克拉霉素缓释片的制备及质量研究

克拉霉素缓释片的制备及质量研究 182S238 ClassifiedIndex: CODE:10075 U(D(C(: NO: A Dissertationforthe ofM(Medicine Degree 瞳i“艮?,h。爷旷’?-^’‘。’ ’卜滢。-，_，^K and Research of Preparation Quality Sustained Release Clarithromycin Tablets Candidate:Mo Shulei VicePI(of(Hu Supervisor: Liandong Academic for:MasterofMedicine DegreeApplied Pharmaceutical Specialty: Analysis Hebei University:University Date ofOralExaminafion: December,2009 河北大学 学位独创性声明 本人郑重声明: 所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行的研究 工作 及取得的研究成果。尽我所知， 除了文中特别加以标注和致谢的地方外， 论文 中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得河北大学或其他教 育机构的学位或证书所使用过的材料。与我,同工作的同志对本研究所做的任何 贡献均已在论文中作了明确的并表示了致谢。 作者签名: 学位论文使用授权声明 本人完全了解河北大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存 论文。 本学位论文属于 1、保密口，在――年――月――同解密后适用本授权声明。 2、不保密口。 请在以上相应方格内打“?’’ 保护知识产权声明 本人为申请河北大学学位所提交的目为 的学位论文，是我个人在导师 指导并与导师合作下取得的研究成果， 研究工作及取得的研究成果是在河北大学所提供的研究经费及导师的研究经费 资助下完成的。本人完全了解并严格遵守中华人民共和国为保护知识产权 所制定 的各项法律、行政法规以及河北大学的相关规定。 本人声明如下:本论文的成果归河北大学所有，未经征得指导教师和河北大 学的书面同意和授权，本人保证不以任何形式公开和传播科研成果和科研工作内 容。如果违反本声明，本人愿意承担相应法律责任。 声明人: 日期:――年――月――日 作者签名: 日期:――年――月――R 导师签名: 日期: 年――月――日 摘要 摘 要 部分革兰氏阴性菌、厌氧菌等均具有良好的抗菌活性。在临床上主要应用于咽炎、支气 管炎、肺炎和鼻窦炎等常见的呼吸道感染，不良反应率低。该药物生物利用度差，吸收 不完全。本文以减少药物的副作用，增加用药的顺应性，提高生物利用度为目的，研制 了克拉霉素缓释片。 全文共分五部分: 第一章:前言 第二章:采用研究了克拉霉素含量测定的HPLC法，采用了硫酸显色法对释放度进 行测定的分析方法。本文考察了克拉霉素的理化性质:克拉霉素对光、热、湿等因素稳 定;处方前的研究表明:克拉霉素在水中极微溶，微溶或略溶于各种生理pH范围内。 第三章:在单因素考察的基础上，采用HPMCK15M和10,淀粉浆作为缓释材料制 备了克拉霉素缓释片，优化筛选出了制备克拉霉素缓释片的最佳处方。 第四章:释药机理研究表明，克拉霉素缓释片的释药是以扩散为主兼有溶蚀作用的 释放度及含量均没有明显的变化，表现出了良好的稳定性。 第五章:对克拉霉素缓释片家犬体内药物动力学进行了研究，并与市售 片进行了比 较。采用统计矩的非隔室动力学理论对家犬血药数据进行处理，I刍$Jl克拉霉素缓释片的 缓释效果较好。 关键词克拉霉素缓释片生物利用度 H 目 录 录 目 第l章前言………………………………………………………………………………(1 1(1 克拉霉素的结构和性 质……………………………………………………………(1 1(2克拉霉素的发展和应 用……………………………………………………………。l 1(3克拉霉素的剂 型………………………………………………………………………2 1(4缓释技术概 述…………………………………………………………………………2 1(5亲水凝胶骨架缓控释系 统…………………………………………………………(2 第2章克拉霉素体外分析方法的建 立……………………………………………………(4 2(1仪器和材 料…………………………………………………………………………(4 2(1(1 仪 器……………………………………………………………………………………………………4 2(1(2材料……………………………………………………………………………………………………4 2(2方法和结 果…………………………………………………………………………4 2(2(1样品中克拉霉素含量测定方 法………………………………………………(4 2(2(2释放度测定方 法……………………………………………………………。