【word】 高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量

【word】 高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量 高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中 咖啡因含量 2010,VoI.27No.10亿与生物Z程 Chemistry&Bioengineering 高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量 闫海燕 (宝鸡文理学院化学化工系,陕西宝鸡721007) 摘要:建立了高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量的方法.色谱条件如下:EclipseXDB-C(4.6 mm×l50mm,5rtm)色谱柱,流动相为甲醇一水(35:65),流速1.0mL?min,检测波长275nm,进样量20”L.咖啡 因浓度在I5,140mg?L_.范围内线性关系良好,回归方程为Y=64.556x+71.885,R=0.9991.平均加标回收率为 106.8,RSD一2.21.该法简便,快速,重复性好,可用于小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量的测定. 关键词:高效液相色谱法;小儿氨酚烷胺颗粒;咖啡因 中图分类号:O657.7文献标识码:A文章编号:1672—5425(2010)10—0092—03 d,Jg氨酚烷胺颗粒是由对乙酰氨基酚,咖啡因,扑 尔敏,人工牛黄组成的复方制剂,常用于儿童伤风感冒 引起的鼻塞,咽喉痛,头痛,发热等[1].咖啡因主要限 于配制复方制剂,常与对乙酰氨基酚合用,能增强镇痛 作用,用于治疗一般性疼痛.咖啡因具有刺激心脏,强 心利尿,提神醒脑,兴奋中枢神经,扩张血管,增强胃分 泌等生物活性,但一次服用过多会产生恶心,呕吐,烦躁 不安,肌肉震颧,抽搐,惊厥等症状,已被列入第一类精 神药品管制范围.对成人感冒药中咖啡因含量的测定 已有报道[3].作者在此建立了一种快速检测小儿感冒 药中咖啡因含量的高效液相色谱法,并取得满意效果. 1实验 1.1,试剂与仪器 小儿氨酚烷胺颗粒(批号:20100203, 60O579O141o01O3,10013153,0910052),购自药店. 咖啡因对照品,纯度>99,TLC检验为一单纯斑 点,由宝鸡文理学院化学化工系有机化学实验室提供. 甲醇,色谱纯,美国Methanex公司;娃哈哈纯水. Agilent1200型高效液相色谱仪,G1328B型二级 管阵列检测器,美国安捷伦公司;KQ52OOE型超声波 清洗器,昆山市超声仪器有限公司;DZF-1型电热恒温 鼓风干燥箱,上海一恒科学仪器有限公司;ME254S型 电子天平,德国Sartorius公司;UV_255O型紫外分光 光度计,日本岛津公司. 1.2对照品溶液的制备 精密称取105?干燥至恒重的咖啡因对照品 0.0507g,置100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇 匀,即为对照品溶液. 1.3样品溶液的制备 分别取4种批号的A,JL氨酚烷胺颗粒6袋,研细, 精密称取1/30袋,置50mL容量瓶中,用水稀释至刻 度,用微孔滤膜(0.45m)过滤,即为样品溶液. 1.4色谱条件 色谱条件为:EclipseXDB-C色谱柱(150mmx 4.6mm,5m),流动相为甲醇一水(35:65),流速 1.0mL?min,,进样量2OL,检测波长275nm. 2结果与讨论 2.1紫外吸收波长的确定 对咖啡因紫外吸收光谱进行测定,结果显示样品 溶液在275nm(图1)处有最大吸收.因此本实验选 择275nm作为检测波长. 2.2线性关系 分别量取对照品溶液0.75mL,1.5mL,3mL,4 mL,5mL,6mL,7mL,加入25mL容量瓶中定容,使 其定容后的浓度分别为15mg?L,,30mg?L_.,60 mg?L一,80mg?L一,100mg?L一,120mg?L一, 140mg?L,,每次进样2OL对照品溶液,得到色谱 流出曲线.以咖啡因浓度(mg?L-1)为横坐标,峰面 基金项目:宝鸡文理学院重点科研项目(zKO918) 收藕日期:2010—07—21 作者简介:闫海燕(1981一),女,陕西成阳人,讲师,主要从事天然药物化学及药物分析.E-mail:hyyanll02@163.corn. 闫海燕:高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量/2010年囊10圈 图1咖啡因紫外吸收图谱 Fig.1Ultravioletabsorptionspectrumofcaffeine 积为纵坐标绘制标准曲线,见图2. 恒 孥 一 ;??__-_? O2O40608O100120140 浓度,mg?L 图2咖啡因标准曲线 Fig.2Standardcurveofcaffeine 保留时间/rain 由图2可以看出,咖啡因浓度与峰面积在15, 140mg?L范围内有良好的线性关系.对其拟合回 归,得回归方程为一64.556x+71.885,R一0.9991. 2.3精密度 取同一种对照品溶液(100mg?L)重复进样6 次,每次20”L.测得其RSD一1.33(72—6),说明仪 器精密度良好. 2.4重复性 分别取4种样品溶液按色谱条件重复进样3次, 测得4种样品溶液中咖啡因色谱峰峰面积的’RSD值 分别为0.97,1.05,0.77,0.41(一3),表明 方法的重复性好. 2.5稳定性 分别取4种样品溶液,在不同时间0h,1h,2h,3 h,4h,5h按色谱条件进样,记录峰面积,计算其RSD 值.结果分别为1.85,3.35,1.83,2.98%(一 6),表明样品在5h内稳定. 2.6样品测定 取处理好的样品溶液进行测定,每次进样量为2O pL,得到HPLC色谱图,见图3. 1200 lOOO 800 》 星600幽 400 200 0 【b)秤品 Ca脏ine l ?0L51.0l52o2.53-0354.04.5 保留时间/min 图3咖啡因对照品(a)与样品(b)的色谱图 Fig.3HPLCChromatogramsofstandard(a)andsample(b) 由图3可知,咖啡因与其它组分分离较好,保留时 间约为3.6rain.含量测定结果见表1. 