[DOC] 高效液相色谱法测定泛昔洛韦片有关物质

[DOC] 高效液相色谱法测定泛昔洛韦片有关物质 高效液相色谱法测定泛昔洛韦片有关物质 第40卷第4期 2012年2月 广州化工 GuangzhouChemicalIndustry Vo1.40No.4 February.2012 高效液相色谱法测定泛昔洛韦片有关物质 张羽强 (海南中化联合制药工业股份有限公司,海南海口570216) 摘要:建立了高效液相色谱法分离测定泛昔洛韦片的有关物质的方法.采用Aichrombond—AQC.(4.6mm×150mm, 5m)色谱柱;流动相:乙腈一0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(20:80);流速:1.0mL/min;~::221nm;进样量:20txL.泛昔洛韦 色谱保留时间约为10min,与其有关物质分离度良好.该法准确,灵敏度高,可有效地控制该药品有关物质. 关键词:泛昔洛韦;泛昔洛韦片;有关物质;HPLC 中图分类号:R927.11文献标识码:A文章编号:1001—9677(2012)04—0069—03 DeterminationoftheRelatedSubstancesinFamciclovirTabletsbyHPLC ZHANGYu—qiang (HainanChuntchPharmaceuticalCo.,Ltd.,HainanHaikou570216,China) Abstract:TheRP, HPLCmethodfordeterminationofrelatedsubstancesinfamciclovirtabletswasdeveloped.The chromatographicanalysiswasperformedonAichrombond—AQCl8(4.6×1 50mm,5m)column,themoblephasecon— sistedofacetonitrile0.02mol/L,potassiumdihydrogenphosphatesolution,(20:80).theflowratewas1.0mL/min. anddetectionwavelengthwasat221nm,with20Liniectionvolume.TheretentiontimeofFamciclovirwasabout 10min,andtheresolutionofFamciclovirwithrelatedcompoundswasgood.Themethodwasconvenientandaccurate, anditcanbeusedtocontroltherelatedsubstanceofFamciclovirTablets. Keywords:Famciclovir;Famciclovirrablets:relativesubstances;HPLC 泛昔洛韦片(FamciclovirTablets)在临床上主要用于治疗带 状疱疹和原发性生殖器疱疹…,该药品的质量收载于中国 药典2005年版二部,目前尚未对有关物质进行控制.为了提 高质量标准,本文进行了泛昔洛韦片的有关物质方法学的研究. 1材料与方法 1.1仪器与试药 仪器:SPD一10AVPLC一10ATVP,岛津公司;LC—solutionlite 色谱工作站;AB135一S型电子天平;Aichrombond—AQC18(4.6 ×150mm,)5m,UV一1700型紫外一可见分光光度计. 试药:泛昔洛韦片(批号:20090101,20090102,20090103),自 制;泛昔洛韦对照品(批号:100628,200301),中国药品生物制 品检定所;乙腈为色谱纯;水为纯化水;其它试剂均为分析纯. 