色甘酸钠滴眼液生产工艺和质量标准的研究（可编辑）

色甘酸钠滴眼液生产和质量标准的研究（可编辑） 色甘酸钠滴眼液生产工艺和质量标准的研究 分类号?? 密级 编号 ........................... 江薛大擎 硕士学位论文 色甘酸钠滴眼液生产工艺和质量标准研究 指导教师 匿鍪 申请学位级别 亟 ? 学科专业 生药堂 论文提交日期 圣:蔓:窆 论文答辩日期圣:鱼:墨 学位授予单位和日期 堑菱太堂 答辩委员会主席 评阅人独创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究 工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外,本论文不包含任何其他 个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果,也不包含为获得江苏大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已 在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名: 汤如仫 ?,:》年扫肖昌日江苏大学硕士学位论文 学位论文版权使用授权书 江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊光盘版 电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致, 允许论文被查阅和借阅,同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国 学位论文全文数据库》并向社会提供查询,授权中国学术期刊光盘版电子杂 志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。 论文的公布包括刊登授权江苏大学研究生处办理。 本学位论文属于不保密?。 指导教师签 学位论文作者签名:毒孙亿 扣毒年月日 沪弓色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 摘 要 色甘酸钠滴眼液作为江苏省基本药物之一,其质量状况应受到重点关注。对 本论文所涉及的九个厂家批样品,除了按照法定的国家标准检验外,还从生 产工艺和质量标准方面进行了探索性研究,增加了近红外光谱鉴别、有关物质测 定、防腐剂羟苯乙酯的测定、渗透压摩尔浓度测定及眼刺激安全实验等,进一步 改进生产工艺,完善检验标准。主要研究内容和结论如下: 一、质量标准提高 、近红外光谱鉴别色甘酸钠滴眼液:运用近红外光谱仪和软件建 立了色甘酸钠滴眼液一致性检验模型,其正品和伪品的近红外光谱差异很大,辨 识度很高,鉴别方法专属性很强。 、法测定含量:采用法来代替原来的紫外对照品法,流动相 为甲醇一。%磷酸氢二钾:。法专属性强,分离效果好,更加 准确地反映了该制剂的质量状况。液相测定平均含量均大于%,含量测定结果 比较好。 、法测定有关物质:参照含量测定项下高效液相色谱方法,采用梯 度洗脱的方法,初步确定了色甘酸钠滴眼液中杂质为辅料峰主要是羟苯乙酯, 没有色甘酸钠分解产生的杂质。有三个厂家未加入羟苯乙酯作防腐剂,而是 采用 苯扎溴铵作为防腐剂,因此没有检出相关的辅料峰。六个厂家均检出了辅料 杂质 峰,结果均.%,有关物质检查结果良好。 、法测定防腐剂羟苯乙酯:为了控制色甘酸钠滴眼液中防腐剂的含 量,增加了羟苯乙酯的检查。色谱条件参照《中国药典》年版中羟苯乙酯 的检查方法。羟苯乙酯的检查结果与有关物质检查结果一致,有三家未检出 羟苯 乙酯峰。六个厂家均检出了羟苯乙酯杂质峰,结果在.%.%之间。 、渗透压摩尔浓度测定:本次研究所涉及的九个厂家均没有测定渗透压摩 尔浓度,现根据《中国药典》年版的方法,采用冰点下降法测定色甘酸钠 滴眼液的渗透压。 四个厂家渗透压值均/,属于低渗溶液,不符合渗透压测定 要求,占总批次的%。五个厂家的渗透压值在一/渗透压摩 尔浓度之间,在渗透压耐受范围之内。其中武汉药业有限公司和宁夏药业有 ?江苏大学硕士学位论文 限公司渗透压值与泪液/基本相等,属于等渗溶液,占总批次 的%。上海制药有限公司、药业股份有限公司利民制药厂和沈阳制药有 限公司三家渗透压值均/,高于泪液/,属于耐受 范围中的高渗溶液,占总批次的%。 、眼刺激实验:采用薪西兰白兔,涉及九个厂家的样品分九组,每组只 家兔。在滴入样品后、、、以及第和第对动物眼睛进行检查, 记录观察的结果。结果表砚色甘酸钠滴艰液是相对安全的,对入体的艰刺激 很小。 二、生产工艺的提高 研究表明,相关生产厂家应改进其生产工艺,选用依地酸二钠做为稳定剂, %葡萄糖溶液作为渗透压调节剂,不必加入缓冲盐调节值。同时,为了减少 人体的损害,应制成单荆量包装,避免加入防腐莉。 关键词:色甘酸钠滴眼液,近红外光谱,含量测定,有关物质,羟苯乙酯, 渗透压摩尔浓度,激实验色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 .’ ’ , 百 . 谢 , , , , . :、 : ,五 , 曲 , .: , 一.%, :.%,. . : , , ,. , , . . , %,:.江苏大学硕士学位论文 . , . .%~.%. , :, . . : , .,,,, , , ,.、,, %.,, . :; ; . ; ;;; 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 目 录 第一章绪论.江苏省基本药物评价性工作简介。 ..简介日本“药品品质再评价”??.. ..江苏省基本药物评价性检验 .色甘酸钠滴眼液简介??. ..基本信息?。 ..色甘酸钠滴眼剂处方??。 ..色甘酸钠滴眼液生产工艺处方一 .色甘酸钠滴眼液抽样基本情况?. ..剂型、规格和包装。 ..抽样地点汇总.国内外检验标准的比较?. ..现有的国内检验标准??. ..国外药典的检验标准??. .法定标准检验情况分析与评价? ..总体检验结果??。 。.法定标准检验结果汇总?. ..不合格品种统计? .本课题的立题背景和意义??.. .本论文研究的主要内容? 第二章近红外光谱鉴别色甘酸钠滴眼液??一 .仪器与试药?. ..仪器.. ..试药 .方法与结果??一 ..近红外光谱采集条件..近红外光谱的采集与处理 ..建立一致性检验模板 、,江苏大学硕士学位论文 .讨论??..?.. ..,.~?~? .本章小结 第三章色甘酸钠漓眼液含量测定研究.裆 .、实验方法? ,.、仪器、试裁与色谱条件? ..检测波长的选择。 ,.溶剡的选择??.. ..线性范围. ,.定量限?, ..检测限?. ..精密度试验??. ..重复性试验?一二. ..稳定性试验 ..加样回收试验? .?样品测定? .结果与讨论?一 ..? .?. .本章小结.. 第四章色甘酸钠滴眼液有关物质研究. . 实验方法. . 仪器、试剂与色谱条件. .,测定方法?....??. ..专属性试验??. ., 有关物质检查结果一?. .结果与讨论.本章小结?一第五章色甘酸钠滴眼液中防腐剂羟苯乙酯研 究??. ?色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 . 实验方法. .. 仪器、试剂与色谱条件.. ..对照品制备??. .. 供试品制各..羟苯乙酯检查结果. .、结果与讨论??. .本章小结 第六章色甘酸钠滴眼液渗透压摩尔浓度研究.. . 实验方法? ..仪器、试剂与实验条件.. ..实验方法。 ..实验结果?. .结果与讨论....二??.. .?. .本章小结? 第七章色甘酸钠滴眼液的眼刺激实验. .实验的基本原则?。 ..定义?:??. ..基本原则?. .实验方法. ..仪器、试药与实验动物??。 ..实验步骤..检查和评分.. .结果与讨论??. .. 评价标准.. ..实验结果.. .. 讨论 .本章小结一 ?江苏大学硕士学位论文 第八章现行标准检验结果与探索性研究检验结果的分析.现行标准与探索性 研究检验结果的比较??. .,近红外模型鉴蹦? .,含量测定.. ..有关物质。 ..羟苯乙酯. ..渗透压摩尔浓度? ..眼刺激实验??.. .通过质量分析发现的主要问题。 ..质量标准和检验标准方面??. ..生产工艺合理性方面的问题?. 第九章总结与展望??. . 主要结论。 ..检验标准提高方面??二. ..生产工艺的合理性方面? .展望??. 参考文献?.. 致谢攻读硕士学位期间发表的论文?.江苏大学硕士学位论文 第一章绪论 .江苏省基本药物评价性工作简介 ..简介日本“药品品质再评价一工程 在药品使用和质量控制等方面,常会出现以下这些问题:.如何提高生物 等效性试验的成功率.如何使市场上不同厂家生产的同一品种或仿制药与原 创药,如何使后期大批量生产的药品具有与临床试验时的药品,以及如何使 大 批量生产的不同批号间的药品,对于不同患者均能具有相同的生物利用度、 相同 的临床疗效呢.如何通过科学、合理的溶出度评价标准,来促进药品生产制 剂工艺的提高与改良,从而完善药品内在品质呢.“后时代’’,我们还该 做些什么难道“’’是药品的终极吗等等 日本厚生省药品管理部门为解决以上问题,于年起,开展了“药品品 质再评价工程?。由于发生以上现象的剂型多为口服固体药物,故该工程主要 是针对难溶于水药物约个品种的片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂等剂型。 “药品品质再评价一工程的目的和内容 目的是保证口服固体制剂对于不同患者均能具有较高的生物利用度;使同一 制剂的不同产品均能具有相同的生物等效性。其手段是:通过全面、细致、深人 的体外溶出度试验研究,对药品的内在品质、有效性及安全性进行评估。其内容 是:通过“在严格的溶出度试验条件下,在各种介质中均具有较高的、一定的溶 出曲线”这一要求,来提高体、内外问的相关性,从而大力推动药品生产企业对 制剂工艺的充分、详尽研究。