头孢类药物分析

头孢类药物 标 准 检 测 程 序 STANDARD TEST PROCEDURE 限 制 流 通 Restricted circulation (EBT)分析方法 编号 STP- (规格:200mg/片) STP NO 生效日期 代 替 复审日期 参 考 页 数 Effective Date Supersedes Review date REFERENCE Page No: Ws-(X-382)-2003Z 1/5 1 ----- 起 草 人 检 查 人 批 准 人 PREPARED BY CHECKED BY APPROVED BY (一)含量测定 1.色谱条件: (1)柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 (2)流动相:乙腈:磷酸盐缓冲液=45:55 磷酸盐缓冲液:取0.5mol/l磷酸二氢钾溶液100ml加水至800ml，用0.1mol/l氢 氧化钠溶液调节PH至4.75，加水至1000ml。 (3)流速:1.0ml/分钟 (4)检测波长:225nm (5)进样体积:20ul 2. 系统适应性: 分解率溶液图谱中依托酸峰和依托度酸1-甲基同系物峰的分离度应不小于1.5。 3.分辨率溶液的制备 0.05%依托度酸对照品的0.1mol/l氢氧化钠溶液与0.05%依托酸1-甲基同系物对照品的0.1mol/l氢氧化钠溶液各2ml，混合，用流动相稀释至100ml，摇匀。 4. 溶液的制备: 精密称取依托度酸标准品约25mg至50ml容量瓶中，用0.01mol/l氢氧化钠溶液溶 解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。 5. 样品溶液的制备: 取样品20片精密称定，研细，精密称取细粉约85mg至100ml容量瓶中，加0.1mol/l 氢氧化钠溶液70ml，振摇30分钟使溶解，再加0.1mol/l氢氧化钠溶液至刻度，摇 匀，滤过后精密量取续滤液2ml至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。 6. 测定方法: 按要求的色谱条件，分别标准溶液和样品溶液图谱，并按外标法以峰面积计算。 标 准 检 测 程 序 STANDARD TEST PROCEDURE 限 制 流 通 Restricted circulation (EBT)分析方法 编号 STP NO: STP- (规格:200mg/片) 页数 Page NO:2/5 7、: AtWs•Ps 2 100 100 At Ws•Ps 含量%= ——×———×——×——×——×100% (即 ——×———×2×100%) As 50 100 Wt 2 As Wt 这里: At:样品溶液的主峰面积; As:标准溶液的主峰面积; Ws:标准品的称样量(mg); Ps:依托度酸标准品的效价; Wt:样品的称样量(mg)。 (二)有关物质测定:(TLC法) 1.薄层板:硅胶GF 254 2.展开剂:冰醋酸:无水乙醇:甲苯,0.5:30:70 3.预处理:薄层板预先在2.5%抗坏血酸溶液:甲醇(20:80)展开剂中上行至薄层板点样 线以上1cm，取出薄层板，干燥30分钟以上。 4. 样品溶液的制备: 称取样品细粉约0.3g加丙酮20ml，振摇，超声5分钟使依托度酸溶解，摇匀滤过。 5. 对照溶液的制备: 对照溶液(1):精密量取样品溶液1ml至200ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀。 对照溶液(2):精密量取对照溶液(1)5ml至10ml容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀。 6. 处理方式: 分别取上述两种对照液和样品溶液各10ul分别点于同一经预处理的薄层板上，展开后 晾干置紫外光灯(254nm)下检视。 7.判断方式: 样品如显杂质斑点，其颜色与对照溶液(1)主斑点比较不得更深，如显多个杂质斑点，不 得超过一个杂质斑点的颜色深于对照溶液(2)主斑点所显的颜色。 标 准 检 测 程 序 STANDARD TEST PROCEDURE 限 制 流 通 Restricted circulation (EBT)分析方法 编号 STP NO: STP- (规格:200mg/片) 页数 Page NO:3/5 (三)甲基同系物的测定: 1、色谱条件: (1)柱:以十八烷基硅胶为填充剂。 (2)流动相:乙腈:甲醇:1.74%磷酸氢二钾溶液=13:19:68。 (3)检测波长:225nm (4)流速:1.0ml/min。 (5)进样体积:20μl 2、系统适应性: 依托度酸1-甲基同系物与8-甲基同系物峰的分离度应不小于0.75。 3、对照溶液的制备: 精密称取依托度酸1-甲基同系物与8-甲基同系物对照品各25mg至100ml容量瓶中，加甲醇40ml溶解后用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml置250ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 4、样品溶液的制备: 精密称取样品细粉约0.15g至100ml容量瓶中，加甲醇40ml振摇，超声5分钟使依托度酸溶解，加水至刻度，摇匀滤过，精密量取续滤液10ml置20ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。 5、测定方法: 按要求的色谱条件，分别记录对照溶液和样品溶液图谱，并按外标法以峰面积计算。 6、计算公式: AtWs•Ps 5 100 20 At Ws•Ps 1 1 1 1 1-甲基同系物%= ——×———×——×——×——×100% (即 ——×———×——×100%) As 100 250 Wt 10 As wt 25 1 这里:At:样品溶液中1-甲基同系物的峰面积; 1 As:对照溶液中1-甲基同系物的峰面积; Ws:1-甲基同系物对照品的称样量(mg); 11 Ps:1-甲基同系物对照品的效价; Wt:样品的称样量(mg)。 1 标 准 检 测 程 序 STANDARD TEST PROCEDURE 限 制 流 通 Restricted circulation (EBT)分析方法 编号 STP NO: STP- (规格:200mg/片) 页数 Page NO:4/5 AtWs•Ps 5 100 20 At Ws•Ps 1 2 22 8-甲基同系物%= ——×———×——×——×——×100% (即 ——×———×——×100%) As 100 250 Wt 10 As wt 25 2 这里:At:样品溶液中8-甲基同系物的峰面积; 2 As:对照溶液中8-甲基同系物的峰面积; 2 Ws:8-甲基同系物对照品的称样量(mg); 2 Ps:8-甲基同系物对照品的效价; 2 Wt:样品的称样量(mg)。 (四)溶出度的测定: 1.溶出条件: (1)溶出介质:磷酸盐缓冲液(PH7.5)900ml。 磷酸盐缓冲液(PH7.5):取0.2mol/l磷酸二氢钾溶液250ml，用0.2mol/l氢氧化钠溶 液调节PH至7.5，加水稀释至1000ml。 (2)方法:篮法 (3)转速:100转/分钟 (4)运行时间:45分钟 (5)检测波长:278nm。 2.测定方法: (1)样品溶液:在六个溶出容器中每个容器放一片样品开始溶出度的检测，到45分钟时以每个容器分别抽取溶液适量过滤，精密量取续滤液1ml至20ml容量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀。 (2)标准溶液:精密称取依托度酸标准品约25mg至100ml容量瓶中，加溶出介质适量溶解并稀释至刻度，摇匀后精密移取5ml至100ml容量瓶，加溶出介质稀释至刻度，摇匀。 (3)测定:按分光光度法测定标准溶液和样品溶液的吸光度。 标 准 检 测 程 序 STANDARD TEST PROCEDURE 限 制 流 通 Restricted circulation (EBT)分析方法 编号 STP NO: STP- (规格:200mg/片) 页数 Page NO:5/5 (4)计算公式: AtWs•Ps 5 900 20 At Ws•Ps 溶出度%= ——×———×——×——×——×100% (即 ——×———×9×100%) As 100 100 200 1 As 200 这里: At:样品溶液的吸光度; As:标准溶液的吸光度; Ws:标准品的称样量(mg); Ps:标准品依托度酸的效价。