富马酸比索洛尔片人体生物等效性试验(可编辑)
内蒙古医学院
硕士学位论文
富马酸比索洛尔片人体生物等效性试验 姓名:李桂连
申请学位级别:硕士
专业:药理学
指导教师:俞腾飞
20070501中英文缩略语
??: 高效液相色谱一质谱联用; : 样品峰面积;
: 内标峰面积;
: 样品峰面积与内标峰面积的比值心/越;
;
: 质量控制
: 平均值;
?:
偏差;
: 相对标准偏差,或变异系数; :
服药后时的血药浓度;
加 : 末端相消除速率常数; :
血药浓度一时间曲线下面积
挖 眦: 血药达峰浓度最大血药浓度;
: 血药达蜂时间;
。:
消除半衰期;
:
:
蝤 相对生物利用度;
垢 “: 清除率;
表观分布容积;
:培
.: 定量下限 内蒙古医学院学位论文原创性声明
郑重声明:本人所呈交的学位论文是在导师指导下,独立进行研究所取得的
研究成
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文中以明确
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论文作者签名
砒年衫月一加
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本人完全了解学院有关保留、使用学位论文的规定,同意学院保留并向国家有关部
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内蒙古医学院。
榔遁
指导教师签名
论文作者签名
渝年。月 文咖年。‘月。日中 文 摘要
目的 比较供试制剂与参比制剂的生物等效性。方法 采用两制剂双周期交叉试
验设计,名男性健康受试者分别交叉口服供试制剂和参比制剂 ,于服药前以及服
药后.?小时间隔内定时采集血样,应用液相色谱一质谱仪联用测试样品浓度。色
谱条件:色谱柱:安捷伦 .硼;流动相:甲醇:?‘醋
酸铵水溶液含.%的甲酸:;流速: ?~;质谱条件:离子检测方式:选
择性离子检测;离子极性:正离子;离子化方式:气动辅助电喷雾离子化 ;干燥气流速: ?~;干燥气温度:。根据测定结果计算主要药动学参 数,评估供试制剂与参比制剂生物等效。结果:本研究建立了健康人血浆中比
索洛尔浓
度的高效液相色谱一质谱检测法,方法的线性范围为.?. ?一,最低定量 限为.?~.方法准确度在.?.范围内;批内、批间为均小于. .
%。例受试者服供试制剂及参比制剂后,分别为. ?。和. .
?~;口。分别为.?.和..小时;分别为..和
.和.?.
.?.小时;.。分别为.一,?
一叫分别为..和.?.~,相对生物利用度.和
。一,分别为.?。和.?.%。结论供试制剂与参比制剂生物等效。 关键词 比索洛尔;生物等效;液质联用色谱法。
。. . .?.?.越: ×.
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?富马酸比索洛尔片人体生物等效性试验
富马酸比索洛尔为新一代选择性融受体阻滞剂,无内在拟交感活性和膜稳定作用,
它具有选择性高、药理作用强、药效持续时间长及毒副作用小等优点,目前已在国内外广
泛用于高血压、心绞痛、心肌梗死、慢性心力衰竭、心律失常以及其他心血管疾病的治疗,
疗效确切、安全性好。本试验采用两制剂双周期交叉试验设计法,通过测定血浆中比索
洛尔的浓度,观察健康志愿者口服北京四环制药有限公司生产的富马酸比索洛尔片受
试制剂后,应用液质联用检测法测定血药浓度的经时变化过程,估算相应的
药代动力
学参数,并以德国默克公司富马酸比索洛尔片为参比制剂,进行人体生物等
效性
。
、
和方法
.药品与试剂
富马酸比索洛尔对照品,由北京高博医药化学技术开发有限公司提供,批号 .
?,纯度:.%。
酒石酸美托洛尔对照品,由中国药品生物制品检定所提供,批号:?。 试验用水为纯化水;甲醇为色谱纯
;其它试剂为试剂。
受试制剂:北京四环制药有限公司生产,规格为片,批号为。 参比制剂:德国默克公司生产,规格为
/片,批号为。
.仪器
液相色谱一质谱联用仪型,含:双高压泵、恒温自动进样器、柱温 箱、电喷雾离子化接口的四极杆质谱检测器。
日。
色谱工作站:
.方法
..受试者健康成年男性受试者例,平均年龄?.,平均身高?.
,平均体重?.,试验前经体检证明肝、肾功能正常,心电图正常。询问入选受
试者均不吸烟、嗜酒,在受试前两周内未服过任何药物,无食物和药物过敏史,均为自愿
参加试验并于试验前签署知情同意书。
..剂量及确定依据富马酸比索洛尔片临床常用剂量为口服.