并最终延伸至:使用溶出度试验来严格控制每一批 药品均能具有相同的内在品质日本最终出台了《医疗用医药品品质情报集》将 公布有效成分、制剂类型、制剂规格、参比制剂的生产厂家、溶出试验参数、 四 条标准溶出曲线、该制剂的溶出度试验质量标准、该原料药的物理化学性质主 要有解离常数、在四种溶出介质中的溶解度以及在水中、不同值的液体中和 光照条件下的溶液稳定性等。 优质药品表现为:患有该疾病的任何人群服用都会有一定的疗效和作用,即 对任何人群均有较高的生物利用度;而劣质药品,可能只会对一部分人群有效如 体内环境正常者,而对另一部分病人疗效甚微如胃酸缺乏者、年老体弱者, 即生物利用度随人体的差异而变化。这一点就是药品内在品质差异的核心所在。 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 如有企业欲仿制已收载人《情报集》中的产品时,必须达到与已公布出的四条溶 出曲线一致,方能申报。这就建立起科学、合理的技术“门槛,使企业不能随便 地“想仿就仿’’,避免了大量的低水平重复和制剂工艺的粗制滥造,大大地提高 了后期生物等效性试验的成功率。 该项工程带来的意义和影响 ?通过此项工程,提高了药品内在品质,极大地促进了日本制药行业对制剂 工艺的全面深人研究,避免了“低水平重复现象的发生。消除了日本药学业 内 人士原有的“仿制药不如原创药的思想,很大程度上地认同了仿制药品质。在 鼓励仿制、降低药价的同时、又不降低品质,为广大患者带来了福音。 ?该项工程的实施对中小企业带来了很大的冲击和触动,对整合药品生产企 业优胜劣汰起到了积极的推动作用。 ?日本由于是采用国家定价、同一制剂的价格在全国范围内销售价均一致的 原则,但政府允许原创厂家或参比制剂的生产厂家,价格可高出同类厂家的 %~%,以鼓励制剂工艺的深人研究和药物研发的原创性。 ?从国家的角度,大力提倡市场应以技术取胜,为日本制药企业进军国际 市场起到了促进、推动作用;许多企业均以有多少个品种被列入参比制剂、收载 于橙皮书而引以为豪,并作为评价企业技术实力、广告推介的主要评价指标。 后期的品质保障 为确保后期大批量生产的药品具有相同的内在品质,保证药品的稳定供给, 本国家管理部门要求生产企业内控标准应严格按照四条溶出蓝线的要求检验 样品。一般情况下,企业仅检测最难溶出的那条曲线和最能体现因工艺波动、各 批号问溶出行为差异最大的那个介质,以对药品的内在品质进行有效监控。同时, 同本国家药品监部部门还责令地方药检所不定期地进行抽查,测定四条曲线 是否 符合《情报集》中的要求。长此以往,自然而然便形成了一个良性循环。 ..江苏省基本药物评价性检验 我国在学习同本的先进经验和做法之后,推行了国家和省级基本药物。 为了更好地掌握我省基本药物的质量状况,年起,省药监局开展了对全省 基本药物评价性检验工作。在基本药物制度出台之前,药品检验工作主要是只常 监督抽样和针对性抽样检验。而实施基本药物制度之后,药品检验工作在原来的 ,江苏大学硕士学位论文 基础上,增加了基本药物的评价性检验工作。即在全省范围内定基本药物品种、 定地区抽样和检验,事先设置某个地区抽哪些品种,而各市药检所承检的品种也 是确定的,全省各地抽取的该品种都送到市药检所检验。省局要求力争在三年内, 对全省的基本药物品种全覆盖,每一个品种都进行评价性检验,了解其质量状况 及质量风险,为进一步加强药品质量监管,完善质量监督技术手段和行政奠 定了坚实基础。 色甘酸钠滴眼液做为江苏省基本药物之一,其质量状况也受到了重点关注。 本次研究共涉及全国九个厂家,批次。除了按照法定国家标准检验之外,还对 其处方、生产工艺、质量标准进行全面的评价,针对评价中出现的问题,对其 质 量标准做了提高性、探索性研究工作,促使相关的生产厂家改进生产工艺, 完善 质量标准,进一步提高药品质量。 .色甘酸钠滴眼液简介 ..基本信息 化学名:,’羟基一,一丙烷基双一氧双一氧代一卜苯并吡喃一羧酸 。 二钠盐 分子量:. 分子式: 色甘酸钠为白色结晶性粉末,熔点?。易溶于水?时, /,不溶于乙醇、氯仿。有吸湿性,无臭,遇光易变色。 色甘酸钠滴眼液为抗过敏药,主要用于春季过敏性结膜炎。其作用机制是 能稳定肥大细胞的细胞膜,阻止肥大细胞脱颗粒,从而抑制组胺、.羟色胺、 慢反应物质等过敏反应介质的释放,进而阻抑过敏反应介质对组织的不良 作用。其抑制过敏反应介质释放的作用,是通过抑制细胞内环磷腺苷磷酸 二酯酶,致使细胞内环磷腺苷的浓度增加,阻止钙离子转运入肥 大细胞内,从而稳定肥大细胞膜,阻止过敏反应介质的释放。 《中国药典》年版叫及年版?二部均收载了色甘酸钠原料及滴 眼液,本次评价共涉及九家企业共批次。对全部抽验的批色甘酸钠滴眼液, 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 除按现行法定标准进行检验外,还进行了提高、探索性的研究。鉴别项下,增加 了近红外光谱鉴别。