Z2细胞计数仪计数白细胞和红细胞的性能评价

Z2细胞计数仪计数白细胞和红细胞的性能评价 Z2细胞计数仪计数白细胞和红细胞的性能 评价 检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007,Vol22No3 文章编号:1673-8640(2007)03-0257-06中图分类号:R446.11文献标识码:A Z2细胞计数仪计数白细胞和红细胞的性能评价 彭黎明,王伟鑫,白丽霞 (北京大学深圳医院检验科,广东深圳518036) 257 摘要:目的对Beckman—CoulterZ2细胞计数仪(简称Z2)的白细胞(WBC)和红细胞(RBC)检测性能进行 系统评价.方法根据国际血液学化委员会(ICSH)制定的评价标准对z2检测WBC和RBC性能包括准确 度,精密度,线性,抗干扰,重合计数等进行评价,同时将SysmexF-820和SE-9500与z2的结果进行比较.结果 z2检测浓度质控物WBC和RBC的线性良好(r均>0.999),Z2检测标准颗粒,WBC和RBC的批内,批间和 总重复性的变异系数(CV)均<2%,检测WBC和RBC的携带污染率均<1%,在室温或4?条件下可稳定48h, 高三酰甘油(TG)和高胆红素(Bil)对WBC,RBC的检测基本无干扰(P>0.05).Z2 校正WBC和RBC的重合计 数偏差均<1%.SysmexF-820,SE-9500与Z2检测WBC和RBC结果间的相关性良好(r>0.996),且结果问差 异无统计学意义(P>0.05).结论z2细胞计数仪检测WBC,RBC具有准确,精密,线性好,抗干扰能力强,重 合计数偏差小,与其他厂商的血液分析仪检测结果问具有可比性等特点,可作为WBC和RBC计数的参考计数 仪并可用于对其他血液分析仪计数WBC和RBC的校准. 关键词:Z2细胞计数仪;自动血液分析仪;血细胞计数 PerformanceevaluationofWBCandRBCcountingwiththeBeckman?-CoulterZ2cellcounterPENGLi?- ruing,WANGWeixin,BAILixia.(DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUniversityShenzhenHospital,Guang一 如Shenzhen518036,China) Abstract:0bjectiveToevaluatetheperformanceoftheBeckman— CoulterZ2cellcounterforwhitebloodcell (WBC)andredbloodcell(RBC)counting.MethodsTheperformanceoftheZ2cellcountersuchasaccuracy,preci— sion,linearity,interference— resistanceandcoincidencecountingwasevaluatedaccordingtoguidelinespublishedbythe InternationalCommitteeforStandardizationinHematology(ICSH)andcomparedwiththatofSysmexF一820andSE一 9500.ResultsTheresultsdemonstratedexcellentlinearityforWBCandRBC(r>0.999).rrheZ2showedexcellent precision,withwithin-ran,between-ranandoverallcoefficientofvariance(CV)lessthan2%.Carryoverwasgenerally acceptable(<1%).WBCandRBCwerestableafterbloodstoragefor48hat4oCandroomtemperature(RT).There wasminimalinterferenceforWBC,RBCathighconcentrationsofbilirabinortriglyceride(P>0.05).Thebiasofcoinci— dencecorrectioninWBCandRBCcountingwiththeZ2was1essthan1%.CorrelationbetweentheZ2andSysmexF一820 