~ /
次。不宜超过
次,一 。根据《中华人民共和国药典版附录?:《化学药塑蓥宣匡兰瞳亟?巫壅生兰焦迨塞
物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则》要求,给药剂量一般应与临床
单次用药剂量一致,查阅有关参考文献多为单剂量口服 ,故本试验中富马酸比索洛
尔片的给药剂量确定为单剂量口服
。
..参比制剂选择根据《中华人民共和国药典版附录 :《药物制剂
人体生物利用度和生物等效性试验指导原则》中有关要求,标准参比制剂应选择市售的、
主导的、相同剂量的同一种药物。本验参比制剂选择德国默克公司生产的富马酸比索洛
尔片规格 /片,批号:。
.,采血时闻确定通过查闲有关比索洛尔的文献,富马酸比索洛尔片的半衰期
为
:
小时左右,达峰时间为~小时。根据《中华人民共和国药典版附录
《化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则》,进行血药浓度测定时
一般吸收相部分取?个点,峰浓度附近至少需要个点,消除相取?个点,所以制
定采血时间点为服药物前及服药后.、、.、、、、、、、小时。
..标本采集受试者禁食过夜后于次日早晨:空腹给药,用 温开水
送服药物,服药后小时进统一食谱低脂肪、低蛋白的标准餐。口服药物前抽取空白血
样 ,在服药后的.、、.、? 、、、、小时分别采集前臂静脉血
。受试者服药后应避免剧烈运动,亦不得长时间卧床。
..比索洛尔与内标美托洛尔对照品溶液的配制
比索洛尔对照品溶液的配制:称取富马酸比索洛尔对照品. 相当于比索洛
尔. ,置于 容量瓶中,加人甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,即得.比索洛尔的储备液。取储备液 置于“容量瓶中,加入甲醇稀释至刻度,摇
匀,即得.旭?。比索洛尔甲醇溶液;再以甲醇依次稀释,配成浓度分别为.
?。、.
耀?~、. ?~、. ?。的比索洛尔对照品溶液。
内标美托洛尔对照品溶液的配制:称取酒石酸美托洛尔对照品. ,相当
于美托洛尔. 置于 容量瓶中,加入甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓
度为.
?的内标储备液;取一定量储备液以甲醇稀释至浓度为.飕?
。的内标对照品溶液。
.血药浓度测定
..色谱条件
.
色谱柱: ? , ;囱蓥直堡堂堕亟主堑壅生兰丝堡窒;
流动相:甲醇: ?醋酸铵水溶液含.%的甲酸:; 流速: ?~;
柱温:?。
..质谱条件
离子检测方式:选择性离子检测订; 离子极性:正离子;
离子化方式:气动辅助电喷雾离子化; .;
检测对象:比索洛尔,离子,/ 内标:美托洛尔,离子,/ .; 传输区电压: ;
干燥气流速: ?~;
雾化室压力:
;
干燥气温度:。
..血浆样品的处理
于 离心管中精密加入血浆样品 ,内标溶液. ?‘.,旋涡
,旋涡 ,于
混匀,加入 ?氢氧化钠止,旋涡混匀,加入乙酸乙酯离心 ,取上层有机相转移
至另一 干净离心管中,于?水浴中
?离心 ,吸取上清液转
以氮气流吹于。残渣用流动相溶解,于
移至自动进样器样品管中,进样量/,进行?,?
。
.方法学考察
..标准曲线的制备
取“离心管数支,分别精密加入不同量的比索洛尔对照品溶液后以氮气流吹 干,加入空白血浆 ,旋涡混匀,配成含比索洛尔的浓度分别为.、.、. 、.、.、.、.,.,. ?叫的标准含药血浆,计算比索洛
尔峰面积和内标峰面积的比值。以峰面积比值。对血药浓度作 回归计算,得血浆比索洛尔的标准曲线。
..精密度试验
取 离心管数支,按标准曲线的制备方法配制含比索洛尔浓度分别为.、 .、.
?的低、中、高三种浓度的标准含药血浆,每个浓度各配制份样品直鐾壹堡堂
睦塑?匠壅生兰焦迨奎塑
及一条随行标准曲线,按“血浆样品的处理”项下操作。每天做一批及一条
随行标准曲
线,连续做天,共三批,每批每个浓度做份样品,记录色谱图,计算比索洛尔峰
面积
和内标峰面积~的比值厂,/~,将,代人当天的标准曲线方程求得实测浓度及
实测浓度的准确度,计算日内和日闻精密度。结果见表。
..准确度
取“离心管数支,按标准曲线的制备方法配备含比索洛尔浓度分别为.、
.、.