在检查项下,从滴眼剂的安全性能考虑,新增加了渗透压摩 尔浓度项目,对所有批次进行了测定,结果表明有%是低渗溶液,不符合滴眼 液渗透压的要求;新增加了眼刺激安全实验,结果表明色甘酸钠滴眼液眼刺激性 小,使用安全;新增加了有关物质检测,初步确定了其有关物质杂质为辅料峰; 同时,还增加了对防腐剂羟苯乙酯的测定,以控制滴眼液中防腐剂的含量:含量 测定项下,将原来的紫外检测方法改为液相色谱方法,进行了方法学的研究,比 较了两种检测方法的区别。 ..色甘酸钠滴眼剂处方 从九个厂家中选择其中抽样批次较多的两个厂家,分别进行调研。其它厂家 则根据包装内的书进行统计。由表.、.、.可知,处方一,江苏药 业有限公司、湖北制药股份有限公司、郑州制药有限公司三家选用了羟苯乙 酯作为防腐剂,依地酸二钠作为稳定剂;湖北制药有限公司则没有加防腐剂, 只加入依地酸二钠作为稳定剂。 处方二,药业股份有限公司利民制药厂、武汉药业有限公司、宁夏 药业有限公司则在上述处方一的基础上,加入磷酸二氢钠、磷酸氢二钠作为 调节剂,加入氯化钠作为渗透压调节剂。 处方三,上海制药有限公司和沈阳制药有限公司则用苯扎溴铵代替羟 苯乙酯作防腐剂。色甘酸钠原料均为湖北潜江制药厂提供,按以下处方进行 配制 生产:打“?”为处方上已标注,具体值不详 袁.处方一 . 江苏克胜药 湖北潜江制药 郑州卓峰制药 湖北瑞珠制药 \飞样 \ 业有限公司 有限公司 有限公司 股份有限公司 原辅科\\ 色甘酸钠 ? . . 羟苯乙酯 ? ? . 依地酸:钠 总最 江苏大学硕士学位论文 表.处方二 . 金陵药业股份有限 武汉五景药业 宁夏康亚药 \\醚样 \ 公司利民制药厂 有限公司 业有限公司 原辅料\\\ 色甘酸钠 . ? ’, 羟苯乙酯 ? ? 依地酸二钠? 磷酸二氢钠 ? 磷酸氢二钠 ? ? 氯化钠 聚乙烯吡咯烷酮 . 药用炭 总量 表.处方三 . \\辇样 上海运佳黄浦制药有限公司 沈阳兴齐制药有限公司 \ 原辅料\\色甘酸钠 ? 苯扎溴钱 ’, 依地酸二:钠 ? 吐温 ’, ? 磷酸二二氢钠磷酸氢~:钠 、, ? 氯化钠总最 ..色甘酸钠滴眼液生产工艺处方一 加羟苯乙酯于处方量/的注射用水中煮沸溶解,加入适量色甘酸钠和依地 酸二钠,加热煮沸分钟,加注射用水至全量煮沸分钟,搅拌均匀调整 值为.~.。冷却至以下,打开输液泵使药液循环回流分钟,取样送 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 检,中间体合格后开始灌封,灯检,包装。 ..近几年临床使用不良反应信息 临床上过敏反应不多,偶有刺痛感和过敏反应。 色甘酸钠滴眼液抽样基本情况 ..剂型、规格和包装 本次涉及的批样品均为滴眼液,包装材料均为塑料滴眼剂瓶。批规格 均为毫升:.克,只有一批为.毫升:毫克湖北制药有限公司。涉 及相关的生产厂家一共九家,具体见表.。 表.生产厂家汇总表 .批次 规格 包装材料 生产厂家、\湖北制药股份有限公司 毫升:.克 塑料瓶 一. 湖北制药有限公司 .毫升:毫克 塑料瓶 江苏药业有限公司 毫升:.克 塑料瓶 药业股份有限公司利民制药 毫升:.克 塑料瓶 宁夏药业有限公司 毫升:.克 鞭料瓶 上海制药有限公司 毫升:.克 塑料瓶 沈阳制药有限公司 毫升:.克 塑料瓶 武汉药业有限公司 毫升:.克 塑料瓶 郑州制药有限公司 毫升:.克 塑料瓶 ..抽样地点汇总 见表.。 江苏大学硕士学位论文 表.抽样地点汇总表 .抽样地点 批次 抽样地点 批次常熟市建发医药有限公司 涟水县春堂大药房 赣榆县柘汪镇卫生院 涟水医药有限公司 国药控股常州有限公司 南京市儿童医院国药控股江苏有限公司泰州分公司 南京医科大学第三附属医院国药控股江苏有限公司中西药分公 南京医药南通健桥有限公司 国药控股苏州有限公司 南京益同药业有限公司 国药控股镇江有限公司 南通华氏佳源医药有限公司 南通苏中医药物流有限公司 江苏恩华和润医药有限公司江苏海王星辰健康药房连锁有限公 启东市医药药材有限公司 泗阳华康医药贸易有限公司 江苏华晓医药物流有限公司江苏康瑞医药有限公司 苏州礼安医药有限公司 江苏康之捷医药有限公司 宿迁市宿豫区蔡集镇吴楼村卫生室江苏润东医药有限公司 宿迁市宿豫区来龙镇庄村卫生室 江苏省射阳县医药有限公司 无锡山禾集团医药物流股份有限公司江苏诬邦医药物流中心有限公司 无锡市人民医院昆山市第二入民医院 吴江市国医药业有限公司 徐州淮海药业有限公司 昆山双鹤医药有限责任公司张家港市百禾医药有限公司 涟水万家宜药业连锬古限公司中 涟水县安康药房 巾健之康供应链服务有限责任公司 .国内外检验标准的比较 ..现有的国内检验标准 本次抽样的批色甘酸钠滴眼液,按照生产批号先后顺序,分别执行《中 国药典》年版和年版二部。《中国药典》年版与年版中色甘 酸钠滴眼液的检验标准是一致的,年版药典没有进行修订。具体内容见表 .。 ..国外药典的检验标准 《美国药典》最新版并没有收载色甘酸钠滴眼液。《英国药典》年版 收载了此品种,在《中国药典》的基础上,增加了有关物质薄层色谱检查,具 体 内容见表.。 