【doc】 酒石酸酯固载薄层色谱法拆分盐酸克伦特罗对映异构体

【doc】 酒石酸酯固载薄层色谱法拆分盐酸克伦特罗对映异构体 酒石酸酯固载薄层色谱法拆分盐酸克伦特 罗对映异构体 2005年11月 November2005 色谱 ChineseJournalofChromatography VO1.23N0.6 687 酒石酸酯固载薄层色谱法拆分盐酸克伦特罗对映异构体 于金刚,刘素琴,黄可龙,焦飞鹏,彭霞辉 (中南大学化学化工学院功能材料化学研究所澳南长沙410083) 关键词:(2R,3R)-酒石酸-二环己酯((2R,3R)-dicyclohexyltartrate);薄层色谱(thinlayerchromatography);拆分(enantiosepa- ration);克伦特罗(clenbutero1) 中图分类号:0658文献标识码:B文童编号:1000.8713(2005)06.0687.01 药物对映体的各个单体通常具有不同的生物活性,药 理活性,所以需要对它们进行拆分以得到旋光单体….D一和 L一酒石酸是廉价的手性原料,(2R,3R)一酒石酸可直接从 自然界获取.选择酒石酸衍生物例如酒石酸二酯,酒石酸单 酰胺,酒石酸二酰胺等用于对映体拆分,效果比较令人满意. 本工作将(2R,3R)一酒石酸一二环己酯固载在硅胶GF254板 上,成功地拆分了盐酸克伦特罗对映体,并对其拆分机理进 行了探讨. 1实验部分 1.1仪器与试剂 ZT?I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂);P?1 型薄层层析展开缸(上海信谊仪器厂).(2R,3R)?酒石酸 (常茂生物化学股份有限公司;?99.7%);(2R,3R)一酒 石酸一二环己酯参照文献[2]合成. 1.2酒石酸酯固载薄层色谱板的制备 分别准确称取0.25,0,50,0,75,1.00g(2R,3R)一酒石 酸一二环己酯,按文献[3]的制备薄层板. 1.3薄层色谱分离 采用乙腈一叔丁醇(体积比为50:50)为展开剂,在室温 下按文献[3]的方法进行实验和分析数据. 2结果与讨论 2.1分离条件的选择 分别采用乙腈一不同种类的醇(体积比为50:50)作展开 剂,在室温下拆分盐酸克伦特罗对映体.考察结果明,采 用正丁醇,仲丁醇,叔丁醇,正庚醇,正辛醇时均可拆分盐酸 克伦特罗对映体,其中正丁醇,仲丁醇,叔丁醇可实现基线分 离.而其他醇(甲醇,乙醇,异丙醇,正戊醇,异戊醇,正己 醇)为展开剂时无法拆分盐酸克伦特罗对映体.结果还表 明,使用乙腈一叔丁醇为展开剂时,分离度最大,分离效果最 好,所以本实验采用乙腈一叔丁醇作展开剂.实验还考察了 乙腈一叔丁醇的比例对拆分效果的影响,结果表明,当体积比 为50:50时分离效果最好. 考察了(2R,3R)一酒石酸一二环己酯固载量对拆分效果 的影响,结果发现,将0.5g(2R,3R)一酒石酸一二环己酯固载 于15.0g硅胶上而制备的薄层板,其分离效果最好,分离度 为4.76.且样品拆分后在薄层板上的两对映体斑点大小一 致,分离效果较好. 缓冲溶液一般可改善色谱的拆分效果.本实验采用乙 腈一叔丁醇(体积比为50:50)为展开剂拆分盐酸克伦特罗对 映体时有轻微拖尾现象,因此实验中配制了0.1mol/L Na,HPO缓冲溶液(pH3)作为拖尾抑制剂添加到展开剂 中,当其比例在0.2%,2.O%变化时,不仅不能改善拖尾现 象,还严重影响对映体的拆分效果,分离度均为0.由于拖 尾现象非常轻微,故实验中选择的展开剂不添加缓冲溶液. 综上所述,选择拆分条件为:将0.5g(2R,3R)一酒石酸一 二环己酯固载于15.0g硅胶上制备薄层板,采用乙腈一叔丁 醇(体积比为50:50)为展开剂,在室温下拆分盐酸克伦特罗 对映体. 2.2(2R,3R)-酒石酸-二环己酯的结构特点和拆分机理 (2R,3R)一酒石酸一二环己酯具有弹性的羟基和刚性的 羰基,有与被拆分手性溶质相作用的位置,主要与多种类型 手性化合物发生氢键相互作用实现手性识别,具有较广泛的 适用性.在进行薄层色谱拆分时,克仑特罗对映体与覆盖于 固定相表面的(2R,3R)?酒石酸一二环己酯形成不同的分子 间作用力(见图1),故在薄层板上的移动速度不同.(+)一s 构型的克仑特罗对映体与固定相的作用力强,存在3个主要 的作用点,在硅胶板上移动速度相对较慢,展开后位于硅胶 板的展开起始端近点;而(一)一兄构型的对映体与固定相仅 能形成”两点作用”,在硅胶板上移动速度快,位于硅胶板的 展开前沿的近点,因而可以实现拆分. O O — Cl| . .++H一. O?———’H—N I,C(CHHlJ,}J (+)一S-Clenbutero 图1(+)一一克仑特罗与固定相(2R.3R)一酒石酸? 二环己酯相互作用模式 参考文献: [1]朱全红,邓芹英,曾陇梅.药物分析杂志,2002,22(2):155 [2]HeldinE,LinderKJ,PetterssonC,LinderW,RaoR. Chromatographia,1991,32(9-l0):407 [3]于金刚,黄可龙,焦飞鹏,彭霞辉.色谱,2005,23(4):431 收稿日期:2004—10-09 作者简介:于金刚,男,硕士,E—mail:yujingangcsu@163.corn. 通讯联系人:黄可龙,男,教授,博士生导 师,Tel:(0731)8879850,E—mail:klhuang@mail.csa.edu.ca. 基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.20376085)和中南大学研 究生教育创新选项立项项目(No.040206) . ,, —卜 {3