HPLC测定八珍益母片中阿魏酸含量

HPLC测定八珍益母片中阿魏酸含量 , 48, 表6样品测定结果 Tab.6Resllltsofsamplesdetermined 批号薄荷脑含量(mg/m1)批号薄荷脑含量(mg/m1) 现代中药研究与实践2007年第22卷第2期 ResearchandPracticeofChineseMedicines 4结论 上述鉴别经重现性试验,含量测定经线性范围 考察,稳定性实验,重复性试验,加样回收率试验等 方法学考察,均符合规定.具有灵敏度高,重现性 好,方法学稳定等特点,可以作为控制本品质量的指 标. HPLC测定八珍益母片中阿魏酸含量 吴琼莲,何继祥,程静,郭洪云 (1.云南省曲靖市第一人民医院,云南曲靖655000;2.云南省曲靖市食品药品检验所,云南曲靖655000) 摘要:目的建立八珍益母片中阿魏酸含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,用HypersilODS2 Cl8色谱柱(4.6mm×250mm,5m);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80); 柱温:室温;检测波长:316nm. 结果精密度和稳定性均良好;阿魏酸浓度在5.4—27g.mL范围内与 峰面积呈良好线性关系,r= 0.9998,平均回收率为100.8%(RSD为1.5%).结论本方法专属,重复性 好,可用于八珍益母片中阿魏酸 的含量测定. 关键词:八珍益母片;阿魏酸;HPLC 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编 号:1673-6427(2007)02-0048-03 HPLCDeterminationofFerulicinBazhenYimuPian WUQiong—lian,HEJi—xiang,CHENGJing,GUOHong—yun (1.QujingNO.1Peopleg,SHospitalofYunnanProvince,Qujing655000,China; 2.QujingInstituteforFoodandDrugControl,Qujing655000,China) Abstract:ObjectiveTodevelopamethodfordeterminationofferulicinBazhenYimuPian.Methotis UsingHPLCmethodwithHypersilODS2Cl8column,themobilephasewasamixtureofacetonitrile-0.1mo1.L,: phosphoricacid(20:80),thecolumntemperaturewasroomtemperature,withthedetectionwavelengthat 316nm.Resultsnleprecisionandstabilitywerefine.,nlecalibrationcurveswe relinearintherangeof5.4— 27I~g.mLf0rpaeoniflorin【r=0.9998).Theaveragerecoverywas100.8%,RSDwas1.5%.Conclusion ThemethodwasselectiveandreproduciblefordeterminationofferulicinBaz henYimuPian. Keywords:BazhenYimuPian;ferulic;HPLC 八珍益母片由益母草,党参,熟地黄,当归, 白芍,茯苓,白术,川芎,甘草等九味药组成.具有补 虚益气,养血调经之功效.用于妇女气血两亏,体虚 乏力,月经不调.当归为该药的主药,阿魏酸又是当 归主要成分.本文参照文献采用高效液相色谱 法测定八珍益母片中阿魏酸含量. 1仪器与试药 Agilent1100高效液相色谱仪(包括G1311A四 收稿日期:2006-12-18 元梯度泵,G1313A自动进样器,G1314A可变波长 紫外检测器,G1379A真空脱气机,G1316A柱温箱, G2170AA色谱工作站);METI?LEAE240电子天平 (上海梅特勒-托利多仪器有限公司);BUG25-06超 声波发生器(上海必能信超声仪器有限公司). 阿魏酸对照品(批号:773-9001,中国药品生物 制品检定所提供). 乙腈为色谱纯;磷酸,乙醇为分析纯;水为重蒸 馏水. 八珍益母片由云南曲靖药业有限公司提供. 现代中药研究与实践2007年第22卷第2期 ResearchandPracticeofChineseMedicines 2实验方法 2.1色谱条件HypersilODS2C8色谱柱(4.6 mm×250mm,5m);乙腈-0.1%,磷酸溶液(20: 8O)为流动相;流速:1.0mL/min;柱温:室温;检测 波长:316am., 2.2对照品溶液的制备取阿魏酸对照品5.4 mg,精密称定,置50mL量瓶中,加70%乙醇溶液适 量溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置100 mL量瓶中,加70%乙醇溶液稀释至刻度,摇匀,即 得(含阿魏酸5.4g/mL). 2.3样品溶液的制备取八珍益母片1O片,除去 薄膜衣,精密称定,研细,称取约0.8g,置具塞锥形 瓶中,精密加人70%乙醇溶液20mL,密塞,称定重 量,超声处理(功率250W,频率25kHz)30min,放 冷,再称定重量,用70%乙醇溶液补足减失的重量, 摇匀,滤过,取续滤液,即得. 2.4阴性样品溶液的制备取不含当归的八珍益 母片处方,按八珍益母片制法制备阴性样品,按”2. 3”项下的样品溶液的制备方法制备,即得. 2.5测定方法精密量取对照品溶液与样品溶液 各1OL,注人液相色谱仪,色谱峰面积,按外 标法计算,即得. 2.6系统适用性试验在上述色谱条件下,取阴性 样品溶液,对照品溶液与样品溶液各1OL进样,记 录色谱图.阿魏酸的保留时间约为8.5min,理论板 数按阿魏酸峰计算为12250.阴性样品溶液在与阿 魏酸对照品峰处未见色谱峰出现,说明八珍益母片 中的其他药物及辅料对测定无干扰,结果见图1. 图1阿魏酸对照品(A)样品(B)阴性样品(c)HPLC图 Fig.1HPLCchromatogramofferuliereference(A).samples(B) andnegative(C) .