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 表.国内外检验标准表 . 中国药典 中国药典 序号 项目 英国药典 年版 年版 应为无色或几乎 应为无色或几乎无色 应为无色或几乎无色 性状 无色的澄明液体 的澄明液体 的澄明液体 、化学鉴别 、化学鉴别 、化学鉴别 鉴别 、紫外 、紫外 、紫外 应为.~. 应为.~. 应为.~. 值 装量 装量 装量 装量 可见异物 可见异物 可见异物 可见异物 微生物限度/无菌 微生物限度 无菌 板,乙酸一乙酸乙 薄层色谱 酯一甲苯:: . , , 含量测定 .%~.蝴 .%~ .% .%~.蝴 .法定标准检验情况分析与评价 ..总体检验结果 在全部抽样的批样品中,合格批,合格率%,不合格批,不合 格率%。不合格项目为性状及可见异物。性状不合格批,批白色浑浊,另 批有大量自点析出;可见异物不合格批,是由于性状大量白点不合格而 导致不合格。见图 图.总体检验结果 .. :江苏大学硕士学位论文 ..法定标准检验结果汇总 性状:应为无色或几乎无色的澄明液体。在批样品中,批性状均合格, 只有批不合格,生产厂家均为药业股份有限公司利民制药厂生产。见表.。 表.不合格样品统计表 . 检品编号 生产厂家 生产批号 性状 有大量白 药业股份有限公司利民制药厂 点析出药业股份有限公司利民制药厂 为白色浑 浊液体 鉴别 ?化学鉴别:取加氢氧化钠试液,煮沸分钟,溶液显黄色,加重氮苯 磺酸试液滴,显血红色,均呈正反应。 ?紫外鉴别:取含量测定项下溶液,扫描最大吸收。所有批次鉴别均符 合规定。 检查:包括装量、可见异物及微生物限度或无菌。 ?值:应为.~.。所有的批次值均符合规定。见表. ?装量:所有批次装量均符合规定。 ?微生物限度或无菌:所有批次微生物限度/无菌均符合规定。在所涉及九 个厂家中,只有两家做无菌检查,剩下的七家仍然是做微生物限度。见表.。 表.微生物/无菌检查表 . / 无菌 微生物限度 上海制药有限公司 武汉药业有限公司 宁夏药业有限公司 沈阳制药有限公司 药业股份有限公司利民制药厂 湖北制药股份有限公司 湖北制药有限公司 江苏药业有限公司 ;州制药有限公司 ?可见异物:出于性状大量白点不合格而导致不合格两。其余批均合 江苏大学硕士学位论文 . .. . ?. . . .. . . .. . . .. . . . . .. . 宁夏药业有限公司 . . 上海制药有限公司 . .. . 沈阳制药有限公司. .. .. . . . . . . .. . . . . . 武汉药业有限公司 . . . . . .. . . . .. . .. . 郑州制药有限公司. . 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 按厂家进行分类统计:见表. 表. 各生产厂家紫外含量测定统计表 .企业名称 批数 序号 平均含量 .% 湖北制药股份有限公司 .% 湖北制药有限公司 .% . 江苏药业有限公司 .% . 药业股份有限公司利民制药厂 .% 宁夏药业有限公司 .% . 上海制药有限公司 .% . 沈阳制药有限公司 .% . 武汉药业有限公司 .% . 郑州制药有限公司 由表.可见,九个厂家样品含量都比较高,均大于%,范围从.%~ .%,其中湖北制药股份有限公司、宁夏药业有限公司和上海制药有 限公司平均含量低于%;湖北制药有限公司、沈阳制药有限公司和郑州 制药有限公司平均含量均在%左右;而江苏药业有限公司、药业股份 有限公司利民制药厂和武汉药业有限公司则高于%。从含量分布表中可以 看出,所有批次的色甘酸钠滴眼液含量均在.%.%内,其中%的样品 含量在.%~.%,表明该制剂含量测定结果比较好。 表.紫外含量测定分布表 .含量 数量 百分率% 生产企业数 。% .%~.% .%~.% % .%~】.% % .%一./.%以 江苏大学硕士学位论文 ..不合格品种统计 将两批不合格的品种信息列表如下: 表.不合格品种统计表 . 检品编号 生产厂家 生产批号 抽样单位 保存条件 药业股份有限公司 国药控股苏州 温度: 有限公司 利民制药厂 湿度:% 药业股份有限公司 吴江市国医药业 温度:?利民制药厂 有限公司 湿度:% 由上表可见,两批不合格样品均药业股份有限公司利民制药厂生产,抽 样单位均在苏州市。其中生产批号为的这一批次,在全部抽样样品中发 现与它同批号的两批,均为合格。根据药业股份有限公司利民制药厂提供的 处方来看,采用依地酸二钠作稳定剂,氯化钠作渗透压调节剂,其生产工艺存在 着不稳定性,对产品质量有较大的影响哺。氯化钠溶于水所产生的无机离子会 影响色甘酸钠的稳定性,低温放置小时后会有大量结晶析出,温度升高后结 晶又会溶解。同时,根据其渗透压测定的结果表,两批渗透压值均为, 属于高渗溶液,即说明其氯化钠的量加入偏多,更加容易导致低温结晶析出,产 生白点和浑浊。而从同批号其它两批合格的情况来看,贮存条件对产品质量也有 一定的影响。 .