抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义

抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义 抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的 检测及临床意义 ? 336?ChineseMedicalJournalofMeta1lurgicalIndustry,October2003.Vo1.20No.5 抗中性粒细胞胞浆抗体在肾小球疾病中的检测及临床意义 李培睿王铁萍张普生 攀钢职工总医院肾内科(四川攀枝花617023) 摘要目的:检测各种肾小球疾病患者血清中抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床 意艾.方法:应用问接免疫荧光法(IIF)检测 20倒正常人及131倒各种肾小球疾病患者血清中ANCA.结果:131例患者中有l1例ANCA 阳性(阳性率为8.4%),且均为P—ANCA阳性.而 20倒正常对照组无1倒阳性(P<0.05).ANCA阳性中以新月体性肾炎,狼疮性肾炎,紫癜性 肾炎的阳性率较高,分别为67%,25%,16,7%.新 月体性肾炎与IgA肾病等原发性肾小球疾病组比较有显着性差异(P<0.05).结论:ANCA 在各种肾小球疾病中并不少见,尤其是新月体性肾 炎,狼疮性肾炎,紫痰性肾炎的阳性率较高,推潮ANCA可能在这些痰病的发病机理中起了 一定的作用. 关t词抗中性粒细胞胞浆抗体肾小球疾病问接免疫荧光法 中圈分类号R586文献标识码A文章编号1005—5495(2003)05—0336—02 DetectionandclinicalsignificanceofAntineutrophiicytoplasmicAntibodiesinglomer~dardisease,LiPeirui,WangT~ping,ZhangPusheng. DepartmentofNephrology.theGeneralHospitalofPISCo.Panzhihua617023 AbstractObjective:TodetecttheAntineutrophilCytoplasmicAntibodies(ANCN)inserurrIofglomerulardiseaseandevaluteitelinicalrelevance. Methods:Byusingindirectimmtmofluorescenee(IIF).theANCNof5ertlmfrom131patientswithglomerulardiseaseand20normalhumanwere measured.Results:Ofthe131glomerulardisease.11ca3eS(8.4%)werepositiveandallofthemwe.reP—ANCN.Noneof20healthySUbjectsincontrol groupwexepositive(P<0.05),Therateofpositiveofwerehigherincrescentnephritis,lupusnephritis.purpuranephritis(67%.25%,16,7%).and crescentnephritishassignifficantlydifferencewithIgAnephrosisandotherprimaryglomerulardiseases(P<O.05).Concl~ions:TheANCNiscornlDA)nin glomerulardisease,especiallyincrescentnephritis.1upusnephritis.purpuranephritis,ANCAmaypaly8certainroleinpathogenesis. KeyWordsAntineutrophilCytoplasmicAntibodies(ANCN)Glomenflm”diseaseIndirectimmunofluorescenee(IIF) 抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是一类针对中 性粒细胞和单核细胞胞浆抗原成分的自身抗体,是 ANCA相关性小血管炎的特异性血清学诊断指标. 除ANCA相关性小血管炎外,在各种肾小球疾病中 ANCA的阳性率情况报道较少.我们应用间接免疫 荧光(IIF)检测20例正常人及131例各种肾小球疾 病患者血清中ANCA的阳性率,并探讨ANCA在肾 小球疾病中的临床意义. 1对象与方法 1.1临床资料各种肾小球疾病患者131例,其中 男72例,女59例,年龄15,56岁,平均35.8岁.所 有患者均进行了肾活检,标本分送光镜,免疫荧光,电 镜检查,病理分型按WHO诊断.按病理类型共 分为8类,其中新月体性肾炎3例,狼疮性肾炎16 例,紫癜性肾炎6例,IgA肾病10例,毛细血管内增 生性肾小球肾炎18例,膜性肾病21例,局灶节段性 肾小球硬化症(FSGS)24例,系膜增生性肾小球肾炎 33例.20例正常健康者为对照组. 1.2方法及结果判定应用间接免疫荧光法(IIF) 检测ANCA.制备乙醇固定正常人外周粒细胞涂 片,待检血清1:16稀释,FITC—IgG单抗(DAKO)1: 20稀释,设固定阴,阳性对照.结果判定:?阴性:多 形核粒细胞荧光强度弱于嗜酸性粒细胞天然荧光强 度;?胞浆型ANCA(C—ANCA):荧光呈团块状不均 匀分布于细胞浆,核叶间重染;?