生物检材中常见氨基甲酸酯类农药GC_MS定性检验方法

2011 年第 3 期 广东公安科技 总第 104 期 生物检材中常见氨基甲酸酯类 农药 GC/MS 定性检验 伍海亮 1 严 明 2 裴茂清 3 张 亮 3 （1． 云浮市公安局刑警支队 ，广东 云浮 527300；2．茂名市公安局刑警支队 ，广东 茂名 525000； 3． 广东省公安厅刑事技术中心 ，广东 广州 510050） 摘 要 建立了生物检材中速灭威 、灭多威 、呋喃丹等氨基甲酸酯类农药的溶剂提取和 GC/MS 的定 性检验方法 ；应用氯仿对在血液检材中的速灭威 、灭多威 、呋喃丹进行提取 ，空白标准添加 作为质量控制 ，GC/MS 定性检验 ，得出中毒案件中速灭威 、灭多威 、呋喃丹农药 GC/MS 检 验条件 ，血液中三种农药的检出限均低于 1μg /mL，为实际案件中这类农药的定性分析提供 了方法和依据 。 关键词 生物检材 气质联用 氨基甲酸酯 1 前言 氨基甲酸酯 （carbamate） 是一类具有 － NH （CO） O －官能团的有机化合物的统称 ， 它们是氨基甲酸 （NH 2COOH） 的酯类 。 由于 氨基甲酸中氮原子连接着一个羧基 ，所以也 可被看作是一个碳酸的单酯 单 酰 胺 。 因 此， 氨基甲酸酯也可以有 N 位取代的烷基或芳基 。 氨基甲酸酯主要用途是农药 ， 特别是杀虫剂 ， 如：速灭威 、 呋喃丹 、灭多威等 。 有些氨基 甲酸酯也被用于人类药物 ，如乙酰胆碱酯酶 抑制剂新斯的明及利凡斯的明 。 氨基甲酸酯是农药中毒的重要原因 ， 也 是毒物检验中的重要目标物质 。氨基甲酸酯 类的毒理机制与有机磷酸酯类相似 ，都是抑 制乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的活性 ，造成乙 酰胆碱和羧酸酯的积累 ， 进而影响正常的神 经传导而导致中毒 。 但氨基甲酸酯对乙酰胆 碱酯酶的抑制是可逆的 ， 所以与不可逆抑制 乙酰胆 碱 酯 酶 的 有 机 磷 类 相 比， 其 毒 性 比 要小 。 氨基甲酸酯类农药常用的定性检测方法 有免疫分析法 、 气相色谱法等 ，本文从生物 检材中毒物分析中的实际需要出发 ，提出一 种生物检材中氨基甲酸酯类农药的溶剂提取 和 GC/MS 定性检验方法 。 2 实验部分 2. 1 仪器与试剂 2. 1. 1 仪器与条件 Varian 450GC/320MS 气 相 色 谱 /质 谱 联 用仪 DB －5MS （30m * 0. 25mm * 0．25μm） 弹性石英毛细柱 ； 柱温 ：60℃ （3min ） 10℃ /min 280℃ （5min ）； 进 样 口 温 度 280℃， 传 输 线 温 度 280℃； 载气 ：He，恒流 1mL /min ； 离子源 ：EI，质量扫描范围 40 ～450amu， 扫描方式 scan，分流进样 ， 分流比 10∶1，进 样量 1μL。 2. 1. 2 试剂 灭多威 、速灭威 、呋喃丹等农药对照品 购于公安部物证鉴定中心 ； 氯仿 、 甲醇均为 分析纯 。 2. 2 试验方法 2. 2. 1 溶液配制 分别配制 20μg/mL 灭多威 、速灭威 、呋 喃丹甲 醇 标 准 工 作 液 和 三 种 农 药 浓 度 均 为 20μg/mL 混合标准工作液 。 ·61· 伍海亮等 ：生物检材中常见氨基甲酸酯类农药 GC/MS 定性检验方法 2011 （3） 2. 2. 2 样品处理 取空白血样 2mL， 添加灭多威 、速灭威 、 呋喃丹至浓度均为 1μg/mL ， 混匀 ，用 4mL 氯 仿超声震荡 10min，涡旋 2min ，离心 ，取出有 机相 ；再加入 4mL 氯仿并重复上述操作 ， 合 并两次提取液 ，常温氮气吹干 ，100μL 甲醇 定溶备检 。 另一份作空白血样 ，同上平行操作 。 2. 2. 3 GC/MS 分析 分别以 20μg/mL 灭多威 、速灭威 、 呋喃 丹标准溶液和标准添加提取液 、空白血样提 取液进行 GC/MS 分析 ，通过库检索和标准溶 液保留时间对样品中药物进行定性分析 。结 果如图 1． 20μg/mL 灭多威 TIC 和质谱图 20μg /mL 呋喃丹 TIC 和质谱图 20μg/mL 速灭威 TIC 和质谱图 血液浓度均 1μg/mL 灭多威 、速 灭威 、呋喃丹氯仿提取液 TIC 图 图 1 生物检材中 灭多威 、速灭威 、呋喃丹 GC/MS 分析图 ·71· 伍海亮等 ：生物检材中常见氨基甲酸酯类农药 GC/MS 定性检验方法 2011 （3） 3 结果与讨论 3. 1 由图 1 可见 ，应用文中所述色谱条 件，能很好地将生物检材中灭多威 、速灭威 、 呋喃丹三种氨基甲酸酯类农药进行分离 ， 结 合相应对照品和质谱图 ， 能够满足常见氨基 甲酸酯类农药的定性分析要求 。 3. 2 血液中添加 1μg/mL 的灭多威 、 速 灭威 、 呋喃丹对照品 ， 经氯仿提取后 ， 进行 GC/MS 定性分析 ， 三种农药均有较好的色谱 峰，信噪比均大于 20∶1。 3. 3 综合上述结果可知 ，采用本文提出 的液液萃取 /GC /MS 法能用于生物检材中氨基 甲酸酯类农药的定性检验 ，该方法血液中灭 多威 、速灭威 、呋喃丹三种常见氨基甲酸酯 农药检出限均低于 1μg/mL， 能够满足实际办 案需求 。 4 案例应用 2011 年 3 月 24 日，广东省某市伍某某饭 后出现呕吐头痛 、 四肢无力和口吐白沫等症 状，随后死亡 。解剖提取其胃内容物约 100 毫升 ，要求对常见农药进行检验送检 。检材 应用上述提取方法提取 、 气质 联 用 检 验 后， 检出氨基甲酸酯类农药呋喃丹成分 ，胃内容 物提取液的气质联用分析图如图 2． 图 2 伍某某胃内容物提取液的 GC/MS 图 参考文献 ［1］张新威 ．毒品和毒物检验 ．北京 ：中国人民公 安大学出版社 ，2003 ． ［2］农业部农药检定所 ．新编农药手册 ．北京 ：农 业出版社 ，1995 ． ［3］李宏森 ，黄克建 ．有机农药及中间体质谱手 册．北京 ：化学工业出版社 ． ·81·