?的含药血浆,按“血浆样品的处理”项下操作,记录色谱图,计算比
索洛尔峰面积和内标峰面积魁的比值,,将比值,代入当天的标准曲线方程,计算
实测浓度与加入浓度的比值即为相对回收率。
..样本稳定性考察
按标准曲线的制备方法配制含比索洛尔浓度分别为.和. ?的含
药血浆,每种浓度各配制适量,然后每种浓度分取份,每份 。份于配制好后按
“血浆样品的处理”项下操作立即分析;份于室温放置小时后分析;份于配制好后放
入冰箱冰冻后取出化冻,如此反复冻融后分析;份于配制好后放入冰箱中于一?冷
冻保存周后取出化冻,按“血浆样品的处理”项下操作分析,考察反复冻融条件下稳定
性。
..提取回收率绝对回收率
试验取 离心管数支,分别精密加入不同量的比索洛尔对照品溶液,用甲醇配
成含比索洛尔的浓度分别为.、.、.
?的比索洛尔甲醇溶液,每份
,以氮气流吹干后,加入空白血浆提取上清液 ,旋涡 混匀后加人正内标溶液.
坞?,旋涡混匀,以氮气流吹干,用出流动相溶解残渣,于
离心 ,吸取上清液转移至自动进样器样品管中进样分析。记录色谱图,每种 浓度各做份,计算各浓度样品和内标的峰面积比值两/的平均值。取 离心管数支,分别精密加入不同量的比索洛尔对照品溶液,以氮气流吹干,精
密加入
空白血浆,旋涡 混匀,配成含比索洛尔浓度分别为.、.、. ?叫 的含药血浆,每种浓度各傲份样品。加入?。氢氧化钠出,旋涡混匀。加入 乙酸乙酯 ,涡旋 ,于 ?离心 。取尽上层有机相于另一干净 “离心管中,加入皿内标溶液.耀?。,旋涡混匀,于水浴中以氮气流 ?。离心 ,吸取上清液转移至自动进
吹干。用流动相溶解残渣,于由茎直里堂堕亟主塑垒堂丝迨銮;鲤 样器样品管中进样分析。记录色谱图,计算样品和内标的峰面积比值/~, 将上述豇和代人下式即可求得比索洛尔的提取回收率%。
%等×%
..质量控制在每批血浆样品测定的同时建立相应的标准曲线即随行标准曲 线及质控样品。随行标准曲线的配制方法见“标准曲线的制备”项下,质控
样品为含比索
?的标准含药血浆,每批血浆样品的浓度数
洛尔浓度分别为.、.、.
据用随行标准曲线求得。根据质控样品的测定结果准确度评判该批样品的测
定数据
可被接受或拒绝。
.数据处理
比索洛尔血药浓度达蜂时间。及达蜂浓度一为实测值。曲线下面积,?按 下列各式估算
一,?? 。一 一/
一。一:以。
式中为服药后小时的血药浓度,为末端相消除速率常数。对血药对数浓 度一时间数据的末端进行直线回归,所得斜率的绝对值乘以.即为。 //:×乙
//
..;:
所得参数、。进行自然对数转换后先用双交叉实验设计的方差分析,再用双 向单侧检验进行生物等效性评价。参数叫采用非参数法符号秩检验进 行统计。
实验测定的是北京四环制药有限公司仿制的富马酸比索洛尔片的相对生物
利用
度,以德国默克公司生产的富马酸比索洛尔片为参比制剂。相对生物利用度
计算公
式为:
瓦死 瓯×%
经对数转换后的受试制剂的一。在参比制剂的%一%范围内,受试制剂凼蓥直匿堂堕塑?亟壅生堂焦鲨塞
的‰在参比制剂的%一%范围内,双单侧检验的统计量及?%置信区间
在规定范围内,经非参数检验符号秩法无显著性差异.,即可判
定两制剂生物等效。
、结果
.色谱行为特异性
图比索洛尔对照品、内标美托洛尔对照品、空白血浆、空白血浆加入比索洛尔对
照品和内标对照品后的色谱图、健康受试者口服富马酸比索洛尔片后的血浆样品比索洛
尔浓度的特异性?图。图、测定血浆中比索洛尔浓度的特异性职图内蒙古医学院硕士研究生学位论文
比索洛尔对照品色谱图;
内标美托洛尔对照品色谱图;
空白血浆色谱图;
空白血浆加入比索洛尔对照品和内标对照晶后的色谱图;
健康受试者服富马酸比索洛尔片后的血浆样品色谱图。
比索洛尔和内标美托洛尔峰形良好,无杂峰干扰测定。本方法具有较高的特异
性,能准确测定血浆中比索洛尔的浓度,灵敏度较高。
.比索洛尔和美托洛尔电喷雾离子化质谱扫描图
删. ?...:
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如
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图、比索洛尔的质谱扫描图电喷雾离子化、传输区电压、正离子检测。
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图、美托洛尔的质谱扫描图电喷雾离子化、传输区电压 、正离子检测.由蓥
直匿堂睦亟?巫塞生兰丝迨銮:
在电喷雾离子化正离子检测条件下,比索洛尔形成的主要离子为峰/
.;美托洛尔形成的主要离子为峰/ .。 .标准曲线和最低定量限
以血浆中比索洛尔浓度,?对比索洛尔峰面积和内标峰面积的比值
,,进行线性回归。
表 ?法测得的比索洛尔在血浆中的标准曲线 注::标准曲线的截距
:标准曲线的斜率 标准曲线的相关系数 岫
遛
翅
墨
瑙
蠖
浓度/
图、肝?蟠法测得的比索洛尔在血浆中的标准曲线直鐾直匿堂筐亟?巫塞生
堂焦迨塞:坚
结果表明,在.?.
