胎垂体细胞培养制备生长激素治疗垂体性侏儒症

胎垂体细胞培养制备生长激素治疗垂体性侏儒症 胎垂体细胞培养制备生长激素治疗垂体性 侏儒症 ? 42铁道医学1999年第27卷第1期 ? 胎垂体细胞培养制备生长激素 治疗垂体性侏儒症 U 苎兰垒圭.栾向萍丁秀芳刘志华韩春生王淑琴 齐齐哈尔铁路中心医院内分泌科(齐齐哈尔161000) 【摘要】目的用含生长激素的胎垂体细胞培养踱治疗垂体性侏懦症.用踟1641)培养坡,在0培养箱 内短期培养妊娠中期以上水囊弓【产胎儿垂体细胞,将换下来的培养液制作成含生长激素(GH)注射剂,治疗垂体性侏懦 症.结果治疗后生长速度加快,与治疗前相比有显着性差异(P<001)结论胎垂体细胞培养液治疗垂体侏懦症 是临康一种可行的方法 【关键词】堕至兰立监培养坡重堡牲哆 自1958年Rebeen…首次用人尸垂体提取生长激鼎医学生物有限公司药盒)测定培养不同时间调 素(GH)治疗1例垂体性侏儒症获效以来,人生长激素 (hGH)促进垂体性侏儒症患者的生长已得到普遍证 实【_jJ.但由于人尸垂体提取GH来源有限,不能广泛 应甩于临床8O年代开始国内外利用重组DNA技术 人工合成GH,治疗垂体性侏儒症亦获效,但由于价格 昂贵,病人难以承受作者根据垂体细胞胚胎发育特 点,进行人胎垂体细胞培养,将更换下来的培养液经放 免测定有可观的GH浓度,将培养液制作成注射剂,并 试治疗l5侧垂体性侏懦症,其中有完整资料的1】例 获得较好的近期效果.现报道如下. 1对象与方法 11对象确诊的垂体性侏儒症患者ll例,男7例, 女4例;年龄()1.45?3.74)岁. 11胎垂体细胞及含GH注射剂的制备胎垂体细 胞来源于健康妊娠妇女4,10个月水囊引产胎儿及足 月分娩后窒息死亡的胎儿.2h内无菌条件下取出垂 体,经4Hanks液漂洗2次,剪成1111大小颗粒,放 置50lnrn玻璃器内,加入5mlRPMI1640培养液(GIB. CO产品),添加体积分数为20%的HRs—Ab,质量浓 度为0238%的HEPES,置于135060一A型培养箱内 (西德产),在37?,95%空气,5%CO,象件下培养.每 2d调换培养液调换下来的培养液一部分采样测GH 余下培养液用065DI,0.22tzm孔径的混合纤维 浓度, 素酯滤膜(上海医药工业研究所产品)过滤.在无菌条 件下分装,封瓶,一2O?冻存待用. 1.3胎垂体GH浓度测定应用放免双抗法(天津九 戈39岁.千台医师 换下来的培养液中的GH浓度,作为观察垂体细胞功 能及注射剂量的指标. I4垂体侏儒症的诊断(I)身高占同龄,同性别 儿童身高的第3位百分数或其以下;?生长速度每年 <4em;(3:骨龄落后于实际年龄;(4胰岛素低血糖试验 或运动左旋多巴试验,GH峰低于7f螭-L-0;:5)智力正 常;?除外其它疾病(营养不良,性染色体异常,原发性 甲减等). 1.5其它垂体激素的测定应用放免双抗法(北京华 英放免技术研究所药盒)测定治疗前后病人血中促甲 状腺激素(TSH),泌乳素(PRL),促黄体生成素(LH),促 卵泡刺激素(FEH),雌二醇(),睾酮(T),皮质醇(F) 浓度,作为观察甲状腺,性腺,肾上腺皮质功能变化指 标. 16胎垂体培养液制备GH注射剂的保存和使用 病人用冰筒取回冻存的注射液,然后放人家用冰箱冷 冻屡出保存.在注射前15rain将注射剂从冰箱内取 出,放在室温下融化后即用每天晚上入睡前05h, 经常规消毒后于臀部肌肉注射,每次1剂. 1.7统计学处理数据用?s表示,秩和法检验. 