下打“√”。在离心的10分钟内做其他准备工作：根据每份血样4个无菌2mlEP管准备，将EP管的开口朝内放到双面板上，同一血样标记相同的标号1、1、2、2……20、20。同样标号的管子并排放置，根据标号顺序从小到大依次排列。提取上清液（30min）：吸取离心所得的上清，即得到较为纯净的血浆，将血浆按每管不少于1ml分装于对应编号的2mlEP管中（EP管上贴上与申请单一致的条形码）。血浆QC检测（2min）：审核血浆的体积与溶血情况，血浆体积少于2ml判定为不合格；根据《样本接收规程》中溶血标准判断是否溶血，如溶血则为不合格，需要重新采集样本。不合格样本需在《血浆制备单》的备注栏中注明此样本的不合格信息，并在LIMS系统中填写不合格及不合格理由，然全实验室负责人，发送重采血报告。【注意事项】分装血浆时，需将同一样本的血浆分装在具有相同标号的EP管内，切勿弄混。吸取血浆时，可从沉淀物的对立面缓慢吸取，避免吸头沾到沉淀或吸到沉淀。三、血浆样本保存血浆分离后与白细胞管立即低温保存，一周之内-20℃条件下暂存：长期保存需置于-80℃冰箱中。血浆不可常温保存。血浆样本避免反复冻融。送检样本合格标准1．外观：要求样本保存管完好，无裂管、开盖等泄漏或样本外溢情况。2．样本体积：孕妇外周血5mL，血浆样本量要求不少于2mL。3．样本质量：无污染、溶血现象（轻微溶血呈淡粉色、中度溶血呈粉红色、重度溶血呈红色及深红色）。样本信息：要求样本有对应的信息完整填写的送检单，管壁具有样本条码、受检者姓名、年龄、孕周等信息，确保与送检单上一致。结果报告乙方接到标本后，21个工作日出具报告。6PAGE\*MERGEFORMAT6