1.2色谱条件及系统适用性 1.2.1检测波长的选择 取本品,研细,取细粉适量,加水制成每1mL中含泛昔洛韦 约10的溶液,滤过,取滤液,照紫外一可见分光光度法(中国 药典2005年版二部附录?A)测定.试验结果表明,本品在 221nm,243nm,305nm的波长处有最大吸收.参照国家药典委 员会2010年版《中国药典》征求意见稿中泛昔洛韦,泛昔洛韦片 药品标准有关物质测定,选择221nm作为本品有关物质测的检 测波长(见图1). 作者简介:张羽强(1982一),男,助理工程师.从事药物研究方向. 图1波长选择 1.2.2色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈一0.02mol/L 磷酸二氢钾溶液(20:80)为流动相;流速:1.0mL/min;检测波 长:221nm;进样量:2OL. I.2.3测定法 取本品适量(约相当于泛昔洛韦2Omg),精密称定,置 100mL量瓶中,加流动相使溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续 滤液作为供试品溶液;精密量取供试品溶液1mL,置100mL量 瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液.取对照溶液 20注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰 高为满量程的20%一25%,再精密量取供试品溶液与对照溶液 各20,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时 间的2.5倍. 70广州化工2012年2月 1.3方法学验证 1.3.1系统适用性及辅料干扰试验 溶剂空白:精密量取流动相2O,注入液相色谱仪. 混合辅料空白:按处方配比,精密称取辅料制成混合辅料空 白溶液. 对照品溶液:取泛昔洛韦对照品适量,精密称定,加流动相 溶解并定量稀释制成每1mL中约含泛昔洛韦0.1mg的溶液;作 为对照品溶液. 供试品溶液:取本品样品细粉适量,精密称定,加流动相溶 解并定量稀释制成每1mL中约含泛昔洛韦0.1mg的溶液;作为 供试品溶液. 分别精密量取溶剂空白及上述溶液20,注入液相色谱 仪,记录色谱图,试验结果表明,在该色谱条件下,泛昔洛韦峰与 杂峰的分离度大于2.0,理论板数在4OOO以上,峰对称性较好, 溶剂空白及辅料对本品测定无干扰(见图2). 图2系统适用性 (a:供试品溶液;b:对照品溶液;c:辅料空白;d:溶剂空白) 1.3.2专属性试验 母液:取本品细粉适量,精密称定,加流动相溶解并稀释制 成每1mL中约含泛昔洛韦5mg的溶液,滤过,作为母液. (1)未破坏试验:精密量取母液1mL,置于25mL量瓶中,加 流动相稀释至刻度,摇匀;依法测定. (2)强酸破坏试验:精密量取母液1mL,置于25mL量瓶中,加 1mol/L的盐酸溶液5mL,放置15min,中和后依法稀释并测定. (3)强喊破坏试验:精密量取母液1mL,置于25mL量瓶中,加 0.05mol/L的氢氧化钠溶液1mL,放置2min,中和后依法稀释并测定. (4)高温破坏试验:精密量取母液lmL,置于25mL量瓶中, 置水浴中加热30min,取出,放置室温,依法稀释并测定. (5)氧化破坏试验:精密量取母液1mL,置于25mL量瓶中, 加3%过氧化氢溶液10mL;摇匀,放置20min,依法稀释并测定. (6)光照破坏试验:精密量取母液1mL,置于25mL量瓶中, 于(4500?500)lx光照强度下照射8h,依法稀释并测定. 1750000 1500000 l250000 1000000 毫750000 500000 250Oo0 O Il 1.b 1 d e f 图3泛昔洛韦片专属性试验图谱 (a:未破坏溶液;b:强酸破坏;c:强碱破坏;d:高温破坏; e:氧化破坏;f:光照破坏) 试验结果表明,本品在强酸,强碱破坏条件下样品破坏较明 显,所产生的降解产物峰与泛昔洛韦峰达到基线分离;在高温破 坏条件下样品有所破坏,所产生的降解产物峰与泛昔洛韦峰达 到基线分离;在光照,氧化破坏条件下样品无明显破坏,所产生 的降解产物峰与泛昔洛韦峰达到基线分离;本品专属性好(见图 3). 