【doc】浅谈单双层培养基对抗生素微生物检定法的影响

【doc】浅谈单双层培养基对抗生素微生物检定法的影响 浅谈单双层培养基对抗生素微生物检定法 的影响 科学论坛 l-? 浅谈单双层培养基对抗生素微生物检定法的影响 李广英 (哈药集团制药六厂黑龙江哈尔滨15000I) [摘要】本文针对抗生素微生物检定法单双层培养基对含量的影响进行,通过对比实验和对实验结果的研究得出结论,并提出了针对性的建议. (关键词j抗生素微生物检定可信限一次成功率控制方法 中图分类号:tp319文献标识码:A文章编号:1009—914X(2011)24—0082—0l 抗生素微生物检定法系在适宜条件下,通过检测抗生素微生物的抑制作用 计算抗生素活性(效价)的方法.此方法与临床用药的要求相符合,能直接反 映出抗生素的医疗价值琼脂扩散法是利用抗生素在摊布特定的试验菌的固 定培养基内成球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区I抑制了试验菌的繁 殖而呈现出透明的抑菌圈.此法系根据一定药品浓度范围内,对数剂量与抑 菌圈直径(或面积)成线性关系,采用量反应平行线原理的设计,通过比较 品与供试品产生抑菌圈的大小计算出供试品的效价. T簟双层培井基对抗生素检定法的影响 1.1单双层培养基的选择 笔者从事多年抗生索检验工作,从实验中得出培养基的质量,配制,使用对 结果影响很大.培养基的质量好坏,稳定与否对菌的影响很大,如果培养基分 装后溶解性好,流动性好可选择双层培养基,如果培养基分装后溶解性好,流动 性不好可选择单层培养基,因为菌层培养基是否摊布均匀对可信限影响很大. 1.2双层培养基 系按药典要去求,在培养皿内平铺培养基2o毫升作为底层,另取规定试验 菌悬液适量加入培养基内,混匀.在每个培养皿中分别注入5毫升,在底层上 摊布,作为菌屡.由于双礤内径为9O毫米,菌层培养基5毫升,则菌层厚度仅 0.78毫米,?所以,菌层摊布均一性对试验结果影响非常大. 1.3单屡培彝基 取规定试验蘸悬液适量加入培养基内,混匀.在每个培养皿中分别注入 15毫升,在培养皿巾摊布.迅速摇匀.则菌层厚度为2.34毫米,相对双层培养 基茵层摊稚均_性更好,可信限和偏离水平指标更易达到要求. 2簟溉息墙井基使用的对比试验 取庆大霉素标准品,按照标准制成5u/ml和lOu/ml的溶液,使用抗生素检 定培养基I(PH8.O)中检所生产.单层培养基15毫升,双层培养基底层20毫 1单层 臻缸slD鼗DtlDr2ym 鼍 IloIl5.6彳I8.O0l毫66l8..哇67037 韩睫l5.95l&20l6.鹕18.0768.3i 髯o3l爱97l&0ii6,o818.?68.I2 拍l6.62l&60l6l62i8.607n44 攮癌l反l2l8ll016.01l8.}868.4I 蜘6l6.a0l8.10"O0l8.168.20 ?蠢L6.85l&olt5.85i8.?67.l 冀礴16.哇哇l&《Ol6.45l8.qO69.69 l熊62t《5.42128t'6t45.45648,25 试瘫阕FI=O.1294P=O05F-----~3200 围妇F2=6023.6071P=O.0iF=8.0200 偏离耳,行F3_-0.0542P=0.o5F4.3200 P>D-05 荆闽F6=1674.5969P=aOlF一4.8700 礁阐F7=3706316P0.01F一3.8100 壤数8圈数K一4街汁效衍$,t=1090...? 齐IJ闻比Z??浓度比0I.??对数值I D.30】O t裹t2.0800样品方美s'0.0070自由霞 f=2l R的对敷肛0.00i5回归系数g:O.0009标准误 蓑瓤=0.0042 对数比值R=1.0035Pt上隈Ph=l.0242R下限 Rl=0.9833 平均可信限辜Pt的FL----2.o4% 82}科技博览 升,菌层5毫升.做回收率试验,结果如下 表2双层 礁DztPs2DtiDt2ym 廿 丐 Noll5.67l8,Do15.66l8.0467037 ll.2l5.95l8.,o16.凹t&衅68.3l }io3l5.97l8.Ol16.08l8.066&l2 H舛i6瞳l8.?l6218.6010.44 Nl6.1218.i0l6.Oll8.186&4l H?lS.1016.?l8.1O6&2O No7l5.8518.0ll5.85l&o087.7l No8l6.4418.40l6,45l8.406孰69 ykl28.62t45.42t28.76l45.45548.25 试品闻F1:0.1294P=0.05F=4,3200 围l}j~=5023.6071P=O.OlF8..200 偏离平行F3=0.嘲2P=n05F=4.3200 P>O.0, 荆阑弼=1674.5969P--O.01F=4.8708 磷阗--~,06.,I6p=O.OlF=3.8100 罐墅8匿数K=4估计热价kt=l000.000O 荆问比r=2.0000浓鹰比D=1.6980对数值I: 0.3010 t衰t=2.0800样品方差s2:0.0070自由度 f=2l R的对数^{=门|0o15回归系数g----O.0009标准误 差赫=0.6驰2 对数EL僵R==1.0035Pt上限Ph=1.0242R下限 R1=0.9833 平均可僖;艇章Pt的FL%=204% 综上所述,得到以下结论: (1)当使用抗生素检定培养基I时,由于粘稠性较高,流动性差,可改用单 层培养基15毫升. (2)通过试验可以看出,单层培养基的可信限,重复性均较双层培养基要 好,测定结果单层培养基的回收率比双层培养基的回收率更接近真实值. 参考文献 [1]帅兆雄.抗生素微生物检定中影响实验结果的因素初探.湖南医学高 等专科学校.1999.1(3).12. [2]姚尚辰.中国药品检验标准操作规范.2010年版.中国医药科技出版 社. [3]中国药典2010年版二部附录. [4]药品检验操作规范.1995年版.国家医药管理局119-127.