本课题的立题背景和意义 色甘酸钠滴眼液作为江苏省基本药物评价课题之一,其质量应受重点关注, 而且该品种国内外的研究报道比较少,检验标准相对简单,因此选择其做为研究 对象。在本课题中,从含量测定、有关物质、防腐划、渗透压及近红外模型等方 面进行了提高性、探索性研究,全面评价该品种的质量情况及存在的问题,并向 江苏省食品药品监督管理局提交课题报告书,建议采纳相应的研究成果。 在鉴别项下,增加了近红外光谱鉴别。在检查项下,从滴眼剂的安全性能考 虑,新增加了渗透压摩尔浓度项目,对所有批次进行了测定,结果表明有% 是低渗溶液,不符合滴眼液渗透压的要求;新增加了眼刺激安全实验,结果表明 色甘酸钠滴眼液眼刺激性小,使用安全;新增加了有关物质检测,初步确定了其色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 有关物质杂质为辅料峰;同时,还增加了对防腐剂羟苯乙酯的测定,以控制滴眼 液中防腐剂的含量:含量测定项下, 现有标准采用了紫外吸收系数法,比较方 便,快捷,但是专属性不强。研究建立了法测定其含量,并且与紫外法进 行比较,结果表明法含量测定方法优于紫外法。 .本论文研究的主要内容 本课题来源:江苏省基本药物评价性课题。 本论文的主要内容是对色甘酸钠滴眼液的处方、生产工艺、质量标准进行 全面的评价,针对评价中出现的问题,对其质量标准做了提高性、探索性研究工 作。具体内容如下: 色甘酸钠滴眼液的近红外光谱鉴别 色甘酸钠滴眼液的含量测定分析 色甘酸钠滴眼液的有关物质分析 色甘酸钠滴眼液中防腐剂羟苯乙酯分析 色甘酸钠滴眼液渗透压摩尔浓度测定 色甘酸钠滴眼液眼刺激实验 江苏大学硕士学位论文 第二章近红外光谱鉴别色甘酸钠滴眼液 为了更加迅速快捷地鉴别色甘酸钠滴眼液,运用近红外光谱仪和软 件建立了色甘酸钠滴眼液一致性检验模型,完善了该药品质量控制手段,可实现 相关可疑样品的现场快速筛查。 一致性检验‘是一种快捷的图谱比较方法,用于比较未知光谱与某一组参 考光谱是否具有一致性。首先计算参考光谱在每一个波长处光密度的平均值和标 准偏差,其次将每个波长点的平均值加减标准偏差的倍数作为该波长点的可信区 间即限度。待测光谱在该波长点处的光密度与参考光谱平均值的差值除 以标准偏差,得到的就是一致性指数。将待测光谱的与之前设定的 限度 进行比较,从而快速简单地判断待测光谱与参考光谱是否具有一 致性,即通过该光谱是否越过可信区间来快速判断待测样品是否可疑,从而 达到 快速鉴别的目的。 .仪器与试药 ..仪器 ?车载近红外光谱仪,手持. 固体光纤探头德国布鲁克光谱仪 器公司;分析软件德国布鲁克光谱仪器公司;软件中 国食品药品检定研究院。 ..试药 涉及相关的国内生产厂家一共九家,批样品。具体见表.: 表.生产厂家汇总袁 . 批次 生产厂家 湖北制药股份有限公司 湖北制药有限公司 江苏药业育限公司 药业股份有限公司利民制药 。。夏药业有限公司 上海制药有限公司 沈阳制药售限公司 武汉药业有限公司 郑州制药有限公司色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 .方法与结果 ..近红外光谱采集条件 光谱范围: :分辨率: ; ;扫描时问: 以内 置背景为参考;检测器设置:半导体制冷铟镓砷探测器;采样方式:漫反射订。 ..近红外光谱的采集与处理 首先对表的批色甘酸钠滴眼液进行近红外扫描,并绘制图谱。总共选取 批作为参比图谱,见图.。 图. 批参比图谱 .. ..建立一致性检验模板 为初步判断差异性大小,先进行一致性检验。参比图谱选择家公司的批 样品,预处理方法为一阶导数法矢量归一法平滑度为,比对区间为. ~一,一致性指数设置为,保存方法建立一致性检验模板,生成参 比样品的一致性指数分布图见图.。 ? ? ? 一? ? ’? ?? .’? ? ? ? 屯 ? ? ?卜 ? 一 图. 色甘酸钠滴眼液一致性检验模型的分布图 ‘ .. 江苏大学硕士学位论文 在图.建立的一致性模板中,所有样品均未超出设定值,参比可靠,可 作为一致性模板。 以上述图谱作为参比,再从个厂家中各抽取一批样品进行检验,其结果见 图.。 誓.五旺 矗? 五 ,’ 名 日【 ?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 屯 ? ?? ? ? ? 誓’ ? ’ ? ,? ? ? ‘ ? ? ? ?? ? ? ? ? ? ? ?? ? ? ? ?? ? ? ? ??图. 批样品一致性检验结果 . 由图.可知,与色甘酸钠滴眼液一致性模型相比,批样品值均未超出一 致性模型设置阈值。 再对一个伪品进行扫描,并与参比模型进行比较,结果见图.、图.。 ? ?. ? 胛 ? 舅 ??? ??’ ? 、上. 铡 一 ?’ ?’ ? , 审 ?? 毋公 ? ?叮? ? 几 : ; 琵孔孤饿眠攮儿 量地:艮卜二豇;乱工乞:仉吨 图. 色甘酸钠滴眼液正品和伪品的分布图 .. 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 ’’一啊唧,啊????? 