2结果 2.1患儿治疗前后年生长情况治疗前年生长速度 为(1.47?0.81)cm,治疗后为(10.57?437)cm,经统 计学处理,P<0.叫.生长速度与性别无关,与年龄, hGH剂量有关(有2例使用未测GH浓度的注射剂,故 末统计在内).治疗前后患儿的身高变化见表I 铁道医学1999年第27卷第1期?43? 与治疗前相比P(005**P(0.01 2.2垂体分泌的各种激素在治疗前后的变化见表 l.治疗3个月检测血TSH,PRL,FSH,LH,B,T及F含 量,与治疗前对比无显着性差异(P<005),仅F (8:oo)较治疗前降低(P<0.O1).治疗6个月检测血 F,E,,T与治疗前无显着差异(P>0.05);血TsH,PRL, H,u{较治疗前轻度升高或降低,有显着性差异(P <005,P<0.01). 3讨论 胎垂体原基在妊娠第4周时出现,8周时分泌激 素的细胞开始分化,并可测得所分泌的各种激素_4J. 经RPMI1640液培养4—6d时,GH高达(3o16? 17.36)tLg?nag?24h,,6d后略有下降,10d后基本稳 定.这提示胎垂体细胞在培养过程中,有合成,释放 GH的功能可见,将垂体细胞在培养过程中调换下 来的培养液制备成含GH的注射剂,治疗垂体性侏儒 症是可行的.本组ll例病人注射时无一例产生过敏 及不适反应,未服用免疫抑制剂.这是否与胚胎组织 的低免疫反应有关,有待进一步探讨. 垂体性侏儒症目前尚无理想的治疗方法.虽然国 内外已将重组DNA技术人工合成GH应用于临床并 已获疗效,但价格昂贵,难以在临床推广使用.应用胎 垂体细胞培养液制备GH注射剂与应用人工合成GH 治疗效果相仿.本研究通过短期临床应用效果观察, 治疗后患者身高增加,生长速度也明显增快,说明培养 液中cH有生物效应. 病人在治疗过程中无异常症状,体征出现(肥胖, 紫纹,乳房增大等),说明胎垂体培养液制备GH注射 剂,对病人的甲状腺,性腺,肾上腺皮质功能无影响 这除与培养液中TSH,PRL,F,Ltt,(因ACTH药盒昂 贵本院未检测)浓度低外,是否与治疗期较短有关,有 待进一步观察. 本组结果还显示,生长速度与性别无关,而与年 龄,注射GH总剂量有关.年龄大,注射剂量小则生长 速度慢;而年龄越小,GH注射量越大,生长速度陕. 生长速度慢者是否还与病人体内存在生长激素抗体或 生长介素不足,或其受体缺陷(本院不能检测)有关,有 待今后研究.但可肯定,胎垂体细胞培养液制备的 注射剂治剂垂体性侏儒症促长是有效的,具有价廉,方 法简便的优点,可供临床应用. 4参考文献 【RebeenMR]珈ntofpituitmydwadi~~-ithhuin~h mJChn眦mlM.1q58,:帅1 2GuyVmlVlie~Gn~lhkneTtInsNJM.dI 【983.309?lOj6 3HACnm1h帅dnlmin—Clttoll1?ein dchildrenJPediatr.198l,9:868 4由町s啪e,-{l11恤n唱l1…eh lT刊hurnapituitarycellsJClinmI…"Metab.198968: l033 t收稿:199gqkq3【修:l998】o_ls] ? 下期要目? c一反应蛋白水平的变化及其在监测骨科术后感染中的意义 高血压及伴左室肥厚患者心律变异及其临床意义 安氟醚全麻复合硬膜外阻滞在开胸手术中的应用 依那普利辅助治疗慢性肺心病患者对血浆内皮素一l水平的影响 "环裂征"——腰椎峡部裂的CT特征 腰椎问盘突出症再手术的远期疗效探讨