?浓度范围内线性良好,回归方程. .,相关系数为.,最低定量限为.?~。 .方法精密度
表
?法测定血浆中比索洛尔的日内和日闻精密度
测得浓度?。
加入浓度 批问
鬻磐批内
第一批 第二批 第三批
?’ ?。 %
,平均值、“蒿
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本研究建立的血药浓度测定方法日内、日间均不大于.%。
.准确度试验相对回收率 表 ?法测定血浆中比索洛尔的相对回收率
本研究建立的血药浓度测定方法的准确度在.?.%范围内。.样本稳定性
表
法测定血浆中比索洛尔的稳定性
结果表观,比索洛尔血浆样品在室温下放置小时,反复冻融条件下稳定性均
良好。
.提取回收率绝对回收率试验
表如?法测定血浆中比索洛尔的绝对回收率 比索洛尔浓度分别为.、.、.
?“的低、中、高三个含药血浆样品 提取回收率大于.%,小于.%。
.质量控制
表嘲?法分析比索洛尔血浆样品时的随行标准曲线直塞直里堂堕亟圭婴塞圭
堂垡鲨塞:翌
袭同?法分析比索洛尔血浆样品时质控样品的准确度%
:丝 :丝 塑箜
垫厶鎏壅璺墨:型::
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第一批
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第二批
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准确度
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% 第三批
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. .第四批
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%
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本试验在血浆样品测定过程中,于每日平行测定低、中、高个浓度的质蕴样
品,其
测得值均维持在对应真实直的%范围内。
.比索洛尔实测数据结果 名健康受试者口服参比制剂和受试制剂后血浆中比索洛尔的浓度一时间结
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下图、下表:
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名受试者口服参比制剂后血浆中比索洛尔血药浓度一时间曲线表 名受试者
口服参比制剂剂量: 后血浆中比索洛尔浓度一时闻数据?
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图 名受试者口服受试制剂后血浆中比索洛尔血药浓度一时间曲线内蒙古医
学院硕士研究生学位论文
表
名受试者口服受试制剂:后血浆中比索洛尔浓度一时间数据? ,罂餐最
时同
图 名受试者分别口服参比和受试两制剂后的比索洛尔的平均血药浓度一时
间曲线.药动学参数结果
表
名受试者参比制剂剂量: 后算得的比索洛尔的药代动力学参数 兰竺。三土盘兰鲨;兰:;釜曼。笠曼
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. . . . . . . . . . . . . . ? . . . . . 加. .盎鐾直匡堂医亟?亟塞皇堂焦迨塞垒塑
表
名受试者口服受试制荆剂?: 后算得的比索洛尔的药代动力学参数
墨
竺。三土圣 鳖。兰,。笠釜,;墨? . . . . . . . . . .
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? . . . . . ,表 名受试者分别口服参比和受试两制剂后的比索洛尔的值
及相对生物利用度评价结果
表 名受试者分别口服受试和参比两制剂后的比索洛尔片剂的药动学参数.
