临床检验-隐血试验

临床检验-隐血试验 文件编号: 东莞常平医院 DGCPH-CL-SOP-07-22 临床检验实验室 版序:2005-1 页码:第1 页，共3 页 隐血试验 上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故称为隐血。 [标本采集与处理] 用洁静的容器，盛装小量的待检标本，立即送检。 [质量控制品] 配制 3 %红细胞悬液。 [操作步骤] 一、免疫学检测法 (一)检测原理 大便或其它液体隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。因此，本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食肉类。 (二)操作步骤 取一片洁净干燥的载玻片，滴加2—3滴蒸馏水，取粪便小许，调成均匀混悬液。取便隐血试纸条，按说明书操作，将试纸条的反应端浸湿。在5min内观察结果。若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性;若只有C线呈色为阴性;若丁线与C线均不显色，说明试验无效。 (三)质量控制 1(敏感性和特异性 (1)敏感性: 样品中血红蛋白浓度超过0.2μg,m1，就可得到阳性结果。 (2)特异性: 便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验，样品中若含有如下 干扰物，实验结果不会受影响: 文件编号: 东莞常平医院 DGCPH-CL-SOP-07-22 临床检验实验室 版序:2005-1 页码:第2 页，共3 页 隐血试验 鸡血红蛋白 500μg,ml 牛血红蛋白 500μg,m1 马血红蛋白 500μg,ml 猪血红蛋白 500μg,m1 羊血红蛋白 500μg,m1 兔血红蛋白 500μg,m1 辣根过氧化酶 200μg,m1 2(试验局限性 (1) 本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变，然而，由于家族性息肉或直肠 癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀，都可造成 阴性结果。 (2) 本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道的 药物造成便潜血所至。 (3)本检验法只能作为筛选或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜 和X光检查。 3(室内质量控制: 每天用质量控制品进行同步检验一次，以确保试剂质量。 二、试带法 国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带，使用方便，患者也可自留标本检测。 三、邻甲联苯胺法 (一)检测原理 血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过氧化氢，放出新生态氧，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。 (二)试剂 1(10g,L邻甲联苯胺(o-tolidine)溶液: 取邻甲联苯胺1g，溶于冰醋酸及无水乙醇各50m1的混合液中，置棕色 瓶中，保存于4?冰箱中，可用8—12周，若变为暗色，应重新配制; 2(3,过氧化氢液 文件编号: 东莞常平医院 DGCPH-CL-SOP-07-22 临床检验实验室 版序:2005-1 页码:第3 页，共3 页 隐血试验 (三)操作步骤 1(用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉签上或白瓷板上。 2(墒加0.15L/L邻甲苯胺冰乙酸溶液2—3滴于粪便上。 3(滴加3,过氧化氢2—3滴。 4(立即观察结果，在2min内显蓝色为阳性。 (四)结果判断 阴性:加入试剂2min后仍不显色。 十，加入试剂10s后，由浅蓝色渐变蓝色。 2十:加入试剂后初显浅蓝褐色，逐渐呈明显蓝褐色。 3十:加入试剂后立即呈现蓝褐色。 4十:加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。 (五)质量控制 1( o—t01idine[3，3’-Dimethyl-(1，1’-biphenyl)—4，4’-Diamine， Cl4 Hl6 N2,MW212(3]，中文名称邻甲联苯胺，亦称邻联甲苯胺。另有， o—t01uidine(2。Aminot01uene，C7H9N，MWl07。2)，中文名称邻甲苯 胺，可用于血糖测定，两者应予区别。 2(粪便标本必须及时检查，以免灵敏度降低。 3(3,过氧化氢必须有效，应进行阳性对照试验，将过氧化氢滴血片上，产 生泡沫，或滴加于重铬酸钾硫酸液，显褐色示有效。 4(强调实验前三天内禁食动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、中 药，以免假阳性反应。齿龈出血、鼻出血、月经血等均可导致阳性反应。 5(用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)，以破坏污染的过氧化物酶。 [临床意义] 1(消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验 可阳性。 2(消化道恶性肿瘤时，粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性。 3(本法可作为消化道恶性肿瘤普查初筛试验。