图. 色甘酸钠滴眼液正品?伪品的比较? ..由图.、.可以看出,以批样品为参比建立一致性模型,其值均小于。 而伪品值大于.,超出一致性模板设置阈值,有明显差异。由图.可知,? 锄一区域正品为不规则曲线,而伪品为圆滑曲线。该区域伪品和 正品不仅吸收峰形状不同,而且吸收强度也有差异,正品的吸收强度大于伪 品。 .讨论 .. 参与建模的色甘酸钠滴眼液涉及的九个厂家批样品,虽然生产的辅料、 工艺不尽相同,但并不影响其近红外图谱的一致性。因此本研究建立的该近红外 模型完全适用于快速鉴别色甘酸钠滴眼液。 .. 近红外光谱法处理样品具有方便快捷、无前处理、无污染、无破坏性、费用 低等诸多优点,建立的一致性检验模型可以快速鉴别色甘酸钠滴眼液的真伪,从 而加大对假冒伪劣药品的打击力度,保证用药安全。 .本章小结 建立了色甘酸钠滴眼液的近红外光谱快速鉴别方法,运用近红外光谱仪和 软件建立了色甘酸钠滴眼液一致性检验模型,确定为其近红外鉴别模型, 其下品和伪品的近红外光谱差异很大,辨识度很高,鉴别方法专属性很强。 江苏大学硕士学位论文 本次实验所涉及的九个厂家批样品,生产辅料和工艺不完全相同,但其 近红外图谱具有一致性,可以建立一致性模型。近红外光谱鉴别方法简便,快捷, 无破坏性,达到现场快速筛查伪品的目的。色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 第三章色甘酸钠滴眼液含量测定研究 国内的现有检验标准含量均采用了紫外吸收系数法,比较方便,快捷,但是 专属性不强,因此根据查阅参考文献‘如的方法,选择高效液相色谱法,测定 该制剂的含量。 .、实验方法 ..、仪器、试剂与色谱条件 仪器:色谱仪,美国公司 色谱仪,美国公司 紫外分光光度计,日本岛津公司 天平,瑞士塞多利斯公司 色谱柱:柱,岛津.柱. 对照品:色甘酸钠中检所,批号,含量.% 液相色谱条件?:以甲醇一.%磷酸氢二钾:为流动相,甲醇 为色谱纯其它试剂为分析纯:柱温?;检测波长为,进样量,理 论塔板数:。 ..检测波长的选择 精取上述对照品.,置量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精取 ,置量瓶中,加流动相到刻度,作为对照溶液。在紫外分光光度计上, 扫描光谱图,如下:图. .波长. .描述 .. . 图. 紫外最大吸收光谱图.. 由光谱扫描结果可知,有两个最大吸收波长,分别为和。结江苏大学硕士学位 论文 合两个不同波长的液相谱图,在附近色谱图峰面积比较小,在峰 面积比较适宜,确定检测波长为。见图.,图.. ? 廿 』 柚 叫 / 。一,??~~~??一??一?一,? ’???一?~,一???????.??????????????,一?~??一一一 ??口一一?????????一??????????? ????一???????~?~ 图. 波长光谱图 . 孽 嚣 ? 。 ? . 峙 图. 波长色谱图.. 同时,将色甘酸钠滴眼液的辅料由江苏克胜药业有限公司提供按照处方 比例,配成空白辅料,在同样的色谱条件下进样,发现空白辅料无吸收,对样 品 的测定无干扰,见图.。 ”巾~删《‖?坤 兽 ? 口 々 月 日, 一 图.空白辅料的色谱图 .. 色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 .溶剂的选择 取上述对照品,在甲醇一.%磷酸氢二钾及甲醇一乙腈一 ./枸缘酸钠缓冲液.一水:分别进样。在甲醇 一乙腈一./枸缘酸钠缓冲液.一水::这一溶剂 中,色谱峰不出峰,因此选择甲醇一.%磷酸氢二钾作为流动相。 见图. ?一 一???? 厂一丽霹嚏酾面丽自坷丽撕丽丽啕一??? 圳 掣 蓐 答 .‘ 耐 倒 》 / ? 一 .。 ‘ 图.对照品图谱 .. ..线性范围 精取色甘酸钠对照品.,置量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀, 作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液.、、、、、 、置量瓶中,加流动相稀释至刻度,作为对照品溶液。在上述色谱 条件下测定,以峰面积为纵坐标,对照品的浓度为横坐标绘制标准曲线,回归 方 程为..,.。结果表明,在浓度./~. /范围内呈现良好的线性。见图. 一一二::三二。鬯謦誊兰譬童尝天.衾。一,。.。,。。。。 一??%? ’ 等 一’: 卉。篙~/一?? 图. 标:住曲线图..江苏大学硕士学位论文 矿~一 ~~一‖ /\ 七 ? /\ . 项目 % 峰面积.色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 ..重复性试验 取同一批样品份,测定含量,平均值为.%,为.%。见表.。 表.重复性试验结果 .% 项目 . . . . . . . 含量% ..