比索洛尔的主要药代动力学参数方差分析
比索洛尔的主要药代动力学参数方差分析表给出了比索洛尔的主要药代动 力学参数一、【一堪..。的方差分析结果。
表比索洛尔的。方差分析
.,无显著性差异,~.,有显著性差异
表比索洛尔的?方差分析
.,无显著性差异,一.,有显著性差异
袭比索洛尔的?方差分析
.,无显著性差异,一.,有显著性差异表比索洛尔的双单侧检验结果 .%一.%
.%~.%
,
.%~,%
一
?。非参数检验结果符号秩检验,.?,.,受试制剂与参
比制荆无显著性差异。
.生物等效性结果
方差分析结果显示,本试验中以一评价时,个体问有显著性差异.,药品 间、周期间无显著性差异.;以叫、”叫评价时,个体间有显著性差 异.,药品问、周期间无显著睦差异.。经双单侧检验,以一、 ?、一进行评价时,均得到供试制剂与参比制剂生物等效的结论,对应的 %置信限分别为.%~.%,.%~.%,.%一.%。嗽非
参数检验结果符号秩检验,. ,.,受试制剂与
参比制剂无显著性差异。
.讨论
本试验中采用的参比药物为进口的富马酸比索洛尔片,并为原研发单位,在
国内外
同类上市的产品,占主导地位,其质量稳定可靠。试验方法采用两制剂双周期
交叉试验
设计,抵消了试验周期和个体差异对试验结果的影响。批随行标准蓝线的相
关系数均
达到.,质控样品均在真实值的?%,相对生物利用度一。和一分别为. ?.和.?.%。因此本试验的结果供试制剂与参比制剂生物等效的结论
是可以信服。
.结论
供试制剂与参比制剂生物等效。
.参考文献
国家药典委员会.中华人民共和国药典二部《药物制剂人体生物利用度和生物
等效性试验指导原则,化学工业出版社出版,年版.文献综述
富马酸比索洛尔研究概况
.国内外研发情况简介
.国外研发情况‘】
富马酸比索洛尔于年由德国公司研制开发,年月首次在德国上
市,商品名为。年月日在美国上市,商品名为,规格为和
,适应症为抗高血压。年月日,瑞典医药产品部?宣布获准在标准
治疗的基础上合用受体阻滞剂富马酸比索洛尔来治疗充血性心力衰竭珉。
年月在意大利上市,商品名为,适应症为治疗稳定性慢性心力衰竭。本品自
年首次上市以来,其销售额正在陕速稳步增长,目前已在全球多个国家上市销
售,其疗效已在全球多项大规模临床研究中得到证实,尤其是年心功能不全患者的
比索洛尔研究璐?结果表明其对心功能不全患者的治疗价值后,本品已成为
世界各国抗高血压、心绞痛、心律失常及心衰等心血管疾病的首选药物之一。年该
药的全球销售额接近亿美元。
.国内研发情况
年泓批准北京四环医药科技股份有限公司生产本品泵抖和片剂规硌:
,商品名:博苏,批准文号分别为国药准字和国药准字,
年又批准本品.上市。年月日德国公司生产的富马酸比索洛尔
片剂规格:,商品名:康可获准在我国进口,年本品原料获准进口,进口药品注
册证号分别为和愆。目前本品原料及片剂的质量标准已转正。
本品自在国内上市以来,已广泛用于高血压、心绞痛、心肌梗死、慢性心力衰竭、心律
失常以及其他心血管疾病的治疗,疗效确切、安全性好,目前已成为口受体阻滞剂中的拳
头产品。年上半年,本品的销售额增长了.%。
国内王树春掣】对高血压病、冠心病心绞痛及心律失常患者共例口服本品长达
?周的疗效进行了观察,其中包括各型高血压患者例,各型心绞痛患者例,心
律失常患者例。结果表明:高血压病治疗的总有效率为.%,其中对轻型高血压
的疗效最好,有效率高达.%,此型高血压患者约/在服药小时后即开始出现
降压作用,有.%于药后周内血压降至正常,少数患者于第?周降至正常。对由鐾直匡堂堕亟?堑壅生兰焦迨塞;盟
中型高血压的总有效率为.%,多数病例在服药?周血压开始下降,于?周达
显效者占.%。对重型高血压的总有效率为.%,半数患者在用药?周开始
降压。本品对冠心病心绞痛的症状改善率为,%,心电图改善率为.%,疗效甚
为理想。心绞痛症状疗效的出现多在用药后小时.%及第周.%,心
电图开始出现疗效则多在用药卜周以后,说明该药改善心绞痛症状迅速明显,有近,
的患者在服药周后心绞痛完全消失,而心电图改善作用稍有延后。本品对室性心律
失常的有效率达.%,在试验过程中未见明显的毒副作用,患者耐受性良好。
.产品特点?】
富马酸比索洛尔以下简称:比索洛尔是一种新型高效的岛受体阻滞剂,它具有以
下作用特点:对岛受体有高度的选择性
体内外试验表明,比索洛尔对受体的亲合力比&受体的亲合力高约倍,氚化
物标记药物研究表明,比索洛尔对大鼠心脏受体具有高度选择性,而对大鼠肺陉受体