orSE-9500wasexcellentforWBCandRBCcounting(r>0.996).ConclusionsTheBeckman.CoulterZ2cellcounter hasgoodfeaturesofprecision,accuracy,linearity,interferenceandsmalldeviationsofcoincidencecountingandgood comparisonwithSysmexF-820andSE-9500,anditcouldbeusedtootherhematologyanalyzerforWBCandRBC counting. Keywords:Beckman—CoulterZ2cellcounter;Hematologyanalyzer;Bloodcellcount Beckman—CoulterZ2细胞计数仪(简称Z2)是 根据库尔特电阻抗原理的半自动单通道细胞 计数仪,由于其检测具有高准确度和精密度,已被 美国材料实验协会(ASTM)认定为生物科技领域 中颗粒计数的标准计数仪,同时被国际血液学 标准化委员会(ICSH)推荐为白细胞(WBC)和红 细胞(RBC)计数的参考计数仪,现根据ICSH 评价指南和文件',对Z2计数WBC和RBC的 性能进行评价. 一 ,材料 基金项目:深圳市卫生局重点科技项目资助(200609) 作者简介:彭黎明,男,1959年生,博士,教授,主要从事临床血液学检验及应用研究. 材料和方法 检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007.Vn】22No3 1.仪器Z2细胞计数仪.SysmexF.820血 液分析仪(简称F.820,定期参加卫生部临床检验 中心RBC和WBC计数的室间比对)和Sysmex SE.9500血液分析仪(简称SE-9500).20IxL微 量移液器购于德国Brand公司,100和1000IxL 加液器购于德国Eppendorf公司,50,1000mLA 级容量瓶由上海玻璃器皿一厂生产.真空采血器 和真空采血管由广州阳普公司提供. 2.试剂Z2检测试剂及校准品包括ISOTON ?等渗电解液,浓度质控物(批号7497006),乳 胶标准颗粒CCSizeStandardI2,L5,LIO[批号 931212,5240,6047,已通过美国国家标准局 (MST)认证],s.CAL全血校准品(批号4703),4C PLUS低,中,高值全血质控物(批号060000, 075600,087200)及配套溶血素由美国Beckman- Coulter公司提供.F.820与SE-9500的配套试 剂,质控品及校准品由Sysmex公司提供. 二,方法 1.标本采集用真空采血器采集健康体检者 及门诊,住院患者新鲜全血2mL,乙二胺四乙酸 二钾(EDTA-K,)抗凝(抗凝浓度1.8,2.2 mg/mL).所有实验(除稳定性试验外)均在6h 内完成. 2.线性(1)浓度质控颗粒线性:将直径为 1Om的浓度质控颗粒以100%,80%,60%, 40%,20%稀释,各重复检测3次;(2)细胞线性: 取RBC,WBC各1份高值新鲜血标本,以100%, 80%,60%,40%,20%,10%进行稀释,各重复检 测3次. 3.精密度(1)标准颗粒精密度:分别用2,5 和1Om的标准颗粒检测5O,70,100Ixm小孔管 的精密度,各重复检测1O次;(2)批内精密度:分 别选取高,中,低值的WBC,RBC标本各1份,各 连续测定1O次;(3)批间精密度:以4CPLUS全 血质控物分别在第0,1,2,3,4天进行WBC,RBC 检测,每次重复检测3次;(4)总重复性:取含高, 中,低值的WBC121例,RBC84例进行平行检测 2次. 4.携带污染率选取高,低值的WBC,RBC 标本各1份,以z2先连续检测高值标本3次 (H,H,H),然后连续检测低值标本3次(L,, L,L),按公式计算携带污染率:(L一L,)/ (H3一L3)×100%. 5.稳定性分别选取高,中,低值WBC,RBC 标本各2份(1份置室温,另1份置4?下保存), 分别于0,0.5,1,2,3,4,5,6,24,48h进行检测. 6.可比性分别选取含高,中,低值的WBC 121例,RBC84例,以Z2,F-820及SE-9500进行 平行双份重复检测. 7.