平喘药实验

平喘药实验 (豚鼠肺支气管灌流法) 【实验原理与目的】 肺组织的肥大细胞、支气管平滑肌细胞细胞膜上存在着,受体、,受体与,受体。2 ,受体激动时，可激活细胞膜上的腺苷酸环化酶，后者又催化细胞内cAMP的合成。cAMP2 水平提高对支气管平滑肌有稳定膜电位、扩张支气管的作用。,受体激动时则使细胞内cAMP水平降低，使支气管收缩。激动,胆碱受体，可激活鸟苷酸环化酶，使细胞内cGMP合成加速，cGMP水平提高，从而收缩支气管。同时，,受体激动时，可抑制组胺、慢反2 应物质等过敏介质的释放，,受体与,受体激动时则可促进过敏介质的释放。 本实验目的是通过观察药物对豚鼠肺支气管灌流量的影响，来这些药物对支气管平滑肌的作用，加深对药物作用机制的理解。了解离体肺支气管灌流方法。 【实验对象】 豚鼠，体重400~600g。 【实验器材和药品】 1(仪器 超级恒温水浴器。 2(器械 支气管灌流装置，培养皿，大小剪刀，镊子，血管钳， 1ml注射器，蛙板，量筒，烧杯。 3(药品 乐氏液，0.01%异丙肾上腺素，1.0%乙酰胆碱，0.2%苯海拉明，0.5%组织胺。 4( 其它 棉线。 【实验步骤和观察指标】 1(仪器装置 预先安装好肺支气管灌流装置并连接恒温水浴器(如图2-6-3-1所示)。贮液瓶内 0充满含氧的乐氏液，经恒温(37C)水浴中的蛇形管到达灌液套管。 1(手术操作 (1)将豚鼠击毙，切开颈动脉放血，然后固定于蛙板上。迅速用粗剪刀打开胸腔暴露心肺。 (2)用小镊子分离出气管，于甲状软骨下2~3个气管环处剪断气管并用镊子提起，剪除周围组织连同心肺一并取出。 (3)立即置入盛有冰冷乐氏液的培养皿内并轻轻挤压数次，以排出肺内气体。 (4)去除心脏，然后将气管用线扎于灌流装置的套管上，缓慢打开灌流液开关，以乐氏液灌流之。待肺充分膨胀后，在肺脏面用针头散在性穿孔数个至数十个。调节灌流速度至每分钟流出量28~32ml。 3(观察与 待灌流量恒定后即可按下列顺序给药，每给一组药物待其灌流量恢复正常后再给下一组药: (1) 0.5%组织胺0.5毫升。0.5min后开始记录每分钟液体流出量，观察其作用高峰时间和维持时间。 (2)重复注入组织胺,待其作用明显后,给予0.01%异丙肾上腺素0.5毫升。观察灌流量有何变化，与步骤(1)比较。 (3)注入0.2%苯海拉明0.5毫升。待3~5min后，重复注入组织胺，观察灌流量有何变化，与步骤(1)比较。 (4)1.0%乙酰胆碱0.5毫升,同步骤(1)。 (5)重复注入乙酰胆碱，待作用明显后，注入0.01%异丙肾上腺素0.5毫升,观察流量变化,与步骤(4)比较。 (6)将结果记录于表1。 表1 豚鼠肺支气管灌流量(ml/min) 药 后(min) 药 物 药前 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 组织胺 组织胺 异丙肾上腺素 苯海拉明 组织胺 乙酰胆碱 乙酰胆碱 异丙肾上腺素 【注意事项】 1.击毙豚鼠头部应以不出血为宜，若出血应倒提豚鼠(即头朝下)，以免血块阻塞气管。灌流好的肺脏应无萎陷或凝血区域。 2.每次给药后应予少量乐氏液冲管。 3(整个实验过程应使贮液瓶中的乐氏液保持在一定高度，以免影响灌流量。 【思考题】 1.受试药物哪些引起灌流量减少，哪些引起灌流量增加，其机制是什么,哪些药物是特异性拮抗剂,哪些药物是生理性拮抗作用, 2.阿托品是否可以用于支气管哮喘，为什么, 3.异丙肾上腺素用于支气管哮喘，有哪些副作用,为什么,