核周型ANCA(P— ANCA):荧光环核周呈线条样均匀分布. 1.3统计学处理检验,检验标准取P<0.05 为有显着性差异. 2结果 各种肾小球疾病ANCA检出结果与正常对照组 比较见表1. 表1各种肾小球疾病ANCA检出结果 注:新月体性肾炎与*各组分别比较均P<0.05.有显着性差异;狼 疮性肾炎与*各组分别比较均P>0.05,没有显着性差异;新月体性 肾炎,狼疮性肾炎及紫癜性肾炎三者之问P>0.05,互相没有显着性 差异 中国冶金工业医学杂志2003年第2O卷第5期 共检测131例患者,其中有11例患者ANCA阳 性,且均为P—ANCA阳性,阳性率为8.4%.20例 正常人ANCA均阴性(P<0.05);其中ANCA阳性 率较高的有新月体性肾炎,狼疮性肾炎,紫癜性肾炎, 分别为67%,25%,16.7%. 3讨论 抗中性粒细胞胞浆抗体是ANCA相关性小血管 炎(韦格氏肉芽肿,微型多血管炎,变应性肉芽肿性血 管炎)的特异性血清学诊断指标.ANCA的检测方 法有多种,其中最常用的是IIF法,常作为ANCA的 筛选试验.采用IIF法可将ANCA区分为两种类 型:胞浆型即C—ANCA和核周型即P—ANCA[. 而ANCA相关的靶抗原主要有蛋白酶3(PR3)和髓 过氧化物酶(MPo),其他还有弹力蛋白酶,组织蛋白 酶G,天青杀素,乳铁蛋白,杀菌/通透性增高蛋白. 我们发现除ANCA相关性小血管炎外,在各种 肾小球疾病中ANCA的阳性率以新月体性肾炎最 高.新月体性肾炎可分为3型l2]:I型即抗GBM(肾 小球基底膜)抗体型,?型即免疫复合物型,?型即少 免疫复合物型.据报道在100例新月体性肾炎中 ANCA阳性的病例有32例(阳性率为32%),其中I 型占28%,?型占19%,?型占53%.我们观察的3 例新月体肾炎中有?型l例,?型2例,这就可以解 释我们的阳性率为什么偏高.鉴于在新月体性肾炎 中ANCA的阳性率较高,有的学者就提出把新月体 性肾炎分为5型L3J,将单纯ANCA阳性的称为?型. 新月体性肾炎ANCA主要为P—ANCA阳性,其主 要靶抗原可能为MPO[4l. SLE是结缔组织疾病中ANCA检出率最高的病 种,推测ANCA可能属T细胞介导的多克隆性B细 胞激活所产生的多种自身抗体成份之一.对于 ANCA与狼疮性肾炎的关系目前尚未阐明,可能与 SLE引起的肾小球血管损害有关,不过多数狼疮性 肾炎患者血清中存在ANCA已得到证实,且均为P — ANCA,组蛋白酶G(CG)为狼疮性肾炎的主要靶 ? 337? 抗原,组蛋白酶G抗体与狼疮性肾炎的病情活动密 切相关.我们采用IIF法检测ANCA与国内报道的 22%阳性率接近L5l. 紫癜性肾炎是坏死性血管炎之一,紫癜性肾炎中 约10%,20%ANCA为阳性,尤其是儿童L6J,多为P — ANCA阳性.其靶抗原可能为MPO.故紫癜性肾 炎的致病机理中ANCA起了一定的作用.在原发性 肾小球疾病如IgA肾病,毛细血管内增生性肾小球 肾炎,膜性肾病,FSGS中,ANCN也有不同程度的阳 性率.可见ANCN除了是ANCN相关性小血管炎 的特异性血清学指标外,在各种肾小球疾病中也有一 定的阳性率,其中以新月体性肾炎,狼疮性肾炎,紫癜 性肾炎较高,提示ANCN可能参与了这些疾病的发 病机理.目前认为ANCA不仅仅是血清学标志,同 时它还有致病作用.ANCA的致病机理目前认为可 能有两方面?是通过激活中性粒细胞,释放出氧自由 基,进而引起中性粒细胞表面粘附分子表达的上调, 导致中性粒细胞粘附于血管内皮,导致血管炎发生; ?同时中性粒细胞在炎症因子的作用下使细胞胞浆 中的蛋白酶3和髓过氧化物酶等抗原成分移至细胞 表面,ANCA与之结合,导致免疫复合物形成,炎症 介质释放及组织损伤. 参考文献 1VencovskyJ,PMeckovaA,BecvarR,eta1.Antieutrophilcytoplasmic antibodies—ANCA.COsLekCesk,1992;13l:577 2FalkRJ,JennetteJC,NachmanPH.Primaryglomerulardiaease.In: BrennerBM,ed.TheKindey6thed.Philadephia:SaunderSWB, 2o0O:1263 3GlassockRJ,CohenAH.AdlerSG.Primaryglomerulardiaease.In: BrennerBM,ed.TheKindey5thed.Philadephia:SaundersWB, 1996:1392 4罗运九,何威逊,朱光华,等.抗中性粒细胞胞浆抗体在肾脏病中 的检测及临床意义.实用儿科临床杂志,1998;13(5):266 5赵明辉.刘娜,章友康,等.狼疮肾炎患者血清抗中性粒细胞胞 浆抗体和靶抗原的研究.中华内科杂志,1998;12:829 6胡明昌.蔡毅,综述.抗中性粒细胞胞浆抗体与肾脏病.国外医 学儿科学分册,1993;2O(6):309 . (收稿2003一O2一l4) 文内引用参考文献的标注 文内引用参考文献的标注按引用文献在文内出现的先后顺序连续编码,外加方括号,置于标引处右上角,写在标点符号前.正文指明原始文 献作者姓名时,序号标注于作者姓名之后(如例1),正文未指明作者或非原始文献作者时,序号标注于旬末(如例2),正文直接述及文献序号时,直 接置于文内,不用角码标注(如例3).图中引用参考文献,标注写在图的说明或注释中,表中引用参考文献.在表注中依次标注;若必须在表身中 标注.可另列一栏标出. 举例:1.Rers等[3】报道MUC1黏蛋白在胃窦部表层黏膜上皮呈广泛阳性表达.2.黏蛋白在癌的发生发展中所起的作用被注目[51.3. 测定 方法见文献[7]. 本刊编辑部