海珠益肝胶囊对小鼠免疫性肝损伤的影响

海珠益肝胶囊对小鼠免疫性肝损伤的影响 中西医结合肝病杂志2002年第l2整里塑 海珠益肝胶囊对小鼠免疫性肝损伤的影响 李卫星谭大琦李秋华刘桂喜姜楠洪文竺稽能 湖北中医学院附属医院(430061) 摘要目的:进一步证实海珠益肝胶囊对肝损伤小鼠的保肝降酶作用.方法:采用卡 舟苗+脂岁糖(BCG+ LPS)遣成免疫性肝掘估模型小鼠,观薜本品对血清中ALT,AST活力单住,肝脾脏 嚣系数和肝脏病理组虮学损伤程 度的影响.结果:药物能降低血清中ALT,AST活力单住(P<0.O1);减小肝脾肿大 厦脏嚣系数(r<0.01){减轻肝 组织病理损辑程度结论:海珠益肝肢囊对BCG+LPS所致肝损伤小鼠有明显保肝 降酶作用 美键词海珠益肝胶囊卡舟苗膳多糖免疫性肝损伤小鼠 EffectofHaizhuyiganCapsuleontheHepaticDamageofImmunityinMice LIWeixing,TANDaqitL1Qi~hu.a,a1.TheAffihatedHospitalofHubeic~legeofTCM(Wuhan,430061) AbstractObjective:ItisevidencedfurtherthatHaizhuyLgan(HZYG)capsulecanprotectliveranddropALTand ASTactiveuniteinmice.MethodThemode1ofhepaticdamageofimmunitybyBCG+LPS.EffectsofHZYGcapstfle wereobservedonALTandASTactiveupitenserum.thecoefficientof1Lverandspleen.dimensLonofhepatiedamage intheh[stopatho[ogy,Results:HZYGcapsulecoulddropALTandASTactiveuniteinserum(P<001];decreasecoeffi— clentofliverandspleen(P<0.01);reducedimensionofhepaticdamageinthehistopathology.ConclusionHZYGcapsule canprotectthe【iverfromimmunedamageinducedbyBCG+LPSinmice. Keyw0rdHaizhuyganCapsuleBeGLPSHepaticDamageinImmunityMouse 海珠益肝胶囊临床应用于治疗乙型肝炎患者疗效 良好.按照《中药新药研究指南》有关治疗肝炎中药 的药效学研究中免疫功能试验要求'1,本实验研究采 用BCG十LPS所致小鼠免疫性肝损伤,观察药物对免 疫性肝损伤的影响,现将实验结果报告如下. 1材料 1,1实验动物昆明小鼠,雄性,体重22,24g,由 同济医科大学实验动物学部提供(医动字19,052). 1,2受试药品海珠益肝胶囊提取液(以下简称海珠 益肝)每毫升含复方生药量分别为0.375g,0,75g, 1.5g(即37.5,75,150药液)由湖北中医学院 脏象肝病研究所提供(批号:980915). 1.3阳性对照品地塞米松片(广东省制药工业公司 华南制药厂,批号:97071oo). 1,4其他药品及试剂冻干卡介苗制剂(BCG)由卫 生部兰州生物制品研究所提供(批号:980310);IPS 为美国Sigma公司产品. 2方法 ? 99? 2,1造模方法口度动物分组取雄性昆明小鼠72 只,体重24,26g,随机分威6组,每组12只.