二种萜烯类化合物对甲硝唑透皮吸收作用的影响【文库论文】

二种萜烯类化合物对甲硝唑透皮吸收作用的影响【文库】 二种萜烯类化合物对甲硝唑透皮吸收作用的影响 ====================================================================== 作者:许卫铭， 王晖， 陈丽， 吴铁 【关键词】 氮酮;,,,冰片;,,,薄荷醇;,,,透皮吸收;,,,渗透系数;,,,增 渗倍数 摘要:目的对氮酮、冰片、薄荷醇促透作用进行比较，为找到更合理有效 促透剂提供理论依据。在离体透皮实验装置上进行透皮吸收实验和贮库效 应的研究。结果氮酮、冰片、薄荷醇单独应用时对甲硝唑经皮渗透均有促进作 用，增渗倍数分别为2.48,2.19和2.66;当氮酮与冰片或薄荷醇合用时，促透 效应比单用氮酮时显著增强(P,0.01)。氮酮单独应用时对甲硝唑经皮渗透和 贮库效应影响不明显，但氮酮和薄荷醇合用时贮库效应显著增加。结论冰片、 薄荷醇均对甲硝唑的皮肤吸收有促透作用，与氮酮合用时效果明显增强。 关键词:氮酮; 冰片; 薄荷醇; 透皮吸收; 渗透系数; 增 渗倍数 Effects of Two Kinds of Terpenes on Percutaneous Penetration of Metronidazole on Skin in Vitro Abstract:ObjectiveTo compare the permeation enhancing effect of azone,synthetic borneol and menthol and to provide theoretic foundation for finding more reasonable and effective penetration enhancers.MethodsThe transdermal absorption test and the research of deposit function on penetration experiment apparatus.ResultsWhen azone,synthetic borneol and menthol were used separately,they had notable transdermal permeation enhancing effect of metronidaze.The enhansive permeation multiple was 2.48,2.19and 2.66;while penetrateion enhancing effect was strengthen greatly when azone was used with synthetic borneol or menthol (P,0.01).Deposit function had little influence on transdermal absorption enhancing effect of metronidazole when azone was used separately,but when azone was used with synthetic borneol or menthol,deposit function was reinforced greatly.ConclusionSynthetic borneol and menthol had notable transdermal permeation enhancing effect of metronidazole,and when they are used with azone,the enhancing function is more notable. Key words:Azone; Synthetic borneol; Menthol; Transdermal absorption; Permeation coefficient; Increased permeation times 冰片、薄荷醇的促透作用已被我们发现,1,2,，可作为一种新的促透剂被 开发和利用。