准确性(1)WBC计数准确性验证:将 100IxLS-CAL及0.5mL溶血素加入50mL容量 瓶中,用ISOTONII进行1:500稀释,以Z2计数 WBC10次;(2)RBC计数准确性验证:将1OL S-CAL加入1000mL容量瓶中,用ISOTONII进 行1:100000稀释,以Z2计数RBC10次,分别计 算均值与靶值的偏差. 8.干扰试验取高三酰甘油(TG=14.6 mmol/L)和高胆红素(Bil=182.6mmol/I)标本 各1份,与正常血标本进行系列稀释后分别计数 WBC,RBC,每份标本测2次. 9.重合计数校正分别选取WBC和RBC 高,中,低值的4CPLUS各1份,将其0.1mL加入 20mLISOTONII中进行初次稀释(各重复制备 2份),再将初次稀释液参照1进行第2次稀 释,于Z2上进行WBC,RBC计数,作图求出重合 计数校正值. 三,统计学方法 应用SPSS13.0及Excel2000进行数据处理 和统计学分析. 表1细胞重合计数校正的第2次稀释方法 注:前者为初次稀释液体积(如0.02mE),后者为ISOTON?电解液体积(如2OmL) 检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007,Vol22.No3 结果 一 ,线性 Z2无论检测浓度质控物还是WBC和RBC 均具有良好的线性,各稀释度的检测结果与期望 值之间密切相关(r均>0.999),见表2. 二,精密度 z2计数标准颗粒和高,中,低值WBC和RBC 的批内,批间以及总重复性的变异系数(CV)均 <2%,见表3,4. 表2Z2的线性检测结果 表3Z2计数标准颗粒的精密度结果 注:}直径2,5和l0m的标准颗粒分别为CCSizeStandardL2,15,L10 表4Z2计数WBC和RBC的精密度结果 ?260?检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007,Vol22.No3 三,携带污染率见表5. Z2计数WBC,RBC的携带污染率均<1%, 表57_2计数WBC和RBC的携带污染率 四,稳定性 放置不同时间的WBC,RBC结果与0h结果 比较,CV值均较小<3%,见图1. 一 rJ ? ? 一 0 一 rJ ? 时间/h 注:…*…4?:—-卜室温 时间/h 注:…*…4?:—-?一室温 (b) 图1Z2计数WBC和RBC的稳定性结果 五,可比性 将Z2与F.820计数WBC,RBC结果进行成 组t检验,结果显示两者间差异无统计学意义(P 均>0.8);将Z2,F.820,SE-9500三者计数WBC, RBC结果进行单因素方差分析,结果显示差异无 统计学意义(P均>0.9);同时,F.820和SE-9500 与z2计数WBC,RBC结果间的相关性极好(r均 >0.996),见表6,图2. 六,准确性 z2计数s.CAL的WBC和RBC结果与其靶 值的偏差均<1%,见表7. 七,干扰试验 严重脂血,黄疸标本对z2计数WBC,RBC基本 表6F-820和SE-9500与计数WBC和RBC结果比较 Z2(~10/L) 注:Vl=09794O.0322.rl=0.9989:v2=o994X一01662. R2=09982;?F-820;×SE-9500;Yl:Z2F-820,:Z2SE-9500 (a) Z2(X10/L) 注:y广1.0462一02262,rl=09961;:10393r-f)1609. r,:09964:?F一820;×SE一95OO:yt:Z2F-82(I.n:Z2SE-95O0 (b) 图2F-820和SE一95O0与计数WBC(A)和RBC(B)比对 试验结果 无干扰(P>0.05),与未加TG和Bjl标本的WBC和 RBC结果间差异不大(<10%),见表8,10. 八,重合计数校正 将WBC和RBC的重合计数校正值与靶值比 较,偏差均<1%,见表11. 一'0【×一00nI丑?2叵0呷 08642O8642O 一1/『0【×一00n6-??2叵0? 765432O 检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007,Vol22.No3?261? 