稳定性试验 由于色甘酸钠在流动相中稳定性比较好,因此取同一份样品测定了其,, ,,,, 的稳定性,计算次含量的为.%。见表. 表.稳定性试验结果 . 时间% . . . . . . . .. . 含量% ..加样回收试验 . 精取色甘酸钠对照品 .、 ,置量瓶中,加水稀释至刻 度,摇匀,精取,黄量瓶中,加流动相到刻度,作为对照品溶液。再 精密称取色甘酸钠原料江苏克胜制药厂提供,批号为适量,按处方 比例加入辅料制成模拟样品,同对照品溶液的操作,计算回收率,平均回收率 为 .%,为.%。见表. .色甘酸钠加样回收表 . % 编号 回收率 平均回收率 加入量闪 测得量内 . . .% . . .% . . .% .% .% . . .% . . .% . . . 江苏大学硕士学位论文 ..样品测定 精取各批号项下的样品,置量瓶中,加稀释至刻度,摇匀,精取。 ,置量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作供试品溶液。精密称取 ,置量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,精取, 对照品.、. 置量瓶中,加流动相到刻度,作为对照品溶液。按上述色谱条件测定,以 外标法计算样品组分的含量。同时,将液相方法测定的含量与原标准紫外方 法 测定含量相比较,见表. 表.液相方法测定含量与原标准紫外方法测定含量比较表 . 生产厂家 检品编号 批号 液相 平均 紫外 . 湖北制药股份有限公司 .% .% .% .% . 湖北制药有限公司 .% .% . ..% .% .% ,% ..% .% . .% .% . .% .% . 江苏药业有限公司 .% .% . .% .% . .% .% ..% .% . .% .% . .% ..% .% .% . .% .% .% .% . .% .% . . .% . .% .% .% . ,% .% . .% .% . . .% .% 药业股份有限公司色甘酸钠滴眼液生产工艺及质量标准研究 .% .% . .% .% .% .% . .% .% . .% .% . .% ..% .% .% . .%.% . .% .% . 宁夏药业有限公司 .% .% . 上海制药有限公司 .% .% . .% .% . 沈阳制药有限公司 .% .% . .% .% . .%.% . .% .% ..%.% . .% .% ..% .% .% .% . .% .% . .% .% . 武汉药业有限公司 .% .% . .%.% . .% .% . .%.% . .% .% ..% % . .% .% . 郑州制药宵限公司 .% .% . 由上表可知,液相方法测定的含量大多比原标准紫外方法测定含量要低~ .%,而且两种方法的平均值在范围内,说明用液相法来代替紫外对照品法 是可行的。紫外方法测的值偏高,主要是由于紫外分析方法专属性不强,而液 相 色谱的方法相对而言,专属性较强,不受其它因素的干扰,因此建议将含量测 定 江苏大学硕士学位论文 的方法改为高效液相色谱法。将九个厂家两种方法测定的平均含量进行比较, 见 图.,表.。 匮 ?液相含量 图.紫外与液相含量方法对比图 .. 衄卿 湖北制药股份有限公司湖北制药有限公司江苏药业有限公司药业股份 沈阳制药有限 有限公司利民制药厂宁夏药业有限公司上海制药有限公司 公司武汉药业有限公司郑州制药有限公司 表. 色甘酸钠紫外与液相含量测定方法结果对比表 . 紫外平均 液相平均 序号 企业名称 批数 含量% 含量% . . . 湖北制药股份有限公司 . . . 湖北制药有限公司. . . 江苏药业有限公司 . . . 药业股份有限公司利民制药厂 . . . 宁夏药业有限公司 . 上海制药有限公司 .沈阳制药有限公司 . .武汉药业有限公司 . . . 郑州制药有限公司 . . . 由表.可知,液相测定平均含量均大于%,其中有二家的平均含量在 .%.%,有七家的含量超过%。总体来说,含量测定结果是比较好的,色甘酸钠滴 眼液生产工艺及质量标准研究 反映出抽样所涉及的九个厂家在生产方面均是%投料,没有低限投料。 .结果与讨论 .. 在含量测定时,对样品的溶剂也进行了考察。由于色甘酸钠溶于水,从环保 的角度考虑,因此第一步选用了水作溶剂,第二步用流动相稀释。 .. 由表.中可以看出,九个厂家中江苏药业有限公司值.,表明了 其紫外方法测定含量偏高;其它企业不同批号样品之间的值均?.,表明其 两种方法测定的结果比较接近,没有太明显的区别。综合上述的实验结果, 为了 消除辅料及方法的误差,建议含量测定采用高效液相色谱法。 .本章小结 建立了色甘酸钠滴眼液的含量测定方法。通过对色谱条件进行优化,确定最 佳色谱条件为:以甲醇一.%磷酸氢二钾:为流动相;柱温?;检 测波长为,色谱柱:柱,岛津.柱.,进样量 。方法学考察结果表明,方法准确,简便,具有良好的重复性和稳定性。 由表.可以看出,紫外方法测定含量普遍偏高,专属性不强,因此建议采 用高效液搁色谱法测定色甘酸钠滴眼液的含量。