项目三：何首乌中二苯乙烯苷的提取

项目三：何首乌中二苯乙烯苷的提取 班级: 生物制药092 姓名: 王斌 学号: 20097093213 同组组员: 许天红 胡燕 方聪聪 吴培 胡巨樑 叶筠 胡楚楚 史亦天 郭超云 项目三:何首乌中二苯乙烯苷的醇提工艺 研究目的: 何首乌为蓼科多年生草本植物。自古以来，人们认为何首乌具有益寿延年、延缓衰老之功效，是著名的滋补中药。现代医学明，何首乌具有增强免疫功能，抗氧化作用，延缓大脑衰老，提高DNA修复功能还具有延长寿命，降低胆固醇，改善脂肪代谢等多项功能。二苯乙烯苷是何首乌中特有的生物活性成分，它具有良好的水溶性、醇溶性同时具有抗氧化清除自由基，降低胆固醇，保肝等多重能， 【6】[1.2.3.4.5]作为抗衰老的组分极具研究的价值。 研究 1、 与 1(1材料、试剂与仪器 制何首乌产于广东高州以黑豆汁拌制、蒸煮、烘干而成 蒸馏水、60%的乙醇和95%的乙醇、 粉碎机、紫外-可见分光光度计、离心机、回流装置、电子天平、500ml和100ml各2只定容瓶 2、 二苯乙烯苷的测定 [2。7]参照文献测定二苯乙烯苷。将提取液在4000r/20min离心，并在0.1Mpa室温下真空干燥上清液;溶解真空干燥产物，稀释定容，在324nm波长下测定其吸【5】光度值以白藜芦醇苷作对照品标定其二苯乙烯苷的含量，计算提取率。 【5】注:由于实验室没有白藜芦醇苷作对照品，故二苯乙烯苷提取的实验有吸光度代替，吸光率百分率高则二苯乙烯苷提取率高。 3、二苯乙烯苷的质量m(提取液吸光度值的换算值 mg)与(相对应的何首乌原 料质量M mg) m 二苯乙烯苷提取率(%),——————×100% M 1 【】74、参考文献记载: ? ? ? ? ? 料液比1:5 1:7 1:9 1:12 1:`15 (g:ml) 二苯乙烯苷5.297 5.399 5.882 5.681 5.720 的率(%) ?温度(?) 30 40 50 60 80 二苯乙烯苷5.590 5.603 5.605 5.617 5.671 的率(%) ?乙醇体积40 50 60 70 80 分数(%) 二苯乙烯苷5.441 5.579 5.896 5.713 5.061 的率(%) ?提取时间20 30 40 60 90 (min) 二苯乙烯苷5.321 5.477 5.604 5.574 5.557 的率(%) 注:参考文献记载上何首乌粉一次用量在20g，而我们选取的何首乌粉是4g 4(1原始记录: 原料的制备去药店买制何首乌，粉碎，收集与包装容器内以备用 4(2根据料液比二苯乙烯苷提取 准确称取2份4.0g何首乌粉置于圆底烧瓶内，分别在圆底烧瓶内加入60%的乙醇进行二次回流详细数据如表格(1-1): 温度 80? 料液比 1:9 1:12 2 时间 40min 溶剂浓度 60% 1—1 4(2.1在温度为80?、提取时间为40min条件下分别在盛放何首乌粉的2只圆底【7】烧瓶内加入60%36ml、48ml乙醇进行回流提取, 离心，得上清夜待用 4(2.2进行离心后的液体(上清液)用玻璃棒进行引流入2只500ml的定容瓶内， (帖上标签1:9和1:12);残渣再次放入原地烧瓶内按4.2.1再次进行回流、 离心，再用玻璃棒进行引流入原2只500ml的定容瓶(帖上标签1:9和1:12) 3 内，次序不得搞错。 4.2.3 在2只装有提取液的500ml定容瓶内分别用蒸馏水定容至500ml,取5ml的 ml入100ml的定容瓶内用蒸馏水定容至100ml, 取1ml的移液管移移液管移取5 取1ml移入10ml试管内用95%乙醇定容至10ml,与324nm处测定吸光值，根据标准【7】曲线计算二苯乙烯苷的率。 5、根据温度比二苯乙烯苷提取 4 5.1准确称取2份4.0g花生粉置于锥形瓶内，分别放入圆底烧瓶内加入60%的乙醇进行二次回流详细数据如表格(2-1) 温度 30? 40? 料液比 1:9 时间 40min 溶剂浓度 60% 2-1 5(2 在温度为30?、40?提取时间为40min条件下分别在盛放何首乌粉的2【7】只圆底烧瓶内加入60%36ml、48ml乙醇进行回流提取, 离心，得上清夜待用 5 5(2.1 进行离心后的液体(上清液)用玻璃棒进行引流入2只500ml的定容瓶内，(帖上标签30?和40?);残渣再次放入原地烧瓶内按5.2再次进行回流、离心，再用玻璃棒进行引流入原2只500ml的定容瓶内，次序不得搞错。 5(2.2 在2只装有提取液的500ml定容瓶内分别用蒸馏水定容至500ml,取5ml的移液管取5ml入100ml的定容瓶内用蒸馏水定容至100ml, 取1ml的移液管移取1ml 6 移入10ml试管内用95%乙醇定容至10ml,与324nm处测定吸光值，根据标准曲线计【7】算二苯乙烯苷的率。 6、结果与讨论 通过吸光度的测定来确定不同料液比、不同温度对提取率的影响。 1、料液比对提取率的影响 ?随着料液比的越来越多反至提取率越来越低吸收值如表格(3-1) 料液比 1:9 1:12 紫外吸收 值324nm 第一次吸收值 0.103 0.082 第二次吸收值 0.129 0.078 第三次吸收值 0.129 0.079 平均吸收值 ?0.129 ?0.08 提取率(%) 3.23% 2.00% 3-1 ?随着温度值越来越高反至提取率越来越低吸收值如表格 (4-1) 温度比 30? 40? 紫外吸收 值324nm 第一次吸收值 0.144 0.143 第二次吸收值 0.143 0.142 7 第三次吸收值 0.142 0.141 平均吸收值 0.143 0.142 提取率(%) 3.58% 3.55% 4-1 总结:实验结果所示，二苯乙烯苷的最佳提取条件料液比在1:9，温度在30? 在紫外分光光度机吸收值最高 参考文献: 【1】张志国，吕泰省,姚庆强解放军第88医院 药剂科 山东 泰安 271000; º山 东省医学科学院药物研究所 山东 济南 250062 【2】朱仁发,王东,邵国泉合肥学院化学与材料工程系, 安徽合肥230022 【3】戚爱棣天津中医学院中药系, 天津 300193 【4】刘新桥, 高文远，陈海霞天津大学药物科学与技术学院, 天津300072 【5】王春英( 综述) , 张兰桐* ( 审校)河北医科大学药学院药物教研室, 河北石家庄050017 【6】李秀琼佛山市中医院药房, 广东佛山528000 【7】吕丽爽 汤 坚江南大学食品学院，无锡，214036 8