1.3.3检测限 取泛昔洛韦对照品适量,精密称定,用流动相适量溶解后, 进一步稀释成系列浓度.分别精密量取系列溶液按上述色谱条 件测定,记录色谱图,并对色谱系统进行基线检测,结果泛昔洛 韦的检测限浓度为0.03p.g/mL(S/N3),检测限为0.6ng. 1.3.4进样精密度试验 取本品细粉适量,精密称定,加流动相溶解并稀释制成每 1mL中约含泛昔洛韦2的溶液,精密量取20注入液相色 谱仪,连续进样6次,记录色谱图. 试验结果表明,RSD为0.4%(n=6),进样精密度良好. 1.3.5重复性试验 取同一批样品细粉适量(约相当于泛昔洛韦20mg),称取6 份,按”1.2.3”项下的方法配制溶液并按规定的色谱条件测定, 以泛昔洛韦的杂质的百分含量计算,RSD为0.3%(n=6),表明 重复性良好. 1.3.6溶液稳定性 取同一份样品溶液,按上述的测定方法测定,每2h测定1 次,连续测定5次,以泛昔洛韦的杂质的百分含量计算,RSD为 0.4%,表明溶液稳定性良好. 2样品的测定 取三批样品分别按方法项要求测定,试验结果表明,三批样 品单杂均小于0.5%,总杂均小于1.O%.结果见表l. 表1有关物质测定结果(%) 2讨论 (1)本品在221nln,243nm,305am的波长处有最大吸收. 参照国家药典委员会2010年版《中国药典》征求意见稿中泛昔 洛韦,泛昔洛韦片药品标准有关物质测定波长为221nm,本实验 采用221ilm波长测定其有关物质,通过以上试验可知,在此波 长下更灵敏,更有效测定已产生的杂质. (2)泛昔洛韦为偏碱性药物,在试验中选择磷酸盐溶液作为 流动相的水相,是有利于泛昔洛韦的出峰,参照《中国药典>>20o5 年版二部泛昔洛韦原料的有关物质检查,选择流动相为乙腈一 0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(20:8O),则出的峰对称性好,柱效 高,基线也较平稳. (3)辅料干扰泛昔洛韦片处方中,所用辅料较多,但在该方 法色谱条件下,辅料未出峰,不干扰本品的有关物质测定. (4)在强酸,强碱,高温,强氧化及强光破坏试验中,本品受 强酸,强碱条件的影响较大,但在其它条件也同样会影响本品的 质量,故应注意本品的储藏条件和使用的期限. (下转第85页) .? 柏如加m 第4O卷第4期孟宪朋等:造粒机不锈钢带裂纹原因分析及维护处理 不同,可以采用如下几种处理方法. 3.1钻孔切割法 钢带的边沿出现微裂纹(10mm以下),为了防止裂纹的延 伸,可以在裂纹的顶端钻2—3mm的小孔,也可将钢带裂纹处割 成弧形.为防止由于应力集中而引起裂纹继续延伸或凸起处变 形扩大,钻孔后应将毛刺磨平. 3.2手工氩弧焊 如果钢带边沿出现长度较短的直裂纹时(约1O,20mm), 可以使用专用焊机用熔焊法进行焊接.由于钢带较薄,焊接时 应选用热源比较集中的直流脉冲亚弧焊机,焊丝用专用焊丝,也 可用从材质相同的旧钢带上剪下的细丝(约1mm).焊接电 流控制在:40,50A,电压控制在:7.8,9.5V,焊接速度控制在: 6cm/min,氩气流量约:7,8L/Min.钨极直径选用2.4mm,焊 丝直径约1mm. 焊接时从里向边沿焊接,为防止焊缝冷却收缩后,使其他部 位产生翘曲或变形,应对焊接部位及时用铜板或用水对焊口撤 热,并用手锤敲击,消除应力J. 3.3挖补法 如果钢带出现形状不规则的较长裂纹(约20,50mm),或 局部严重变形,可采用”挖补”的方式进行修复. (1)制作梯形补片.根据钢带边沿裂缝长度,剪下材质相同 的补片.