---—— 49.---—— 2.7线性关系精密吸取阿魏酸对照品溶液5, 1O,15,2O,25L分别注人液相色谱仪中,测定色谱 峰面积.以阿魏酸进样质量(W,g)为横坐标,3次 峰面积的均值(A)为纵坐标进行线性回归,得回归 方程A=5.52X103W+l1.7O,r=0.9998.样品浓 度在5.4—27I~g?mL线性关系良好.见表1. 表1线性关系 Tab.1Linearrelation 进样量/L峰面积 5 1O 15 2O 25 155 316 460 611 753 2.8精密度试验 精密量取阿魏酸对照品溶液1O,连续进样6 次,测定阿魏酸峰面积,峰面积的RSD=0.6%(n= 6). 2.9重复性试验取八珍益母片样品细粉约0.8 g5份,精密称定,,按”2.12”项下的方法测定,计算 结果,其RSD为0.8%. 2.1O稳定性考察精密吸取八珍益母片样品溶液 1OL,分别在0,1,2,4,6,8h注人液相色谱仪,测 定色谱峰面积,结果阿魏酸峰面积的RSD为1.6% (n=5).结果表明,样品溶液在制备后8h内测定 稳定. 2.11回收率试验取已测定含量的八珍益母片 (批号20060401,阿魏酸含量85.68g/片,平均片 重0.3942g)约0.4g,精密称定,精密加人阿魏酸 对照品溶液(5txg?mL)10mL与70%乙醇溶液 10mL,按”2.2与2.3”项下的方法分别制备对照品 溶液与样品溶液,按”2.5”项下方法测定,结果平均 回收率为100.8%,RSD=1.5%(n=5).见表2. 表2回收率试验结果 Tab.2Resultsofrecoverytest /g/g/g/g)/%率/%/% 0,427892,9854,00146,68100,0 0,424492,2454,00147,541024 0.416790,5754,00143,8698,7100,81,5 0,397686,4254,00140,98101,0 0,402387,4454,00142,441019 2.12八珍益母片中阿魏酸的含量测定取3个批 号的八珍益母片,按”2.3”项下制备样品溶液,按 “2.2”项下制备对照品溶液,取精密吸取对照品溶 一 50, 液与样品溶液各10L,注入液相色谱仪,测定峰面 积,按外标法计算,结果见表3. 表3样品测定结果(=3) Tab.3Resultsofsamplesdetermined(n=3) 3讨论 3.1八珍益母片中当归为主药,阿魏酸为当归J 的主要成分,它们在70%乙醇溶液中易溶解,故选 用70%乙醇溶液作溶剂.实验证明,样品超声处理 (功率250W,频率25kHz)30min能将其中阿魏酸 提取完全,操作方便快速. HPLC法测定消炎止 现代中药研究与实践2007年第22卷第2期 ResearchandPracticeofChineseMedicines 3.2样品分离条件的选择参照《中国药典》_2测 定当归中阿魏酸所用的流动相和检测波长进行试 验,结果乙腈_().1%磷酸溶液(20:80)为流动相能 使阿魏酸峰与杂质峰很好分离,且阴性样品无干扰, 分离效果满意. 3.3本方法专属性,重复性好,可用于八珍益母片 中阿魏酸的含量测定. 参考文献 [1]国家药品标准(中药成方制剂.第六册)[S].北京:人民卫生 出版社,1992.6. [2]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京:化学工业出版 社,2005.89. [3]任仁安主编.中药鉴定学[M].上海:上海科学技术出版社, 1986.132.】35 痢灵片中苦参碱的含量 张小琼,杨春梅 (广州白云山制药股份有限公司,广东广州510515) 摘要:目的建立消炎止痢灵片中苦参碱的含量测定方法;方法采用PhenomenexLuna氨基键合柱(5 txm,250mm×4.6mm);乙腈.无水乙醇.3%磷酸溶液(80:10:10)为流动相;检测波长为220nm.结果理 论塔板数按苦参碱峰计算应不低于2000,苦参碱的线性范围为0.25,5g,r:0.9988,回收率为97.6%, RSD为1.6%.结论本方法灵敏,准确,可用于消炎止痢灵片的质量控制. 关键词:高效液相色谱;苦参碱;消炎止痢灵片 中图分类号:R927,2文献标识码:A文章编号:1673-6427(2007)02-0050-02 DeterminationofMatrineinXiaoyanZhililingTabletsbyHPLC ZHANGXiao—qiong,YANGChun—mei (GuangzhouBaiYunShanPharmaceuticalCo.,Ltd.Guangzhou510515,China) Abstract:ObjectiveTodeterminematrinecontentinXiaoyanZhililingtablets;MethodsPhenomenex LunaNH2(51xm,250mm×4.6mm)unlalyticalcolumnwasused;mobilephaseasacetonitril—ethanol一3%phos— phoficacid(80:10:10),detectionwavelengthat220nm.ResultsThelinearrangeofmatrinecontentdetermi— nationwasfrom0.25g, 8g,r=0.9993.Therecoveryoftheaddedsamplewas97.6%,RSDwas1?6%? ConclusionThemethodwassimpleIsensitive,accurateandbeusedasoneofmethodforqualitycontrolofthis preparation. Keywords:HPLC;Matrine;XiaoyanZhililingtablets 消炎止痢灵片收载于卫生部部颁标准,由苦参 和甲氧苄啶(TMP)组成的中西结合半浸膏糖衣片 剂,具有清热燥湿,抗菌消炎等功能.标准中只规定 定性检查而无含量测定,为了控制制剂质量,参考有 收稿日期:2007-01.10 关文献,建立了HPLC法测定消炎止痢灵片中苦参 碱含量的方法. 1仪器和试药 高效液相色谱仪:日本岛津LC一10ATvp型泵, SPD.10Avp紫外检测器,l0L定量进样环,TL9900 色谱工作站.色谱纯乙腈;分析纯磷酸;分析纯无水