6 2(2(3克拉霉素在不同介质中平衡溶解度的测定…………………………………8 2(:I讨 论…(…(((………(…(……((……………(…………………((…(……(((((…(……(((………(…(((…(…((8 第3章克拉霉素缓释片的制 备……………………………………………………………lO 3(1仪器与试 药………………………………………………………………………((10 3(2方法与结 果………………………………………………………………………。lO 3(2(1缓释片的制备工 艺…………………………………………………………10 3(2(2处方因素对药物释放的影 响………………………………………………。1l 3(2(3工艺因素对药物释放的影 响………………………………………………(13 3(3缓释片处方的优化结 果……………………………………………………………15 3(4 工艺的重现 性………………………………………………………………………15 3(5 小 结…………………………………………………………………………………………………………((16 第4章克拉霉素缓释片稳定性研 究……………………………………………………一17 4(1 仪器和试 药………………………………………………………………………l7 111 目 录 4(2方法和结 果…………………………………………………………………………17 4(2(1外观性状………………………………………………………………………(17 4(2(2含量测定、释放度测 定………………………………………………………17 4(3影响因素试 验…………………………………………………………………………(17 8 4(4加速试 验……………………………………………………………………………一l 4(5长期留样试 验………………………………………………………………………(19 9 4(6，J、结…………………………………………………………………………………………………………((1 第5章克拉霉素缓释片家犬体内药动力学研 究…………………………………………20 5(1仪器与材 料…………………………………………………………………………20 5(1(1仪器与药 品…………………………………………………………………((20 5(1(2动物…………………………………………………………………………………………………(20 5(2实验方法与结 果…………………………………………………………………一20 5(2(1药物动力学研究实验方 法…………………………………………………20 5(2(2测定结果………………………………………………………………………2l 5(2(3药物动力学研究实验结 果…………………………………………………2l 5(2(4药动学参数计算相对生物利用 度……………………………………………22 5(3 小结…………………………………………………………………………………………………………。22 全文结 论………………………………………………………………………………………23 参考文 献……………………………………………………………………………………。24 刭C谢……………………………………………………………………………………………………………………。26 硕士期间发表论文情 况……………………………………………………………………。27 IV 第1章前言 第1章前言 1(1克拉霉素的结构和性质 O 甲基 克拉霉素为红霉素的衍生物，其化学名称为13(乙基(2，4，6，8，10，12(六甲基…6 基(6(甲基四氢吡喃(2(氧 十三碳交酯。它与红霉素结构上的区别就在于6位羟基被甲氧基 取代，从而防止了分子的内环合作用，所以又名为6-0(甲基红霉素。克拉霉素的分子式 性粉末;味苦，无臭，不溶于水，略溶在甲醇或乙醇中，在三氯甲烷中易溶，在丙酮或 乙酸乙酯中溶解。熔点为227?，比旋度为--890至--950。 图1-1克拉霉素结构式 Thestructureof Fig(1-1 Clarithromycin 1(2克拉霉素的发展和应用 日本大正制药株式会社于1980年首先合成了克拉霉素，后来，大正公司将其技术 又转让给了美国雅培公司生产，在爱尔兰、意大利上市是1990年。在1991年10月获 克拉霉素在欧洲和亚洲的商品名。和红霉素相比较，克拉霉素较红霉素对胃酸稳定，其 组织穿透力强，半衰期长，同时对胃肠道的不良反应低，被肝中的P450 CYP 3A酶代 谢为活性的14 R (羟基克拉霉素，具有生物利用度高的优点。 克拉霉素在临床上应用广泛，主要治疗感染性疾病和非感染性疾病。该药为半合成 的14元环大环内酯类抗生素，它的抗菌机理为可逆地与核糖体的50s亚基结合，它通 过阻断转肽作用，来影响核糖体的移位过程、从而阻止了肽链延长，抑制细菌蛋白质的 l 河北人学医学硕+学位论文 合成。对G+菌如金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、链球菌等都有抑制作用，对部分G’菌如 流感嗜血杆菌、淋病双球菌、百日咳杆菌、部分厌氧菌、痊疮丙酸杆菌等有抑制作用， 同时对支原体也有抑制作用。 在非抗感染药物治疗中克拉霉素也有着重要的应用。克拉霉素具有抗癌活性，它通 过抑制细胞粘附，从而对抗肿瘤细胞侵袭，粘附分子的表达明显减少了。