选择性很低,比较&受体选择系数,比索洛尔为普萘洛尔的倍,阿替洛尔的倍。
一项旨在比较各种受体阻滞剂与配体结合的选择性情况的研究证实,在人的血浆
内对大鼠网织红细胞&受体和大鼠腮腺,受体的膜制荆进行抑制常数试验所
得的吲既与/&的比值,比索洛尔为:,倍他洛尔为:,醋丁洛尔为:,普萘洛
尔为.:。以上研究结果表明比索洛尔对受体的选择性阻滞作用突出。
具有优良的药代动力学特性
比索洛尔具有亲水和亲脂双重性,口服吸收迅速、完全,生物利用度高%,肝
脏首过效应低%。血浆半衰期长小时,作用可维持小时以上,因此一天
一次。即可平稳降压。此外,本品为肝肾双通道排泄途径,呈现肝、肾各占%的平衡消
除的特点,对于肝或肾功能不全的患者,无须调整剂量。
’适用范围广,安全性好
心功能不全患者的比索洛尔研究显示,本品使心衰的总死亡率、总住院
率和猝死发生率均明显降低。本品可减少心绞痛发作次数和持续时间,由于其长效的作
用,可明显减少清晨心绞痛的发作。本品长期使用对血脂、血糖和尿酸的代谢均无影响,
因此可用于型糖尿病患者,不增加心血管病危险,而对于高血压、心绞痛、心肌梗死和
充血性心力衰竭患者,具有有益的心血管保护作用。本品在?日剂量范围内,对
慢性阻塞性气管炎患者不增加气管阻力,也不降低,对高血压、心绞痛伴有慢性阻
塞性肺病的患者十分安全。
综上所述,比索洛尔是?个选择性高、适用范围广、疗效确切、安全性好的,受体阻内蒙古医学院硕士研究生学位论文
滞剂。
.药理毒理研究综述
.药效学研究
..禹受体选择性
体内外试验表明,比索洛尔对既受体的亲合力比&受体的亲合力高约倍,氚化
物标记药物研究表明,比索洛尔对大鼠心脏受体具有高选择性,而对大鼠肺艮受体选
择性很低,比较受体选择系数,比索洛尔为普萘洛尔的倍,阿替洛尔的倍。
离体豚鼠心房肌和气管平滑肌试验表明,比索洛尔可拮抗异丙辱上腺素的效
应,使其浓度一反应曲线平行右移,呈竞争性拮抗特征。离体心房肌和气管平滑肌的
值,比索洛尔分别为.、,,而普萘洛尔分别为.、.。整体动物试验表
明,比索洛尔抑制血管扩张效应量比抑制增加心率效应量高倍;对组胺诱
发增加气管阻力以及基础心率变化的研究表明,比索洛尔降低基础心率次/分一
%,对气管阻力和选择率缝为,阿替洛尔为、美托洛尔为、倍他索洛尔
为、普萘洛尔为.,以上研究结果表明比索洛尔的既受体选择性拮抗作用突出。
临床研究资料表明,在等效剂量下,与其他受体阻滞剂比较,比索洛尔对哮喘病人
降低秒强行呼气量?的作用最小,也不抑制的舒张支气管作用;在/
日的剂量范围内,对慢性阻塞性气管炎病人不增加气管阻力,也不降低,,故认为对
高血压、心绞痛伴有慢性阻塞睦肺病的患者是较安全的。
..无内在拟交感话性
比索洛尔无内在拟交感活性。经利血平化大鼠研究证明,比索洛尔无心脏受
体的
激动作用;在利血平处理的豚鼠离体心房的体外研究中,也未见正性变力效应。在受
体阻滞剂对人淋巴细胞上岛受体的影响研究中表明,比索洛尔是无内在拟交感活性的
受体阻滞剂。一般认为具有内在拟交感活性的受体阻滞剂,其减慢心率和抑制心功能
的作用弱于无内在拟交感活性者。
..无膜稳定作用
试验证明,一%比索洛尔具有较弱的抑制兔角膜反射作用。豚鼠皮肤试验中。%
比索洛尔和%普鲁卡因对皮肤反应的抑制程度相近似。离体组织试验中,比索洛尔在
浓度上升到比血浆中治疗药物水平高倍时,对利血平处理的豚鼠左心房功能不应期
无影响,仅在很高浓度一才使功能不应期减少%。因此,在引起受体拮抗作
用的剂量范围内,无膜稳定特性。
..对心功能和血流动力学的影响直鐾直堡兰堕亟圭堡塞垒堂焦迨塞;塑
比索洛尔对动物和人的血液动力学参数的影响大致相似。麻醉狗沁?比
索洛尔后,对心血管没有明显影响,当比索洛尔/时,可使心率下降
,血压、心输出量、/心肌收缩指数、每搏输出量和每搏
功均下降,总外周阻力和、厄左室舒张末期压有上升趋向。比索洛尔
烬/,除和上升外,其他参数均明显下降。冠心病患者口服比索洛尔
后,静息和运动时,除升两外,,、、、率一压、均下降,从
而改善了心肌耗氧量。
对肾血液动力学和肾功能影响的研究表明,比索洛尔//可使肾血流量增加
%,肾血管阻力降低%,肾小球滤过率上升%,滤过分数没有变化,对肾血流量增
加是有临床意义的,这与其他口受体阻滞剂不同。
比索洛尔对心肌缺血后遗症具有防护作用,麻醉狗结扎冠状动脉前降支后,比索洛
尔可使心肌缺血引起升高的段,?/下降,其抑制率与剂量相关。
..对血压的影响
肾性高血压狗经口给予比索洛尔.?/,可使平均动脉压降低?