焊缝与钢带边沿呈一定角度可以有效的减少应力集 中,因此补片的形状采用梯形,下梯角约为80o【.对梯形补片 的边沿进行打磨,要求达到平直且无毛刺. (2)切割钢带.以补片为样板,在钢带上划线,用切割机沿 划线切下有裂纹的部分,并将切口进行打磨,清洗. (3)对接焊缝.将”补片”插入钢带切口,使其间隙控制在 0.1—0.2mm.达不到要求,继续用手工修磨.用铜板垫平垫实 焊接部位,并用”C”形夹具加紧夹平钢带与梯形补片. (4)焊接.用专用焊机,按焊接参数采用手工氩弧焊进行 焊接.为了减少焊接变形,焊接时首先点焊梯形的上边,每次焊 接长度10mm,焊后及时用铜板或用水对焊口撤热,并用手锤敲 击,消除应力. (5)焊后打磨.焊后用磨光机打磨焊缝,使其平整. 3.4自动氩弧焊 裂纹在钢带上分布密集或局部变形严重,需要大面积更换 受损部位时,为保证焊接质量和减少焊接应力,应采用自动氩弧 焊法进行修复.根据受损部位的大小,制作”插片”并修好边沿, 再以”插片”为样板,在钢带上划线,沿纵向切下钢带损坏部分并 修好边沿,采用专用焊机和按焊接参数,用自动焊进行焊接. 4造粒机钢带的维护保养 结合钢带出现裂纹的原因,应从以下几个方面加强维护保 养. (1)开机前必须先仔细检查钢带内有无异物,以避免挤压钢 带造成应力集中点. (2)钢带启动时要低速启动,变频器频率应控制在10, 15Hz,以避免启动拉力过大造成钢带变形. (3)确认钢带底部喷淋冷却水正常投用.冷却水水温应保 持在10,15?,且水质清洁,冷却水喷头应能全部投用,否则会 造成钢带表面受热不均,使钢带变形乃至出现裂纹,而且会影响 物料的冷却效果. (4)及时对钢带进行纠偏.钢带跑偏后会使钢带单边受力 过大,严重时甚至会出现钢带边沿擦碰其他零部件的情况,因此 必须及时对钢带进行纠偏. (5)调整造粒机尾端刮刀的压紧度,刮刀不宜太紧,否则会 刮伤或撕裂钢带. (6)对造粒机进行检修时,要注意对钢带进行保护,在钢带 上垫好较厚的木板或棉毯,防止钢带受压或受撞击变形. 5结语 根据造粒机的开工率和实际使用工况,钢带质保期约为12 个月,对钢带的修补及更换耗时长,难度大,严重制约着该套石 油树脂装置的长周期运行.采用正确的使用和保养方法,可以 延长钢带的正常使用期;钢带出现裂纹后,按照正确的焊接工艺 和方法进行修补处理,也可以延长钢带12个月左右的使用寿 命.在目前的维护和维修技术条件下,钢带的使用寿命可以达 到30个月以上,有效降低了设备更新和维护的成本. 参考文献 [1]宋小龙,安继儒.新编中外金属材料手册[M].北京:化学工业出版 社,2007:684—685. [2]贺万华,贺春华.不锈钢钢带的对接焊工艺及应急修补技术[J].焊 工之友,2006,35(1):64—65. [3]叶琦.焊接技术[M].北京:化学工业出版社,2010:235—239. 石_’,_’,!;!!!!;!!!;!!;!!!!!!!!!!!!!!!!! (上接第70页) (5)泛昔洛韦片,《中国药典>)2005年版二部中未进行有关 物质检查,而《中国药典>2005年版二部对泛昔洛韦原料进行有 关物质检查并采用高效液相色谱法,为了提高泛昔洛韦片的质 量控制,所以增加本品有关物质检查并采用高效液相色谱法.限 度与泛昔洛韦原料检查限度一致,经方法学验证,泛昔洛韦峰与 相关杂质峰均有良好分离度,不干扰检测,灵敏度高,专属性强, 重复性较好;样品有关物质检测结果均在限度范围内. 参考文献 [1]ZhangYP.Virmax[J].ChinJNewDrugs,1999,8(2):119. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005版(二部)[M].北京: 化学工业出版社,2005:274—275. [3]中国药品生物制品鉴定所.中国药品检验标准操作规程[M].北 京:中国医药科技出版社,2005.