因为许多循环 系统疾病与肺炎衣原体、幽门螺旋杆菌等微生物的感染有关，克拉霉素则具有防治非稳 定性心绞痛或非Q波心肌感染患者严重心血管疾病的危险性【1‘21。 1(3克拉霉素的剂型 美国雅培公司在1991年推出克拉霉素时，剂型有片剂、干糖浆、静脉注射剂，后有 口服悬浮液和缓释片:克拉霉素国内有片剂、胶囊、颗粒剂、分散片，并且60,以上的 制剂是最传统的片剂和胶囊，给药剂量大，技术含量低，吸收不完全，生物利用度差， 由于这些因素的影响限制了克拉霉素更为广泛地应用。 克拉霉素缓释制剂的胃肠道的 副作用比普通制剂的要低，且具有良好的顺应性。截至目前为止，在美国专利和世界专 利对缓释制剂的报道5则，其规格为500m‖片‘划。 1(4缓释技术概述 二十世纪六十年代以后缓释技术蓬勃发展起来，为缓释技术提供了基本理论、物质 基础和持续发展的动力【8(1羽，是高分子材料学、生物药剂学及药物动力学等相关学科的 快速发展。通过合适的方法来延缓药物在体内的释放、吸收、代谢以及排泄的过程则是 缓释给药系统，从而能够给药次数减少，药物的毒副作用降低，减少血药浓度的峰谷现 象，患者的顺应性得以改善，达到提高疗效，增加药物治疗的稳定性。另外一方面，缓 控释制剂还可以避免某些药物对胃肠道的刺激性，避免夜间给药。基于以上这些优点， 所以缓控释制剂是目前产业化水平最高、发展最快的新型药物制剂，故被称为继常规制 剂后的第二代和第三代药物制剂。 1(5亲水凝胶骨架缓控释系统 亲水凝胶骨架缓控释系统【13d4】贝IJ是采用了亲水性高分子材料为片剂的主要辅料，例 如海藻酸钠、甲基纤维素、甲壳素等，控制药物释放的主要因素则是这些材料的亲水能 力。这些材料的主要特点:遇水以后经水合作用而膨胀，在释药系统周围会形成一层稠 厚的凝胶屏障，药物则可以通过扩散作用来通过凝胶屏障而释放，由于凝胶屏障的作用 2 第1章前言 而延缓释放速度。 骨架型缓释制剂中最常用的一种剂型就是亲水凝胶骨架片，其中，应用最为广泛是 羟丙甲基纤维素为主要缓释材料的亲水凝胶骨架片。药物释药的方式主要是通过扩散或 和 骨架溶蚀。亲水凝胶骨架片遇水性介质后，首先在表面会形成凝胶层，表面的药物 向介质中扩散;然后凝胶层会继续水化，骨架溶胀，由于凝胶层的增厚延缓了药物的释 放，同时骨架自身也不断地溶蚀，水分向片心渗透直至骨架完全溶蚀，直到药物全部释 放。相对于其他类型的缓控释制剂而言，亲水凝胶骨架片具有很多的优势:?亲水凝胶 骨架片的药物可以全部释放，生物利用度高;?制备工艺比较简单，制剂的重现性好， 既可采用直接粉末压片，又可采取传统的湿法或干法制粒压片;?羟丙甲基 纤维素的可 压性好、具有法定的药用辅料标准、价格便宜，性质稳定;?产品开发的周期短，又易 投入工业化生产【15】。 根据上述研究概况，为了减少副作用，增加用药的顺应性，提高生物利用度为目的， 本课题首先研究制备了克拉霉素亲水凝胶骨架片，并对其释药机理和体内药物动力学性 质进行了研究:其次，研究了不同骨架材料、参数对克拉霉素片释放特性的影响，并对 其释放机制进行了初步探讨;最后，选择了适宜的制剂处方，对其体内释药情况进行了 考察，以市售克拉霉素缓释片为对照，进行了体内相对生物利用度及药物动力学的研究。 本课题的研究不仅为克拉霉素开发成毒副作用小、患者顺应性好且疗效确切的药物 奠定了扎实的前期基础，而且也为克拉霉素创新药物的研制提供了先导。 河北大学医学硕士学位论文 第2章 克拉霉素体外分析方法的建立 处方和产品开发的处方前研究是最佳剂型的选择、工艺的筛选和质量的控制的 重要依据，以保证药物的物理化学和生物学的稳定性【蝴。本文测定了CLM在不同pH 条件下的稳定性、并建立了体外分析方法，为处方设计奠定了基础。 2(1仪器和材料 2(1(1 仪器 80(2离心沉淀机 巩义市予华仪器有限责任公司 ;DF(101S集热式恒温加热磁力搅 拌器 巩义市予华仪器有限责任公司 ;ZRS(8G型智能药物溶出仪 天津海益达科技有限 仪 北京创新通恒科技有限公司 。 2(1(2材料 纯，山东禹城化工厂 ;克拉霉素标准品 中国药品生物制品检定所 ;其它试剂和试药 均为分析纯。 2(2方法和结果 2(2(1 样品中克拉霉素含量测定方法 测定样品中克拉霉素的含量用HPLC法【171。 1 确定检测波长 用甲醇溶解称取的一定量的克拉霉素标准品，并稀释制成约含20mg,ml的溶液，以 甲醇为空白，在紫外(可见分光光度计190-,400锄的波长范围内扫描，结果表明，克拉 霉素只有末端吸收，将其检测波长确定为210rim。 2 色谱条件 色谱柱:DiamonsilTM 3 标准曲线绘制 在25ml容量瓶中，放入精密称取约30mg克拉霉素标准品，用甲醇溶解，并稀释 4 第2章克拉霉素体外分析方法的建立 列溶液。各取101幢1注入液相色谱仪，色谱图，以标准品峰面积对浓度回归得标准 曲线: A 10446(2+2654C，r---O(9998 结果表明，克拉霉素浓度为12,240p咖1时，其峰面积与浓度呈良好线性关系。 “ 精密度试验 配制一定浓度的克拉霉素标准品溶液，量取一定量连续进样6次，分别在日内和日 间RSD为1(23,。结果表明本方法的精密度符合方法学要求。 5 重现性试验 分别取同一批样品，配制一定浓度的克拉霉素标准品溶液，量取一定量连续进样6 次，记录峰面积，求得RSD为1(01,。