?%。/比索洛尔的降压效果强于普萘洛尔最高剂量时的降
压作用。比索洛尔的降压作用一般在第一次给药后即可出现,给药?次后作用达至
高峰,降压效果可持续整个治疗期,停止给药后一周内,和平均血压恢复到给药前水
平。对原发性高血压大鼠连续周的治疗,可阻止高皿压的进展。在治疗期能使血浆
肾素水平降低,这可能与比索洛尔摧抗近肾小球细胞的受体有关,比索洛尔降低肾素
的作用强于普萘洛尔。
..对心肌梗死家兔左室功能和血浆降钙素基因相关肽】强的影响
选取家兔只,每组只,雌雄不拘,在戊巴比妥钠麻醉下开胸,在距冠状动脉根
部处结扎左室支,逐层关胸。试验分为伪手术组、心梗组和心梗治疗组
,其中组和组不用药,组从手术当天起给予比索洛尔./,周后
加至.,再连服周。术后第周测定心率、左室舒张末压.、和?
/,并抽血测定。结果表明,经比索洛尔治疗后,组较
组有所下降,但不显著.;组水平,?.
『明显比组
.?. /较
/高.,组血浆水平.?.
组明显降低.,但与组差异不显著.。结论:受体阻滞剂比索洛
尔可以改善心梗家兔的心功能,同时降低血浆中的水平。
..对心肌梗死后心室肌细胞内钙离子浓度变化的影响由鐾直匿堂堕塑?堑壅垒堂焦鲨塞;塑
同上法建立兔心肌梗死模型,采用钙敏感性荧光探针一为.指示
剂,应用激光扫描共聚焦技术测定后急性分离的非梗死区心室肌矛。及比索洛
尔对其的影响。结果表明,心室肌细胞荧光强度、密度均明显强于伪手术组和治
疗组一,组、组和?组心室肌细胞的平均荧光强度分别为?,
和?。结论:后非梗死心室肌细胞内超载,过量的钙会伴随的
耗竭、激活蛋白酶、线粒体功能受损等,从而加重疾病的进展。比索洛尔治疗周后可减
轻心室肌细胞‘的超载,从而对心室肌细胞产生保护作用。
..对大鼠脑出血后室性心律失常的防治作用
雄性大鼠只,体重?,随机分为组:脑出血组只,比索洛尔
组只,于术前小时胃管灌胃给予比索洛尔.『,非手术对照组只。腹
腔注射%水合氯醛/进行麻醉,制备大鼠脑出血模型,记录术前、术后小
时肢体导联心电图及小时动态心电图。对照组记录麻醉后即刻、小时肢体导联心
电图及小时动态心电图。
结果表明,术后小时非手术对照组室陛早擗的发生次数为../万次?天一
,模型组为../万次?天,试验组为../万次?天一,其中与菲手术对照缉
相比,模型组室陛早搏的发生次数明显增加,而试验组则与非手术对照组帽当。
经实验证实比索洛尔能减少脑出血后室性早搏的发生,尤其能预防阵笺哇室哇心动
过速的发作。效果显著。
..比索洛尔对快速右室起搏犬心室重塑的影响
选择只杂种犬,随机分为组,右室起搏组:选只杂种犬用%戊巴比妥
钠/静脉麻醉后在线下经颈外静脉将导管电极送入右心室,使电极头嵌入肌小
粱。起搏器与电极接通后埋置于犬肩胛闯区皮下,恢复?天后在体外启动脉冲发生
器,以次/分频率持续起搏周。心室起搏加用比索洛尔组:选只杂种犬
于心室起搏同时以食丸方式给以比索洛尔./天至停止起搏。对照组:选
只杂种犬行假手术,不安置起搏器。
其中,与组动物均以次/分钟频率持续右室起搏周。起搏后组动物均
出现心力衰竭表现,组织病理学显示心肌细胞浊肿,质膜水肿,肌节排列紊乱,部分肌丝
溶解、断裂。组起搏后肺楔压升高和心排量降低幅度以及心肌病理改变程度均显著
轻于组。以上结果表明,比索洛尔可以减轻这一心肌病理模型的心肌损害程度。
.药代动力学研究【
比索洛尔的亲脂性和亲水性相等,脂水分配系数接近,口服易吸收,不受食物的影由鐾直匡堂堕塑土婴壅生堂焦迨塞;塑
响,生物利用度高%,首过效应低%,血药浓度达峰时间为.?.小时,
稳态血药浓度为?/,血浆蛋白结合率为%,半衰期为一小时,表观分布
容积为?,说明体内分布广泛。
动物体内研究表明,比索洛尔可分布在肾、肺、肝、脾、肾上腺、胰、唾液腺等,其中在
肝、肾中的浓度最高,有少量药物可透过血脑屏障和胎盘屏障,其脑/血浆浓度比率为.
