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阿莫西林胶囊含量测定

2017-09-19 2页 doc 18KB 134阅读

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阿莫西林胶囊含量测定实验四  HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量 实验目的: 1. 熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作 2. 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护 3. 通过外标一点法计算药物浓度 4. 采用高效液相色谱法对阿莫西林胶囊主成分阿莫西林进行含量测定 实验原理:利用高效液相色谱仪的高选择性、高灵敏度等特点,通过记录已知浓度的阿莫西林对照品的色谱峰面积,并测定未知浓度的阿莫西林胶囊的色谱峰面积,根据外标一点法计算胶囊中阿莫西林的标示量的百分含量。 实验背景:阿莫西林 (Amoxicillin) 为β-内酰胺类抗生素, 临床疗...
阿莫西林胶囊含量测定
实验四  HPLC法测定阿莫西林胶囊的含量 实验目的: 1. 熟练掌握安捷伦1100液相色谱仪的操作 2. 对液相色谱仪出现的一些故障和维护会进行简单维护 3. 通过外标一点法计算药物浓度 4. 采用高效液相色谱法对阿莫西林胶囊主成分阿莫西林进行含量测定 实验原理:利用高效液相色谱仪的高选择性、高灵敏度等特点,通过记录已知浓度的阿莫西林对照品的色谱峰面积,并测定未知浓度的阿莫西林胶囊的色谱峰面积,根据外标一点法计算胶囊中阿莫西林的标示量的百分含量。 实验背景:阿莫西林 (Amoxicillin) 为β-内酰胺类抗生素, 临床疗效好, 可口服且不易引起过敏。2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法(页码401-404),方法操作简便、快速、准确、专属性好。 1. 仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪: G1310 泵, G2280进样器, G1314A紫外波长检测器。阿莫西林对照品由中国食品药品检定研究院提供(纯度为86.4%), 乙腈为色谱纯, 磷酸二氢钾为分析纯,阿莫西林胶囊由国内某药厂提供。50 ml容量瓶,小镊子;棉花;无水乙醇 2. 色谱条件 色谱柱: Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm × 150 mm, 5 µm) ; 流动相: 50 mmol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈 (97.5 : 2.5, v/v), 流速1.0 ml/min ; 检测波长254 nm,进样量20 μl,柱温室温。 3. 实验方法及结果 参照2010年中国药典二部收载阿莫西林胶囊剂的含量测定采用HPLC法(页码401-404),阿莫西林峰与杂质峰的分离度需大于1.5。 3.1 流动相的配制  称取6.8 g磷酸二氢钾固体粉末,用1 L纯水溶解;量筒精密量取975 mL磷酸二氢钾水溶液于试剂瓶中,精密量取25 mL乙腈溶液,两相混合,超声10 min后用于流动相; 3.2 对照品溶液的制备 精密称取阿莫西林对照品适量, 置50 mL量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,配制成0.5 mg/mL的标准溶液, 备用。 3.3 样品溶液的制备 取阿莫西林胶囊5粒,准确称量后取出内容物,研匀。精密称粉末25 mg, 置50 mL量瓶中, 用流动相溶解并稀释至刻度, 备用。用少许棉花将胶囊壳中残留药物拭尽,准确秤取空胶囊壳的重量,并算出5粒胶囊内容物的重量,进一步算出平均装量。 3.4 样品测定 吸取标准溶液20 μL注入液相色谱仪, 记录峰面积和保留时间;取样品20 μL注入液相色谱仪, 以外标法一点法进行含量测定。 3.5 计算 4. 实验注意事项 4.1 高效液相色谱仪在进样之前需打开purge阀,加大泵流量(流速为2-3 ml/min)并开启泵,排除管路中的气泡。 4.2 进样前需用流动相平衡色谱柱15 min,按照色谱柱几何体积5-10倍流动相冲洗色谱柱,确保色谱柱平衡良好。 4.3 进样前所填写的sample information文件名和进样瓶位置是否填写正确,确保进样的正确性。 4.4 待基线稳定后进样,在采集色谱图过程中注意柱压变化,若柱压有显著增加或降低,说明管路有堵塞或漏液现象,应立即停止进样,关掉泵流速,仔细检查排除故障。 4.5 所有进样结束后,需对管路进行用色谱甲醇或乙腈进行冲洗,色谱柱也用色谱甲醇或色谱乙腈进行冲洗至少10 min后,保存色谱柱待下次使用。 5. 实验解答题 5.1 采用HPLC-UV法进行含量测定对化合物结构的要求?如何确定紫外最大吸收波长? 5.2 简答采用HPLC法对某一药物进行含量测定的基本思路。
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