结果表明本方法的重现性良好。 6 回收率试验 精密称取一定量的克拉霉素对照品，加入处方量的辅料，操作按照含量测定法进 行，计算回收率，结果见下表。结果表明该方法的回收率良好。 表1-1克拉霉素的回收率 Tab(1-1 ofCLM Recovery 7 专属性试验 按上述色谱条件对样品溶液及辅料溶液进行色谱分析，色谱图如下图所示。结果表 明，本法专属性良好，辅料对样品测定无干扰。 5 河北大学医学硕士学位论文 A空白样品 B样品 A:blank Fig(1(1Representativechromatogramssample;B:sample 【8】缓释片含量测定 供试品溶液的制备把克拉霉素缓释片20片研细，精密称取82(2mg的细粉，放入 50ml容量瓶中，加40ml甲醇超声处理20分钟，放冷后加甲醇稀释至刻度，混匀，过 滤，在10ml容量瓶中放入量取的滤液lml，用甲醇稀释至刻度，混匀，即 可。 对照品溶液的制备用甲醇溶解精密称取的一定量的克拉霉素标准品，并稀释制成 约含100I(tg,ml的溶液，即可。 分别精密吸取上述溶液各l 01(Ll注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰 面积计算，即可。 2(2(2释放度测定方法 1 释放度测定条件 ’?释放介质的选择:参照中国药典2005年版二部收载品种克拉霉素片，选择盐酸 溶液 1---*1000 900ml为释放介质。 ?测定条件:采用溶出度测定法 中国药典2005年版二部XC 第二法测定，温度 37(O?，转速50rpm，释放介质体积为900ml。 2 介质中药物浓度的测定 参照中国药典2005年版二部收载品种克拉霉素片的溶出度测定法，采用硫酸显色 法测定介质中药物的浓度。 ?确定测定波长用盐酸溶液 1--*1000 溶解称取的一定量克拉霉素标准品，稀 6 第2章克拉霉素体外分析方法的建立 酸溶液 75一loo ，混合均匀，，冷却30分钟。把辅料溶液配制成相应浓度的，用相同方 法作显色反应，作紫外可见扫描，在482nm处有最大吸收，辅料无干扰，故选择482nm 为释放介质中药物浓度的测定波长。 ?显色剂用量的选择用盐酸溶液 I---*1000 溶解准确称取的一定量的克拉霉素 考察结果显示，硫酸溶液用量大于1倍量后，吸收度增加很少，增加至2倍量时有降低 的趋势，放显色剂用量确定为与溶液等体积量。 表1-2显色剂用量的选择 Tab(1??2Theselectionofvolumeof color-developingagent ?显色时间的选择在lOml刻度试管中放入浓度约为601(tg,ml的克拉霉素标准品 时取样测定，结果见下表。考察结果显示，显色时间大于30min后，吸收度没有增加， 故将显色时间确定为30min。 表1-3显色时间的选择 Thb(1(3Theselectionofreactiontime ?溶液显色稳定性分别在室温及37" 2水浴中，放入浓度约为601ag,ml的克拉霉 吸收度。考察结果显示在两种条件下放置吸收度保持稳定，RSD分别为0(71,和0(58,。 ?标准曲线的绘制用盐酸溶液 1_1000 溶解精密称取的一定量的克拉霉素标 混匀，冷却30分钟。在482nm波长处测定吸收度，以吸收度对浓度回归得标准曲线: 7 河北大学医学硕士学位论文 A 0(0067C+0(0488r 0(9994 考察结果表明，克拉霉素浓度为30"--240吲ml时，其吸收度与浓度呈良好线性关 系。 ?回收率测定用盐酸溶液 1一l000 溶解精密称取的9份克拉霉素标准品，相应 量的辅料加入，稀释制成含克拉霉素30"--'240吲ml的溶液，取一定量的溶液，用硫酸 显色法测定，根据测得量和加入量计算回收率。平均回收率为100(21,，RSD为1(58,。 ?释放度测定照中国药典2005年版二部释放度测定法第一法，采用溶出度测定 在不同时间分别取溶液5ml滤过，在操作容器中即时补充溶剂5ml;分别取续一定量的 滤液，加盐酸溶液制成约含克拉霉素60pg,rrd的溶液作为供试品溶液。在lOml刻度试 分钟，冷却后，在482nm的波长处分光光度法分别测定吸收度;另取一定量的克拉霉素 方法显色测定，绘制标准曲线。计算不同时间的累积释放量。 2(2(3克拉霉素在不同介质中平衡溶解度的测定 测定克拉霉素的平衡溶解度，根据中国药典2005年版二部溶出度测定法第二法浆 的磷酸缓冲液中分别搅拌，间隔一定时间取样考察，其浓度用HPLC法测定，一直到浓 度不再发生改变。结果见下表。 表2-4克拉霉素在不同介质中平衡溶解度 Tab(2_4 ofeLMmdifferentmedia Solubility 2(3讨论 1 建立缓释片体外释放实验方法 参照中国药典2005年版二部收载品种克拉霉素片的溶出介质，选择盐酸溶液 8 第2苹克拉霉素体外分析方法的建立 采用硫酸显色法测定释放介质中药物的浓度。方法学考察表明，本方法方便、快捷，准 确、重现性好。 2 克拉霉素的溶解度 克拉霉素在酸性介质中溶解，但不稳定，微溶或略溶于其他生理pH范围内，在水 中极微溶。研究药物在介质中的溶解度差异，对选择释放度测定的释放介质，药物在不 同部位吸收情况时都有重要意义【18】。 