本研究以甲硝唑为模型药物，比较氮酮和冰片、薄荷醇的促透作 用，并对它们合用的促透效果进行探讨，为在经皮吸收制剂和外用制剂更好地应用薄荷醇、冰片提供理论依据。 1 材料方法 1.1 试剂与仪器薄荷醇(上海香料厂)，冰片(广州化学试剂厂)，氮酮(天津市福晨化学试剂厂)，甲硝唑(广州明兴制药厂)，其余试剂均为AR级。 UV-3101型紫外可见分光光度计(日本岛津)，ZD-85型气浴恒温振荡器(深圳国华仪器厂)，752型紫外分光光度计(上海仪器厂)，透皮装置(本室自制)。 1.2 实验动物家兔，雄性，2.2 kg，由广东医学院实验动物中心提供，动物合格号为:26-00A004。 1.3 离体皮肤的准备家兔小心剃去背毛，麻醉后剥下背部皮肤，去除皮下脂肪组织，用生理盐水反复冲洗直至无混浊为止。处理后，放入4?冰箱中保存，1周内用完。 1.4 曲线的制定 精密称取甲硝唑25.00 mg，用生理盐水制成0.25 mg?ml1的贮备液，用生理盐水稀释成系列浓度，在276 nm波长处测定其吸光度A，将浓度(C)和吸光度(A)进行线性回归，回归方程:A=0.015 86C+0.019 88，r=0.999 8，线性范围为2.5~50.0 μg?ml1。 1.5 释放液和接受液的制备释放液为1.0 mg?ml1的甲硝唑生理盐水溶液，接受液为生理盐水。 1.6 促透剂的配制氮酮、冰片、薄荷醇分别用75%的乙醇和2%的吐温-80配成溶液，氮酮与冰片、薄荷醇的混合溶液中每种促透剂浓度均为1%。 1.7 皮肤的预处理皮肤在常温下解冻后，固定在扩散池上，分别加入不同的促透剂10 μl，预处理12 h。 1.8 透皮实验在双室透皮扩散装置,3,进行体外透皮吸收实验，释放液用量为0.1 ml，接收液5.0 ml，实验温度为(32.0?1.0)?，振速为150次?min1，扩散面积为0.502 cm2，在2，4，8，12，24 h时间点分别取4.0 ml，同时补加等量接收液，测定吸收度，代入回归方程，计算浓度C。上述皮肤连续透皮24 h后，去除释放液，用生理盐水反复清洗，用滤纸条吸干，5 ml接受液加入干净的接收瓶中，按上述条件进行药物的贮库效应应研究。 1.9 干扰实验按1.8的实验方法，取不同时间点空白兔皮浸出物接收液，在220~350 nm范围内进行UV扫描，结果表明兔皮浸出物对甲硝唑的测定无干扰。 1.10 结果的处理将每次测定的浓度代入下式，计算累积透过量Q(μg/cm2): Q=Cn×5+n-1 i=1Ci×4 4其中Cn为第n次取样点的药物浓度(μg?ml1)，Ci为第 i取样点的药物浓度(μg?ml1)，A为扩散面积。以累积透过量Q对时间t进行线性回归，所得方程的斜率即为渗透系数P，增渗倍数为含透皮促进剂组与无透皮促进剂组渗透速率系数之比。 1.11 统计处理数据的统计学处理采用孙瑞元教授主编的NDST程序进行方差分析。 2 结果 2.1 促透剂对甲硝唑经皮渗透性的影响促透剂对甲硝唑经皮渗透性的影响。结果见表1。表1 促透剂对甲硝唑经皮渗透性的影响(略) 由表1的结果可知，氮酮、冰片、薄荷醇单独应用时，对甲硝唑经皮渗透性均有促进作用，增渗倍数分别为2.48、2.19和2.66，当氮酮与冰片或薄荷醇合用时，促透效应比氮酮、冰片及薄荷醇单独应用时显著增强(P,0.01)，氮酮+薄荷醇组比单独用氮酮、薄荷醇时分别增加1.37和1.16倍，氮酮+冰片组比单独用氮酮、冰片分别增加1.43和1.45倍，结果表明氮酮、冰片、薄荷醇均有促进甲硝唑经皮渗透的作用，当氮酮与冰片或薄荷醇合用时效果更显著。 2.2 促透剂对甲硝唑贮库效应的影响促透剂对甲硝唑贮库效应影响。结果见表2。表2 促透剂对甲硝唑贮库效应的影响(略) 从表2可知，氮酮单独应用时，对甲硝唑经皮渗透的贮库效应的影响不明显，但氮酮与冰片、薄荷醇合用时的贮库效应显著增加，和单用氮酮比较有显著性差异(P,0.01)。 