表14种样品中囊啡因的含量测定结果 Tab.1Determinationresultsofcontentsofcaffeineinfoursamples 注:批号1,4分别为20100203,6O0579Ol41O0103,10013153,0910052, 下同 2.7加标回收率测定 取已知含量样品,加入咖啡因对照品,进行回收率 实验,结果见表2. 表2囊啡因回收率测定结果 Tab.2Determinationresultsofrecoveryofcaffeine 闰海燕:高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量/2010 年一10? 由表2可以看出,该方法平均回收率为106.8%, RSD为2.21. 2.8讨论 实验中尝试用甲醇一三氟乙酸,乙腈一水,甲醇一 水体系为流动相,其中甲醇一水(35:65)体系保留时 间合适,分离度高,峰形对称,故选定甲醇一水(35: 65)为本实验的流动相. 比较不同柱温2O?,25?,30?,发现柱温对咖啡 因的保留时间影响不大,最终选择柱温在25?下进行 测定. 3结论 利用高效液相色谱法检测小儿氨酚烷胺颗粒中咖 啡因含量,咖啡因浓度在15,140mg?L范围内线 性关系良好,回归方程为=64.556x+71.885,R.一 0.9991,平均加标回收率为106.8,RSD一2.21. 该法快速,简便,结果可靠,适用于小儿氨酚烷胺颗粒 中咖啡因的质量控制和监测. 参考文献: [1]姜红,周希英,贾善学.HPLC法测定tbJL速效感冒颗粒中对乙酰 氨基酚和咖啡因的含量[J].山东医药工业,2002,21(5):9-10. [2]孙桂荣,卢华伟,潘舒平.HPLC测定氨咖麻敏胶囊中各组分的含 量[J].中国药学杂志,2004,39(7):524—544. [33尤伟,张娟.HPLC法测定6种感冒药中咖啡因的含量口].化学工 程与装备,2009,(3):t04,105. [4]朱军,陈中道,赵艳霞,等.7种常用感冒药中咖啡因的HPLC测 定口].济宁医学院,2004,27(1):44—45. DeterminationofContentofCaffeineinChildPediatricParacetamoland AmantadineHydrochlorideGranulesbyHPLC ?YANHai-yan (DepartmentofChemistryandChemicalEngineering,BaoiUniversityofArtsand Sciences,Baoji721007,China) Abstract:AmethodfordeterminationofcontentofcaffeineinChildPediatricParacetamolandAmantadine HydrochlorideGranuleswasdescribedusingHPLC.TheseparationwasperformedonacolumnofEclipseXDB- C18(4.6minx150mm,5肚 m),withmethanol:water(35:65)asmobilephaseataflowrateof1.0mL? min_..Thedeteetionwavelengthwas275nmandtheinjectionvolumewas20” L.Theresultsshowedthatcaf, feineof15, 140mg?L—hadagoodlinearrelationship,theregressionequationforcaffeine was一64.556+ 71.885,R:0.9991,theaveragerecoverywas106.8,andRSD一 2.21.Thismethodisconvenient,accurate, andreproducible.Therefore,itcanserveasanovelwaytodeterminethecontentofcaffeineinChildPediatric ParacetamolandAmantadineHydrochlorideGranules. Keywords:HPLC;ChildPediatricParacetamolandAmantadineHydrochlorideGranules;caffeine (上接第88页) [53VifiasP,CampilloN,Martinez—CastilloN,eta1.Comparisonof [6] twoderivatization-basedmethodsforsolid—phasemicroextraction—’ gaschromatography-massspectrometricdeterminationofbisphe— nolA,bisphenolSandbisphenolmigratedfromfoodcans[J].An— alyticalBioanalyticalChemistry,2010,397(1):115-125. LiuCheng—wen,QuantitativedeterminationofbisphenolsEJ].Qi— ngdaoChemicalIndustry.1990,(1):29—30. [7]ZhangYa—feng,ZhangJin—tao,CaoGui—ping.Simpleandsensitive electroehemiluminesceneemethodfordeterminationofbisphenol Abasedonitsinhibitoryeffectontheelectrochemiluminescenceof luminol[J].JournaloftheChineseChemicalSociety,2008,55(5): 994—1000. 紫外分光光度法测定双酚S 曹桂萍,王蓓蓓,丁其晨,宗玲艳 (常州工学院化工系,江苏常州213022) 摘要:建立了测定双酚S的紫外分光光度法.在pH值为6.0的磷酸盐缓冲溶液中,双酚S浓度在4.8×10, 4.0×10,5tool?L一范围内与其吸光度值呈显着线性相关,相关系数为0.9999,相对标准偏差为0.12,检测限为4.0 ×10tool?L-..该方法快速,灵敏,可用于常见样品中双酚S的测定. 关键词:紫外分光光度法;双酚S;测定 中图分类号:TQ657.32文献标识码:A文章编号:1672—5425(2010)10—0086,03