9 河北大学医学硕十学位论文 第3章克拉霉素缓释片的制备 亲水凝胶骨架片是指用亲水性聚合物为骨架材料制成的片剂。它与其他类型的缓控 释剂型相比，具有生产工艺简单，安全性高，调试方法较多等诸多优点。 HPMC是应用较多的一种亲水凝胶骨架材料，本章通过参照同类产品后 选择HPMC 作为本缓释片的骨架材料，制备了克拉霉素缓释片。在此基础上，进一步进行了单因素 考察、处方优化，对自制缓释片的质量、稳定性进行了评价。 3(1仪器与试药 仪器TDP(5型单冲压片机 上海天凡药机制造厂 ;PYC-A型片剂硬度仪 上海黄海 型电热鼓风干燥箱 天津市泰斯特仪器有限公司 ;ZRS(8G型智能药物溶出仪 天津海 益达科技有限公司 。 试药克拉霉素对照品 中国药品生物制品检定所 ;95,乙醇 天津市华东试剂厂 ; 自制，规格:500 聊城化学药业有限公司 ;微晶纤维素 MCC，规格lOOcps，上海卡乐康公司 ;羟丙 有限公司 ;微粉硅胶 安徽山河药用辅料有限公司 。 3(2方法与结果 3(2(1缓释片的制备工艺 粉碎原、辅料分别过筛，称取处方量的克拉霉素和其他辅料混合均匀，加入一定量 粘合剂制得软材，过18目筛制粒。50?烘干，用16目筛整粒干颗粒，加0(5,的微粉 硅胶，混匀;用巾12nllll浅凹冲模于单冲压片机上压片，控制片剂硬度在7(0 kg,cm2， 即制得克拉霉素缓释片。工艺流程如下: lO 第3章克拉霉素缓释片的制各 圈二圈竺?回 生回生圈黼圈 图1克拉霉素制备工艺流程 chartofCLMsustained-release tablet Fig(1Technologicalprocess 3(2(2处方因素对药物释放的影响 参照有关文献[19-26】，研究了克拉霉素缓释片的影响因素。 1 HPMC的规格对药物释放的影响 选用HPMC 制备缓释片。测定释放度，结果表明，释放速度顺序为HPMCE4M K4M K15M K100M，经比较，选定K15M作为缓释材料进行处方研究。结果如下图: 图3-1HP淝的规格对药物释放的影响 Effectofthe ofHPMCOnthereleaseofCLM Fig(3-l viscosity sustainedrelease tablets n 3 2 HPMC的用量对药物释放的影响 放减慢， K15M的用量在200mg时，释放速率较好，结果如下图: 河北大学医学硕十学位论文 笳_8 S 鼬国 ? ? 一 ? ? U 倒 黔蚤 @ 2 4 6 g 10， l荔 飘。r囊。施,，势:髻t鼍静誊焉磐誊F强H参篱茧 筑缀黝 酝 私弦锄锯缘瓴?咖锄t孥?。够j。k一,&,‘me枣??‰i瓣锄瓣‰ 自。i谝x盛私?锄锄锄姚,?‰凇??葫甥，?露j。l 1、 麟?i，?‰i。。翥‰? 岛辑;彩带，锄。赫|锄i饿 图3―2HPMC的用量对药物释放的影响 OR of EffectoftheamountofHPMCtherelease Fig(3-2 CLMsustainedrelease tablets nz3 3 粘合剂的种类对药物释放的影响 以10,淀粉浆、95,乙醇液和75,乙醇溶液分别为粘合剂制软材，压 片，测定释放 度，结果表明，三者有明显差异，10,淀粉浆制得的颗粒硬度适中，释放速 率较好，结 果如下图: 图3-3粘合剂对药物释放的影响 Effectof 011thereleaseof Fig(3-3 wettingagent CLMsustainedrelease tablet n--3 5 润滑剂的用量对药物释放的影响 润滑剂分别用O(5,、1(O,、1(5,微粉硅胶，按制备工艺制备缓 释片，结果如下图。 12 第3章克拉霉素缓释片的制备 考察结果显示，微粉硅胶对药物的释放没有影响，用O(5,的微粉硅胶就 可达到润滑效果。 图3-4润滑剂对药物释放的影响 EffectoftheamountoflubricantsonthereleaseofCLMsustainedrelease Fig(3-4 tablets n--3 3(2(3工艺因素对药物释放的影响 1 制片工艺对药物释放的影响 分别进行湿法制粒压片和全粉末直接压片，测定释放度，由下图可见，两者的释药 曲线趋向一致，但干粉末的流动性不如湿法制粒好，所以考虑实际生产的可行性，选择 湿法制粒压片工艺。 ? 邑 譬 ? 8 星 回 Q (三 ? 羔 j g ? 宕 怠 O o 2 4 10 12 T蕊hr 8 图3-5制片工艺对药物释放的影响 Effectofmanufacturemethodsontherelease Fig(3-5 ofCLMsustainedrelease tablet n--3 13 河北大学医学硕士学位论文 2 片剂硬度对药物释放的影响 同一处方用湿法制粒压片工艺，以不同压力制备硬度分别为4kg,cm2、 7 kg,cm2和9 kg,cm2的缓释片，测定释放度。结果表明，硬度对释放度的影响不显著，当硬度较大时 药物的释放速度有所减慢。硬度在7 kg,cm2时，脆碎度和释放度均较好，同时又有良好 的释药特征。 ?_ , 100 震 嚣80 鱼 置 ? 篓 40 耄 墓20 U 司 O O 2 4 6 g IO T血?