血清尿素氮的测定血清尿素氮的测定
血清中尿素在氨基硫脲存在下,与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时,可生成双乙
酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物),其颜色深浅与尿素含量成正比,与同
样处理的尿素标准液比色。即可求得血清中尿素的含量。
由于反应在强酸中进行,所产生的羟胺是干挠物质,所以必须用氧化剂将其
氧化除去。
在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定.加入氨基硫脲可增加其稳定性,
还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。
取试管3支,注明空白管、标准管、测定管,按下表操作
管
试 号 测定管 标准管 空白管
剂
血清(ml) 0.02...
血清尿素氮的测定
血清中尿素在氨基硫脲存在下,与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时,可生成双乙
酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物),其颜色深浅与尿素含量成正比,与同
样处理的尿素
液比色。即可求得血清中尿素的含量。
由于反应在强酸中进行,所产生的羟胺是干挠物质,所以必须用氧化剂将其
氧化除去。
在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定.加入氨基硫脲可增加其稳定性,
还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。
取试管3支,注明空白管、标准管、测定管,按下表操作
管
试 号 测定管 标准管 空白管
剂
血清(ml) 0.02 —— ——
尿素氮标准应用液(ml) —— 0.02 ——
蒸馏水(ml) —— —— 0.02
二乙酰一肟试剂(ml) 0.5 0.5 0.5
尿素氮试剂(ml) 5.0 5.0 5.0
混匀后置沸水浴中煮沸12分钟,取出在冷水中冷却5分钟,分光光度计波长
540nm比色,以空白管调零,测定各管吸光度值。
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测定管吸光度血清尿素氮(mmol / L)=——————— X 17.85
标准管吸光度
正常值参考范围3.57~14.28mmol/L
血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、 胆红素及氨等。其中尿素含量约占l/3~1/2。尿素是蛋白质代谢的产物.通过肾脏排出,故测血
清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验,并且其增高程度与病变的严重程度呈平行
关系。
1.尿素氮试剂:蒸馏水lOOml,浓硫酸44ml,85%磷酸66ml,冷却至室温后,加氨基硫脲50mg,硫酸镉(3CdSO〃8HO)2g,溶解后稀释至1000ml。 42
2.20g/L二乙酰一肟试剂:称取二乙酰一肟20g,加入蒸馏水约900ml,溶解后稀释至1000ml.
3.尿素氮标准贮存液(357mmol/L):称取尿素1.072g溶解于蒸馏水中定容至1000ml。
4.尿素氮标准应用液(17.85mmol/L);取贮存液5ml,加蒸馏水至100ml。
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