第1 组为正常对照组,第2,6组分别为免疫性肝损伤模型 组(简称模型组),海珠益肝7.5g/kg,15g/kg,30g/' kg和地塞米松6mg/kg组.第2,6组小鼠于实验第 1d尾静脉注射BCG200mg/kg,第12d尾静脉注射 I,PS0.4mg/kg.第1,2组小鼠从实验第ld开始灌服 NS20ml/kg,第3,组小鼠分别灌服37.5,75 和150海珠益肝20ml/kg,第6组灌服0,03地塞 米松20ml/kg,1次/d,连续12d于实验第12d尾静 脉注射LPS0,4mg/kg. 2,2检测指标 2,2,1血生化:注射LPS后8h(末次给药1h)取血. 离心,用全自动生化分析仪测定血清中AIT,AST活 力单位. 2.2,2肝脾组织脏器系数:称体重以及肝脏和脾脏重 量计算其肝,脾组织脏器系数(脏器重量与每10体 重之比). ? i00? 2.2.3肝脏组织学检查:取肝脏.用4甲醛固定. HE染色,切片观察肝组织损伤程度.病理组织学损伤 程度分级:"一"未见明显病理损伤}"+"部分肝组 织浊肿伴有散在的点状坏死,汇管区少许毙性细胞浸 润;"++"肝细胞浊肿有点状坏死及小灶性坏死.可 见散在的肉芽肿形成,汇管区有大量炎性细胞浸润; "+++"肝细胞浊肿并伴有大片状坏死,肉芽肿形成. 汇管区及周围有大量炎性细胞浸润 2.3统计学处理方法计量资料采用t检验,计数资 料采用Ridit检验 3结果 中西医结台肝病杂志2002年第l2卷第2期 3.I造模效果BCG+LPS致免疫性肝损伤模型小 鼠血清中ALT,AST活力单位较正常对照组明显升 高,肝,脾脏器系数增大,肝组织有明显的病理性损 伤,表明BCG+LPS能建立小鼠免疫性肝损伤模型. 3.2造模后用药的效果用BCG—LPS造模,随即 分别灌服海珠益肝7.5g/kg15g/kg,30g/kg和地塞 米橙6mg/kg后.小鼠血清中ALT,AST活力单位均 较免疫性肝损伤模型组低,脏器系数减小,病理性肝 损伤程度减轻,提示药物对免疫性肝损伤小鼠有保肝 降酶作用(见表1,表2). 表i海珠益肝胶囊对BCGFLPS致免疫肝损伤小鼠肝血清ALTAST,肝脏器系数, 脾脏器系数的响(x_--s) 连:各组与模型组比较,P<0.01(袁2同) 表2海珠益肝胺囊对BCG-}-LPS致免疫性肝损伤小鼠肝组鲤病理改 变的嚣响 4讨论 关于乙型肝炎的发病机理,有学者认为肝组织的 炎性病变并非仅为病毒侵袭所致.而是由于病毒的侵 袭感染改变了肝细胞表面的抗原性,从而引发自身免 疫反应所致. 本实验采用BCG+LPS造成免疫性肝损伤模型, 小鼠肝脾肿大,重量增加;镜下可见肝细胞呈弥漫性 浊肿,并伴有大片状坏死和肉芽肿形成,汇管区及小 叶周围充血和有大量炎症细胞浸润;肝功能检测与肝 损伤呈平行关系的血清AIT和AST显着增高,其肝 损伤动物模型接近于己型肝炎患者临床实际. 本实验研究结果显示:给予海珠益肝胶囊7.5, 30g/kg组和地塞米松6mg/kg组小鼠,与模型组相 比,肝脾肿大明显减小,肝组织的上述病变减轻,血 清ALT和AST显着下降,表明药物对免疫性肝损伤 小鼠有良好的保肝降酶作用 已知糖皮质激素具有免疫抑制作用,地塞米橙作 用的主要机制在于其抑制了机体亢进的免疫反应,从 而抑制了免疫性肝损伤的病理过程由此提示,海珠 益肝胶囊的保肝作用机制可能与其免疫调整功能有 关,其本品的免疫调节作用有待于进一步研究. 参考文献 1中药新药研究指南中华人民共和国卫生部药政管理揖,82 2王根生t张友会,刘耕陶.肿窟坏死因子在小鼠免疫性损伤中的怍 用厦其与肝巨噬细胞的关系中国药理学与毒理学杂志.1993.10 ({)t555 3陈国机主编内科学.第2版.北京;人民卫生出扳社.1937:357 (收稿日期:2002一O1一I6鳊辑姚吕绶)