^ 图3-6硬度对药物释放的影响 Effectof Oiltherelease Fig(3-6 compressionpressure ofCLMsustainedrelease tablet u-3 3 HPMC的粒度对药物释放的影响 目的HPMC制成的骨架片缓释效果良好，结果如下图: 图3-7HPMC的粒度对药物释放的影响 Effect ofCLMsustained ofHPMC sizeontherelease release Fig(3-7 particle tablet n 3 14 第3章克拉霉素缓释片的制备 3(3缓释片处方的优化结果 最优处方确定为: 克拉霉素 5009 HPMCK15M 2009 微晶纤维素409 可压性淀粉 289 淀粉浆 适量 微粉硅胶0(5, 制成1000片 制备工艺:原、辅料分别粉碎过筛，称取处方量的克拉霉素及其他辅料混匀，加适 量粘合剂制软材，过18目筛制粒。50"C烘干，用16目筛整粒干颗粒，加O(5,的微粉 硅胶，混匀;用巾12衄浅凹冲模于单冲压片机上压片，控制片剂硬度在7(0 kg ,cm2， 即得克拉霉素缓释片。 3(4工艺的重现性 根据优化处方制备三批缓释片，分别测定释放度，结果表明批问重现性良好，结果 如下图: 图3(8三批缓释片的释放度曲线 ReleaseofthreebatchsofCLMsustainedrelease Fig(3-8 proffie tablets n--3 河北大学医学硕士学位论文 3(5 小结 1 对影响释药的因素进行了单因素考察。HPMC的粘度和用量对药物 释放有明 显的影响;粘合剂的种类对药物释放有明显的影响;润滑剂的用量对药物的 释放无明显 影响。 2 全粉末压片与湿法制粒压片相比流动性差、硬度对释放度影响很小，HPMC 粒度对释药有一定影响。 16 第4章克拉霉素缓释片稳定性研究 第4章 克拉霉素缓释片稳定性研究 本文对缓释片的稳定性进行了考察，为制剂包装及储存提供科学的依据。 4(1 仪器和试药 克拉霉素缓释片 自制，每片含克拉霉素500mg ，其它同第二章。 4(2方法和结果 4(2(1外观性状 观察克拉霉素缓释片的外观形态、颜色变化。 4(2(2含量测定、释放度测定 参照第二章进行测定。 4(3影响因素试验 1 光照试验 按考察项目下要求进行考查，与0天结果比较，结果见下表(。 实验结果显示，克拉霉素缓释片的各项考察指标在光照下基本上没有变 化，说明光 照对该制剂基本没有影响，结果如下表: 表4-1克拉霉素光照试验 n 3 CLMSustainedReleaseTablets to Tab(4-l of Stability ExposedLight n一3 2 高温试验 分别在40。C、60。C条件下，在适宜的密封洁净容器中放入克拉霉素缓释片，分别于 5、10天取样，进行检查，与0天结果比较，结果表明，克拉霉素缓释片的各项考察指 标在考察条件下基本上无变化，结果如下表: 17 河北大学医学硕七学位论文 表4-2克拉霉素高温试验 n--3 Tab(4-2 ofCLMSustainedReleaseTablets to Stability ExposedHigh 3 高湿试验 在RI-175,条件下，将置于恒湿密封洁净容器中的克拉霉素缓释片， 分别于5、10 天取样进行检查，与0天结果比较，结果表明，克拉霉素缓释片的含量无变 化，有吸湿 现象，释放度有所加快，结果如下表: 表4-3克拉霉素高湿试验 n 3 1’ab(4-3 ofCLMSustainedReleaseTablets to HighHumidity n 一3 Stability Exposed 4(4加速试验 在温度为40" 2、RH75,的条件下，将塑封后克拉霉素缓释片放置三个 月，于l，2， 3月取样，按考察项目下要求进行检查，与0天结果比较，结果表明，克拉 霉素缓释片 的各项考察指标基本上无变化，性质稳定，结果如下表: 第4章克拉霉素缓释片稳定性研究 表4(4克拉霉素加速试验稳定性考察 n-3 Tab(4??4 ofCLMSustainedReleaseTabletsUnderAccelerated Stability test n 3 4(5长期留样试验 在室温条件下把塑封后克拉霉素缓释片放置12个月，于3，6月和 12月取样， 按考察项目要求进行检查，与0天结果比较，结果见下表。结果表明，制剂 在留样试验 中稳定。 表4-5克拉霉素长期试验稳定性考察 n(3 TabA-5 ofCLMSustainedReleaseTabletsUnderthe Stability long-termtest nz3 4(6小结 稳定性考察结果表明，克拉霉素缓释片对光、高温稳定，在高湿条件下 片剂有吸湿， 释放度加快，需采用密闭包装。加速和长期实验结果表明，克拉霉素缓释片稳定性较好。 19 河北大学医学硕士学位论文 第5章 克拉霉素缓释片家犬体内药动力学研究 本文以市售克拉霉素缓释片为对照，进行了克拉霉素缓释片在家犬体内的相对生物 利用度的研究。 5(1仪器与材料 5(1(1仪器与药品 搅拌器 巩义市予华仪器有限责任公司 ;FA(1104N电子分析天平 上海民桥精密科学仪 器有限公司 ;80(2离心沉淀机 巩义市予华仪器有限责任公司 。