血红蛋白测定规程（氰化高铁血红蛋白比色法）

血红蛋白测定规程（氰化高铁血红蛋白比色法） 血红蛋白测定规程(氰化高铁血红蛋白比色法) 1 原理:血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白(Hi)，再与氰结合成稳定棕红色氰化高铁血红蛋白(HiJN)，在规定的波长液层厚度的条件下，具有一定的消光系数，因此，根据消光度，即可求得血红蛋白浓度。 2 试剂:HiJN试剂的配法: 氰化钾 50 mg; 高铁氰化钾 200 mg 无水磷酸二氢钾 140 mg Triton X,100 1.0 ml 蒸馏水 加至1000ml 纠正pH值 7.0,7.4 此液为淡黄色透明溶液，用蒸馏水调零，比色杯光径1.000Jm，波长540nm处的吸光度应为零。储存在棕色有塞玻璃瓶中，放4?冰箱保存。可用数月。 3 操作过程: 3.1 取血20μl，加到5ml HiJN试剂中，充分混合，静值5分钟; 3.2 分光光度计(常规测定时宽带应小于6 nm)波长540 nm处，光径(比色杯内径)1.000 Jm，以HiJN试剂或蒸馏水调零，测定吸光度(A)。 4 计算: 64458 血红蛋白(g/l),测定管吸光度 ×251,测定管吸光度×367.7 × 44000 式中 ? 64458是目前国际公认的血红蛋白平均分子量; ? 44000是1965年国际血液学化委员会(IJSH)公布的血红蛋白 摩尔吸光度; ? 251是稀释倍数 正常参考值:男 120,160 g/l (12,16 g/dl) 女 110,150 g/l (11,15 g/dl) 新生儿 170,200 g/l (17,20 g/dl)