表7验证Z2计数WBC,RBC准确性结果表8Z2干扰试验的稀释方法及最终干扰物浓度 参数RBC(x10/L)WBC(x10/L) 注:验证所用的校准品为Coulter.S-CAL.Calibrator(批号4703) 表9脂血对Z2计数WBC和RBC干扰试验结果 表l1z2对WBC和RBC的重合计数校正结果 讨论 检验医学2007年第22卷第3期LaboratoryMedicine2007,Vol22. z2计数WBC,RBC的精密结果表明,z2检 测标准颗粒,WBC,RBC的精密度较好,其中高值 标本重复性的CV优于低值标本,RBC计数的精 密度优于WBC,符合WBC,RBC计数固有误差 (inherenterrors)或计数域误差(fielderrors)的规 律,即s=n(n为计数颗粒)).同时,我们的精 密度结果较厂商规定(WBC在10.0×10/L时 C?3%,RBC在5.0×10"/L时CV?2%)性能 更佳(表3,4).稳定性结果表明,虽然放置不同 时间计数WBC,RBC与0h结果比较CV较小,但 随时间的延长,WBC和RBC结果有不同程度降 低,其中高值优于低值标本,RBC稳定性优于 WBC,置4?标本的稳定性优于室温标本(图1). 我们推荐WBC和RBC计数在室温条件下最好 6h内完成,这样可控制WBC和RBC下降率在 5%以内. 在重合计数方面,本应用S-CAL校准品,因 其有准确的靶值,但又考虑到对高,中,低值进行 重合计数校正,因而选用了4CPLUS全血质控 物;同时重合计数结果显示,RBC的偏差低于 WBC计数(表11).我们的实验z2重合计数校 正结果较厂商对重合计数的好很多. 尽管z2本身的准确性较高,但由于其为半自 动计数仪.仪器本身以外的因素对其结果影响较 大,有研究发现对z2准确性影响最大因素为计数 仪的校准,其次为计数仪的计数量和稀释细胞 量j.另一方面由于仪器小孔管小孔易产生堵 孔,可给计数造成一定影响.但从总体来看,Z2 在计数WBC和RBC方面具有较高的准确度和精 密度,可用于血液分析仪的校准.同时,我们相 信,在不久的将来,随着医学和生物科学技术的进 步,应用流式细胞术(FCM)检测WBC与RBC的 参考方法将问世. 参考文献 1]ASTMF2149-01.Smnd~dtexmethodforautomated analysesofcell——theelectricalsensingzonemethod ofenumerating&Sizingcellsuspension[S].2002. 2]InternationalCouncilforStandardizationinHaematolo. gY.Referencemethodfortheenumerationoferythro— cytesandleukocytes[J].ClinLabHaemat,1994,16 (2):131—138. 『3]ICSH.Guidelinesfortheevaluationofbloodcellana1. ysersincludingthoseusedfordifferentialleucocyteand reticulocytecountingandcellmarkerapplications[Jj. ClinLabHaemat,1994,16(2):157—174. [5]宋颖,胡晓波,居漪,等.红细胞计数参考方法 的不确定度研究[J].检验医学,2005,20(3):185? l88. (收稿日期:2006—10-08) (本文编辑:范基农) 文章编号:1673—8640(2007)03-0262-02中图分类号:R446.5文献标识码:B ICU病房洋葱伯克霍尔德菌三年监测结果的分析 吴文汉 (嵊州市人民医院,浙江嵊州312400) 关键词:洋葱伯克霍尔德菌;重症监护病房;耐药性 洋葱伯克霍尔德菌存在于土壤中,在医院环境中常 污染自来水,体温表,输液系统等.近年来该菌引起的医 院感染有增加趋势,尤其是在重症监护(ICU)病房.由于 该菌对抗生素多重耐药,治疗相当困难.我们对我院 2003年1月至2005年l2月间该菌在ICU病房的分离率 及耐药情况进行了统计分析. 一 ,材料和方法 作者简介:吴文汉,男,1967年生,主管技师,主要从事微生物检验工作. 1.菌株来源2003年1月至2005年12月ICU病房 送检的1463例各类标本中分离出109株洋葱伯免霍尔 德菌,其中2003年28株,2004年34株,2005年47株. 2.菌株鉴定与药敏试验使用Vitek一32型伞自动细 菌检测分析系统配套的革兰阴性鉴定GNI卡进行鉴定; GNS一120卡,GNS一143卡进行抗生素敏感试验.中没有 (下转第267页)