受试制 剂为自制克拉 霉素缓释片 500rag,片 ;克拉霉素标准品 97(2,，中国药品生物制品检定所 ;肝素 钠 天津生物化学制药厂 ;参比制剂为诺邦 克拉霉素缓释片，0(59,片，江苏恒瑞医药 股份有限公司 ;其余试剂均为分析纯。 5(1(2 动物 家犬 体重分别为15d:2kg ;试验前无用药史，精神状态良好，试验前2周及试 验期间统一进食，由河北医科大学动物中心提供。 5(2实验方法与结果 5(2(1药物动力学研究实验方法 I 受试制剂与参比制剂 受试制剂为自制的克拉霉素缓释片 T ，参比制剂为市售克拉霉素缓释片 R ，制 剂服用量均相当于克拉霉素500mg。 2 给药设计 把6只家犬，称重，随机分成两组，每组3只，在服药前禁食12h，两次服药间隔 7天，单剂量交叉口服自制和受试制剂各500mg，在服药前和服药后l，2，3，4，6，8， 10，12，16，24，30 分离血浆，置(20"C冰箱保存备用。 3 样品测定方法【271 采用微生物管碟法测定给药后的血药浓度，鉴定菌株:藤黄微球菌[CMCC B 第5章克拉霉素缓释片家犬体内药动力学研究 其冷却凝固后作为底层，再取熔化的培养基适量加入菌悬液，充分摇匀后每个平皿加入 5ml，均匀分散在培养基上冷却凝固后作为菌层。精密吸取待测血浆加入到牛津杯中， 37?避光培养18h，取出测量抑菌圈的直径，根据标准曲线计算不同时间的血药浓度， 如果待测血浆浓度超出线性范围，则适当稀释后复测，每次测定均随行标准曲线。 5(2(2测定结果 线性关系:lgC O(1943D--1(457 R 0(9995 。 最低检测限为0(021(tg??mL,。 高、中、低3个浓度的日内精密度RSD为5(2,，日间精密度RSD为5(9,。 高、中、低3个浓度的方法回收率在98(5,"101(4,之间。 5(2(3药物动力学研究实验结果 血浆样品经处理后测定，计算药物动力学参数。用梯形法计算AUCo(t，以半对数作 图法计算l e和tl陀，‰和C姗x，采用实测值，根据矩量法计算药物体内平均滞留时间 MRT ，药动学参数结果见表(5(1。受试制剂及参比制剂的血药浓度一时间曲线，结果 如图5(2:由计算结果可见，自制缓释凝胶骨架片与参比制剂具有相似的缓释效果。 表孓1自制制剂及参比制剂的药物动力学实验结果 Tab(孓lPharmacokineticofcommercialtablets R andself-madesustained parameters release tablets a3 21 河北大学医学硕十学位论文 图5-2克拉霉素缓释片 T 和市售片 R 药时曲线 concentration??timecurveafter doseof Fig(孓2AverageClarithromycinplasma single sustainedrelease commercialtablets R andself-made tablets T 曼4 3(5 3 复5 2 一寻己u l。5 ，6 l O。5 ?O 7，12 埔，? 缴 勰 32 。二。0?4…8 Time h 5(2(4药动学参数计算相对生物利用度 以非隔室模型计算相对生物利用度 Fr ，计算公式如下，结果见表5(1。自制 缓释片对参比试剂的平均相对生物利用度为97(7,。 彳优o。旧f 口一( ，o ――--―---―--―-―二二―二― ―:――-―――二-―-一 ’么‰ reference 5(3 小结 本文建立了克拉霉素的血药浓度测定方法，并以市售缓释片为对照，进行了相对生 生物利用度F尸97(7,;与市售克拉霉素缓释片生物等效。 全文结论 全文结论 本文制备了克拉霉素缓释片，并进行了质量评价以及生物利用度研究，得到以下结 论: 1(采用HPLC法进行药物的含量测定，采用硫酸显色法对释放度进行 测定，处方 前研究表明:克拉霉素在生理pH范围内微溶或略溶:克拉霉素对光、热、湿等因素稳 定。 2(用K15M型HPMC和10,的淀粉浆作为缓释材料制备了克拉霉素缓释片。优化 筛选最佳处方。对制剂的稳定性进行了初步考察，结果表明，该制剂在影响因素试验、 加速试验及留样试验中均稳定。 3(建立了克拉霉素的血药浓度测定方法，并在家犬体内进行了生物利用度研究， Ff_97(7,;与市售克拉霉素缓释片生物等效。 河北大学医学硕十学位论文 参考文献 61( 【11朱静，徐彦贵，高仲阳克拉霉素的药理特性及应用(中国医院药学杂 志，2001，91 【2】安明，刘浚克拉霉素的药理与临床(首都医药，1999，4:61( StatesPatentControlledreleasemacrolide formulationsPatentNO(6“2276 【3】United pharmaceutical States release solublebasic Patent 90 PatentControlledformulationfor NO(57051 【4】United poorly drugs StatesPatent antibiotic PatentNO(6610328 【5】United composition Amoxicillin-clarithromycin SmtesPatent and 【6】United Proccm爆for脚gclarithromycinclarithromycin