,普萘洛尔为.,美托洛尔为.,阿替洛尔.。哺乳期大鼠静注和经口给药后
药物经乳汁的分泌量分别为给药量的?%。
本品经肾和非肾途径等量消除,大约给药剂量的%以原形经尿排泄,不足给药剂
量的%经粪便排泄。本品不经过细胞色素 代谢,目前已知的代谢产物均无 药理活性。
.毒理学研究】
..急性毒性研究
小鼠口服本品的及其%可信限为/,值相当于人用剂
量,/天,相当于./【的倍。
...长期毒性研究
小鼠口服?/【?,连续给药天,检查心、肝、肺脏未见异常;大鼠口 服/?,连续个月,未见毒性损害;给予 /?剂量时仅见轻微的体 重减轻。在对小猎兔犬进行的个月的研究中,每日、、/的剂量也可耐受。 ..致突变作用研究
经微生物回复突变试验、中国仓鼠细胞染色体畸变试验、非常规 合成试验、小鼠微核试验和大鼠细胞遗传学试验等一系列体内外试验对比索
洛尔的致突
变活性进行了研究,结果未见致突变作用。
‘.,生殖毒性研究
大鼠:服本品剂量至/【/天时生殖能力未见损害,也无致畸作用,该剂量分别 为最大推荐人用剂量的倍按体重计和倍按体表面积计。本品在 //天该剂量分别为的倍按体重计和倍按体表面积计时出
现胎儿毒性增加后期吸收,在/【/天该剂量分别为的倍按体重 计和倍按体表面积计时出现母体毒性摄食量和体重增加减少。家兔口服本品 剂量至./吲天时无致畸作用,该剂量分别为的倍按体重计和倍
按体表面积计,但有胚胎毒性增加早期吸收。
..致癌作用研究由蓥直匿堂睦塑圭巫塞垒堂焦迨銮箜 一
小鼠和个月和大鼠个月分别混饲给予比索洛尔进行长期研究。小鼠
剂量至//天或大鼠剂量至/吲天未见致癌作用。按体重计,上述剂量分
别为最大推荐人用剂量或体重个体服剂量./:?的
倍和倍。按体表面积计,上述剂量分别为强的倍和倍。
.小结
富马酸比索洛尔为新一代选择性受体阻滞剂,无内在拟交感活性和膜稳定作用,
它具有选择性高、药理作用强、药效持续时间长及毒副作用小等优点,目前已在国内外广
泛用于高血压、心绞痛、心肌梗死、慢性心力衰竭、心律失常以及其他心血管疾病的治疗,
疗效确切、安全性好。
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攻读学位期间发表文章及科研情况
.攻读学位期间发表文章情况
发表或投
作者全体 发表的年 被索引
序
题 目
作者,按顺 稿刊物名 月、卷期、
号
序排列 称、级别 起止页码 收录情况
亚
李桂连
水针剂生产过程中质量 《北方药 月第卷
俞腾飞 控制 学
第期
,气一
.攻读学位期间参与科研情况
参与完成了马来酸桂哌齐特注射液的研制与生产,获得通州区科学技术三等
奖。个人简历
李桂连。女,汉族。年毕业于佳木斯医学院,药学系,现为内蒙古医学院 级同等学历研究生。
年大学毕业后分配到黑龙江省牡丹江温春双鹤药业工作。工作期间,参与完 成氟罗沙星注射液的研制,获得牡丹江市科学技术进步奖。在大输液的生产
及质量控
制方面积累了丰富的经验。
年一至今北京四环制药有限公司工作,曾熟悉药品研制、药品注册、药品 生产管理过程并有丰富经验。现在从事药品注册工作。
先后发表《大输液无菌检查法中应注意的问题》、《论活性炭在输液生产中的合理使
用》、《针剂生产过程中的质量控制》已接受,待发表论文篇。 年月修满同等学历硕士研究生全部课程,成绩合格,现完成实验研究、毕业 论文。导师同意其进行论文答辩,望评委老师予以审评,谢谢。