【word】 供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移植受体异基因反应的抑制作用

【word】 供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移植受体异基因反应的抑制作用 供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移 植受体异基因反应的抑制作用 ? 研究快报? 供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移植 受体异基因反应的抑制作用 胡博何艳吴艳包光明刘海燕LisbethA.WelniakWilliamJ.Murphy 【关键词】造血干细胞移植;异基因反应性;自然杀伤细胞;非清髓 【Keywords】Hematopoieticstemcelltransplantation;Allo—responses;NKcells;Nonmyel oablative 异基因造血干细胞移植(allogeneichematopoietic stemcelltransplantation,allo—HSCT)可以彻底治愈恶 性血液病,且复发危险小.但allo.HSCT存在发生移 植物抗宿主病及移植排斥反应的风险,临床上主要采 用清髓照射及非特异性免疫抑制剂来应对,但部分患 者难以承受高强度的移植前预处理,因此有效的非清 髓allo-HSCT就显得尤为重要.供体NK细胞可以 特异性地抑制或清除受者的反应细胞,从而促进造 血干细胞的植入.本研究旨在探寻供体NK细胞在 allo.HSCT中所发挥的作用. 在体外实验中,将C57BL/6(H一2)小鼠的脾细 胞作为反应细胞,BALB/c(H一2)小鼠的脾细胞经致 死剂量照射后作为刺激细胞,建立混合淋巴细胞培养 体系.在此体系中,加入致死剂量照射的BALB/c (H.2)小鼠骨髓培养的体外激活的NK细胞.H嵌 人法检测反应细胞的增殖情况;细胞毒试验检测反 应细胞对H一2抗原包被的肿瘤细胞P815的杀伤作 用.结果,激活的NK细胞可以显着抑制体系中反 应细胞的增殖效应(P<0.01)及反应细胞对肿瘤细 胞的杀伤活性(P<0.01).在体系中加入TGF—B 的阻断抗体或分别在体系加人从Fas突变体小鼠和 穿孔素基因敲除鼠培养的NK细胞,结果发现,TGF—B 的阻断抗体和Fas突变体小鼠培养的NK细胞均不 能影响激活的NK细胞抑制反应细胞的增殖以及反 应细胞对肿瘤细胞的杀伤活性(均P<0.01),而穿 孑L素基因敲除鼠培养的NK细胞能阻断此抑制作 用(P<0.01). 在体内实验中,采用BALB/c(H一2)小鼠作为 供鼠,同时用所获取的造血干细胞体外培养供体 NK细胞;采用C57BL/6(H一2)小鼠作为受鼠,进行 全身照射的非清髓移植前预处理.通过尾静脉注射 对受鼠进行allo.HSCT,共分3组:供体造血干细胞 组;受体NK细胞和供体造血干细胞组;供体NK细 胞和供体造血干细胞组.流式细胞仪检测供体细胞 的植入率,检测供体来源的B细胞,NK细胞,巨噬 细胞,CD4T细胞,CD8T细胞数量;反应细胞的 增殖情况及其对肿瘤细胞杀伤作用的检测方法同体 外实验;CTLL.2细胞增殖实验检测脾细胞在H一2 抗原刺激下所表达的IL一2水平.结果,供体NK细 胞和供体造血干细胞实验组的供体细胞植入率明显 高于其他两组(P<0.05);供体NK细胞和供体造 血干细胞实验组小鼠的脾细胞中供体来源的B细 胞,NK细胞,巨噬细胞,CD4T细胞,CD8T细胞 数量明显高于其他两组(P<0.05);供体NK细胞 和供体造血干细胞实验组的H嵌人法,细胞毒试验 和IL.2水平的受体异基因反应水平检测结果均比 另外两实验组降低(P<0.05). 上述研究结果提示,激活的异基因NK细胞能够 特异性抑制异基因反应细胞的增殖效应和杀伤活性, 促进造血干细胞的植入;Fas/FasL通路及TGF.B信 号通路并非该抑制效应的作用机制,穿孔素和颗粒 酶介导的杀伤活性可能是这种抑制效应的机制之 一 .供体NK细胞这种特异性的抑制作用为无需进 行全身性及非特异性免疫抑制预处理的临床移植方 案提供了可能. 该项研究的论文ActivatedallogeneicNKcells础suppres— sorsofalloreactiveresponses将于2010年6月发表于Biologyof BloodandMarrowTransplantation. (收稿日期:2010-01—15) (本文编辑:沈敏何超) 本文文献引用:胡博,何艳,吴艳,等.供体NK细胞对非清髓异基因造血干细胞移植受体异基因反应的抑制作用 [J/CD].中华移植杂志:电子版,2010,4(1):10. ,,