oxime-free Patent thesame NO(7101858 clarithromycin，and comprising pharmaceuticalcomposition States PatentProcessesfor and 【7】United preparingclarithromycinclarithromycinintermediate， oxime??free thesalnePatent essentially clarithromycin， andpharmaceuticalcompositioncomprising N0(6617436 [83张钧寿(缓,控释制剂的国外研究动向(中国新药杂志，1996，5 3 : 161( [9]平其能(口服缓释及控释制剂发展动态(药学进展，1995，19 3 :140( [10]黄胜炎(药物制剂发展趋势(国外医药一合成药、生化药、制剂分册， 200l，22 6 :359( mcal坞for active to 【11】Higuchi dispenser诵tlI T'I举HM(Osmotic dispensingagentresponsive osmoticgradient(USA,3995631(1976(12,17( resin-modulated SC(controlled osmotic 【12】ZentnerGM，MeeldlandGA,Sutton porosity-and drug forreleaseofdiltiazem contrled deliverysystems hydrochloride阴J S(Hussainet erosionand release 【13]ThomasD(Reynolds，St伪,inH(Gehrke,Ajaz a1(Polymer drug characterization 15"-'1122( ofhydroxypropylmethycelhlosematrices(J(Pharm(Sci， 1998，87 9 :ll cta1(Calculationofthe sizeand of 【14]J(Siepmann，H(Kranz&N(A(Peppasrequired shape matricestoachievedesiredrelease hydroxypropyimethylcellulose drug 201:151,164( 【15】徐冬羽等(口服亲水凝胶骨架片的研究进展(药学进展(2002，26 1 :10-14( 【16】毕殿洲主编(药剂学第四版(人民卫生出版社，1999，13( 【17】中华人民共和国药典委员会(中国药典2005版(北京:化学工业出版社，2005，232 【19】张玉，马力，张英(正交试验法优选双氯芬酸锌缓释片处方【J】(中国医院药学杂志，2006，26 1 :7-9( 【20】程斌，刘启，熊南山，等(正交试验优选盐酸伐昔洛韦缓释片处方【J】(中国医院药学杂志，2005，25 8 : 706(708( 【2l】李平，陈建海，蒋青锋，等(盐酸丁螺环酮缓释片的制备及其体外释 放研究【J】(中国药房，2007，18 16 : 1236"-"1238( matricesforcontrolled newlmodel 【22】J(Siepmann，N(A(Peppas(Hydrophilicdrugdelivery:a 24 参考文献 !Il thereleasekinetics?? mechanismsand anddissolution predict-ing diffusion，swelling combining Pharm(Res，1999，16 10 :1748"'1756 sizeand of et ofthe a1(Calculationrequired shape 【23】J(Siepmann，H(Kranz&N(A(Peppas release matricestoachievedesired drug hydroxypropyimethylcellulose 201:15l,164 matricesforcontrolleddelivery: allimproved drug 【24】J(Sicpmann，N(A(Peppas(Hydrophilic release modelto the mathematical resultingdrug predict 1290,1298 for matrices(1(Newlaws releasefrom Ret sealing a1(Drug hydrophilic 【25】RobertT’C(Ju&PhiUip andthe on concentration and releasebased polymerdisentangle-ment polymerdrug predicting diffusion layer(J(Pharm(Sci，1995，84:1455"-'1463 mathematicalmodel rdeasefrom matriee-s(2(A hydrophilie 【26】RobertT，PhinipR&Nixon醴a