3 讨论 氮酮是目前最常用的一类促透剂，作用原理是改变脂质双分子层致密性，增加脂质的流动性，对细胞内的蛋白质无作用，故毒性小，刺激也小。但有研究表明其对一些药物无明显的促进作用，如对布洛芬、可乐宁的促透作用不随浓度的增加而增加，当氮酮浓度增加超过3%时，可乐宁透皮吸收率呈下降趋势，而对氯霉素溶液，无论高浓度还是低浓度的氮酮均无促进作用，因氯霉素为亲脂性药物，氮酮对其难以发挥作用,4,。有人认为氮酮有助于增加亲水性药物的渗透性，对亲脂性药物的促进作用不及亲水性药物强;对低浓度药物促透皮剂有明显的局限性。因此从天然产物中筛选有效的促进剂，成为当前透皮研究的热点话。 萜烯类物质多为天然物质，包括薄荷醇、冰片(又称龙脑)、柠檬油精、香芹酮、麝香草酚、桉树脑等。其中，薄荷醇和冰片是临床上应用较为广泛的萜烯类物质，其常作为“引药”，增加其它药物的治疗效果，即中医所谓的“芳香走窜，引药上行”“独行则势弱，佐使则有功”,6,。近几年研究发现两者对盐酸川芎嗪、5-氟尿嘧啶、水杨酸等药物具有一定的促透作用，且毒性一般小于合成的促透剂，还有时滞短、效果好等优点，显示出广阔的发展前景。 薄荷醇促透机制可能是由于薄荷醇破坏角化细胞间质，造成角质层裂解剥脱，使表皮细胞间隙扩大，致皮肤对外来药物的阻滞作用减小，从而促进药物经表皮细胞间隙透皮扩散,7,。Kunta-JR,8,等人用薄荷醇对普萘洛尔透皮实验时发现，薄荷醇的促透作用可能涉及到它首先破坏角质层细胞间的空隙和可逆的破坏细胞间脂质结构。 冰片的促透机理与细胞膜类脂分子运动有序程度值S有关,6,。当0?S?1，S值增大，即细胞膜磷脂分子链排列有序性增大时，药物分子穿越膜受到磷脂分子的碰撞机会较少，比较容易穿过。反之，若S值减少，磷脂分子运动无序，脂肪链纵横交错，药物穿越膜受到较大的阻力，膜的通透性变小。樊岚岚等用电子自旋方法研究发现，加入冰片后，可以使兔角膜上皮细胞的细胞膜的磷脂双分子层运动更加有序，角膜上皮细胞的通透性增加，与对照组比较P,0.05，认为冰片促透作用机理是由于冰片具有改善角膜上皮细胞的通透性,9,。 本研究发现萜类吸收促进剂薄荷醇、冰片和氮酮单用时对甲硝唑经皮渗透均有一定的促进作用，而氮酮和薄荷醇或冰片合用后，促透作用明显增强;贮库效应的研究结果显示，合用薄荷醇或冰片能在一定程度上加强氮酮的贮库效应。研究结果表明，氮酮的促进甲硝唑渗透能力与已知的萜烯类吸收促进剂薄荷醇、冰片合用后，明显增强，可望作为一种新型复方促透剂在药物制剂中被使用，对某些药物，如果与薄荷醇、冰片合用，可使药物作用效果进一步增强，为复方制剂的研究提供新思路。 参考文献: ,1,王晖,许卫铭.薄荷醇及其二组分系统对5-氟脲嘧啶经皮渗透和贮库效应的影响,J,.中国临床药理学与治疗学,2003,8(4):422. ,2,王晖,许卫铭,王宗锐.薄荷醇与冰片的促透作用,J,.中草药,1997,28(2):93. ,3,许卫铭,王宗锐,刘刚.一种高效率的药物透皮吸收实验装置的改进,A,.中国药理学通报,J,.1997,13(2):185. ,4,王海波,葛发欢,李菁,等.超临界CO2萃取蛇床子挥发性成分的研究,J,.中药材,1996,19(2):84. ,5,李险峰,王春生.促进药物透皮吸收方法的研究,J,.药学实践杂志,1998,16(5):285. ,6,陈群.冰皮促透作用的研究进展,J,.时珍国医国药,2004,9?15. ,7,Panchagnula R,Desu H,Jain A,et al.Effect of lipid bilayer alteration on transdermal delivery of a high-molecular-weight and lipophilic drug:studies with paclitaxet,J,.J. 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