dao,二胺氧化酶(dao)elisa试剂盒说明书

dao,二胺氧化酶(dao)elisa试剂盒说明书 DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用 操作步骤 1. 品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔 中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀; 然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、 第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分 别加标准品稀释液50ul，混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到 第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从 第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标 准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加 样量都为50μl，浓度分别为90ng/L，60ng/L ，30ng/L，15ng/L， 7.5ng/L)。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相 同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然 后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔 底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37?温育30分钟。 4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍 稀释后备用。 5. 洗涤:小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后 弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37? 避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测 定应在加终止液后15分钟以内进行。 DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书 注意事项: 1( 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板 开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2( 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结 果。 3( 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加 样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4( 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样 本OD值大于标准品孔第一孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数 (n倍)后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5( 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6( 底物请避光保存。 7( 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8( 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9( 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 计算: 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 试剂盒性能: 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。 2.批内与批见应分别小于9%和15% 上海古朵DAO,二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒说明书组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片(48) 2片(96) 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8?保存 标准品:18pmol/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8?保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8?保存 酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8?保存 样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8?保存 显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8?保存 显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8?保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8?保存 (20ml×20倍)×1(20ml×30倍)×1浓缩洗涤液 2-8?保存 瓶瓶 二胺氧化酶家禽类:鸡、鸭、鹅等。 飞禽类:鸽子、鸟类等。 水产类:鱼、牛蛙等。 动物类:小鼠、大象、虎、羊、马、蝌蚪、蟾蜍、牛、熊猫、金黄地鼠、猪、兔、蜥蜴、河马、猕猴、类人猿、狒狒、鹿等。 ELISA试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。