264例单独核心抗体阳性的HBsAg阴性血液检测分析

264例单独核心抗体阳性的HBsAg阴性血液检测分析 264例单独核心抗体阳性的HBsAg阴性血 液检测分析 检验医学与临床2O10年10月第7卷第2O期 IabMedClin,October2010,Vo1.7,No.20 仪,WEILSCANK3酶标仪,WEIIWASH4k2洗板机,AWl 洗板机等.' 1.4统计学方法采用x检验. 2结果 2006,2009年本市无偿献血者血液检测结果见表1. 表l2006,2009年无偿献血者血液检测结果[n()] 时间(年)不合格数 不合格项目 ALT不合格数HBsAg阳性数抗一HCV阳性数抗HIV阳性数梅毒阳性数 注:抗HIV阳性中斜线前的数字为经省疾控中心确认阳性数. 3讨论 本组结果显示,2006,2009年的血液总不合格率为4. 42,检测项目中血液淘汰率由高至低依次为AIT,梅毒, HBsAg,抗一HCV,抗一HIV.ALT异常和梅毒阳性是主要报废 原因,对AIT影响的因素很多,除肝胆疾病外,还与献血者饮 酒,体质量,运动量,疲劳度和服用药物等多种因素相关].由 于本站绝大部分血液来自街头的无偿献血,无偿献血受流动 性,及时性的限制,本站对献血者不做AIT快速筛查,导致献 血者血液AIT不合格的比例最大.因此,提醒必须加强对无 偿献血者献血前饮食,休息等注意事项的宣传,做好咨询,体检 工作,把好血液质量关.报废血液中梅毒仅次于AIT,二者比 较差异有统计学意义(Y一11.56,P<0.05),其原因可能是: 外来流动人口增加,从业复杂化导致高危人群增多.高特异性 的EusA法,提高了梅毒抗体的阳性检出率,近年梅毒发病率 上升,与有关我国性病发生率逐年增加的报道相符.因此,在 献血咨询时做好询问保密工作,动员有危险行为的人员主动退 出献血十分重要. HBsAg阳性率为0.30,虽然已用金标快速法筛查了 HBsAg强阳性和阳性标本,但对于弱阳性标本的筛选则需较 长时间,往往漏筛了弱阳性标本;而当冬季温度过低或夏季温 度过高,湿度过小或过大等因素影响下,往往影响结果判断. 因此,在筛选时选用灵敏度高,特的试纸条有助于提高 HBsAg检出率.本研究中抗一HCV刚性牢与其他地区类似. 抗HIV经确证1例阳性者,说明已有[tlV感染者散布在无偿 献血人群中,要杜绝HIV通过血液传摘,效控制HIV感染 势在必行. 由此可以看出,在今后的工作中,除了把采供血各个环 节的质量关外,还必须从招募低危的无偿献血者方面下功夫, 使更多更健康的人加入到无偿献血行列,壮大献血队伍.这埘 于尽可能减少不合格血液的检出而造成血液资源浪费,提高m 液质量,保证临床用血安全可靠有积极的作用. 参考文献 [1]中华人民共和国卫生部.血站.2006—30—31. E23牛艳芳,张新芳.1999,2003年运城市无偿献血者血液5 项指标检测结果调查[J].中国输血杂志,2005,】8(3): 239—24O. E33梁国均,邵长庚.全国性病流行现状和趋势分析EJ].中 性病艾滋病防治,2001,9(增刊):35. (收稿El期:2O1O一05—19) 264例单独核心抗体阳性的HBsAg阴性血液检测分析 杨娜,何丽萍(甘肃省第三人民医院检验科,兰州741000) 【摘要】目的探讨单独核心抗体阳性的HBsAg阴性血液的检测意义.方法采用 EIISA法作为初筛试 验,以DNA检测作为确诊试验.结果264例患者初筛结果为l2例出现HBsAg阴性,抗一HBc阳性模式.筛选出 的12例患者再用HBVDNA定量检测,结果为3例阳性,阳性率为25.0.结论单凭HBsAg是否阳性来判断 肝脏中HBV复制及有无传染性是远远不够的,易造成部分慢性HBV的漏诊,HBV感染后的任何血清学依据都应 把血清HBVDNA检测作为判断是否被HBV感染的必要检测手段. 【关键词】核心抗体;HBsAg;乙肝病毒感染 DOI:10.3969/j.issn.1672—9455.2010.20.060 中图分类号:R446.61;R575.2文献标志码:B文章编号:1672—9455(2010)202275—02 目前,对于乙型肝炎的诊断和筛查最常用的检测方法是酶 联免疫吸附试验(EIISA),其血清学指标主要有5项,分别为 HBsAg,抗一HBs,HBeAg,抗一HBe,抗一HBc.在日常工作中,除 了大,小三阳等一些常见的血清学模式外,比较少见的单独的 检验医学与临床2O1O年1O月第7卷第2O期IabMedClin,October2010,Vo1.7,No.20 核心抗体阳性也较常见.本文就HBsAg阴性,抗一HBc阳性 此种模式做一探讨. 1资料与方法 1.1一般资料随机收集本院门诊及住院患者264例.所有 患者均为清晨空腹采集静脉血,于当天分离血清,置一2o?保 存,并于1周内检测. 1.2试剂与仪器ELISA试剂为上海科华生物股份有限公 司提供(HBsAg,抗一HBs,HBeAg,抗一HBe,抗一HBc,批号分别 为200909044,200908034,200908024,200908024,200908034). 酶标仪型号为MK一3;ANTHOsFLUIDO洗板机.HBVDNA 试剂盒为中山医科大学达安基因股份有限公司产品,仪器为 ABIPRISM7500型荧光定量PCR仪(美国应用生物公司). 质控品为本市临检中心提供的HBV血清学标志物质控品(批 号201001). 1.3方法ELISA法操作按照试剂盒说明书要求进行,采用 MK一3酶标仪作为初筛检测,严格控制判断标准.HBVDNA 检测按照试剂盒说明书要求进行,结果以KBp表示.所有阳 性结果均做两次确认. 2结果 264例患者初筛结果为12例出现HBsAg阴性,抗一HBc 阳性模式.筛选出的12例患者再用HBVDNA定量检测,结 果为3例阳性,阳性率为25.0. 3讨论 抗一HBc阳性见于急性期,恢复后可持续数月至数年,滴度 渐降.HBVDNA阳性表明有完整HBV存在和复制,与电镜 下的DaneS颗粒意义相当?1].本组患者ELISA法定性检测 HBsAg阴性,抗一HBc阳性的12例患者中经HBVDNA检测 后3例为阳性,说明EIIsA法检测结果相同的患者,其体内 HBVDNA的复制情况存在很大的差别.如Brechot等_2报 道的HBsAg阴性而抗一HBc阳性的血清学模式中存在着HBV DNA的低水平复制.对此也说明了HBsAg阴性的血清学模 式中应该从HBVDNA的角度来分析HBV的复制及传染性. 传统的ELISA法对乙型肝炎两对半血清标志物定性测定,只 能判断其阴,阳性,无法得知其真正的浓度,且由于钩状效应和 敏感性,特异性等诸多原因,常造成HBV感染的漏诊,给临床 诊断和治疗带来许多不便.而HBV血清标志物定量检测能 较为准确地反映其血清中的含量,可以问接反映体内HBV复 制活跃程度,对临床评价药物疗效具有重要意义.商品试剂盒 检测HBsAg出现阴性结果可能是由于S基因突变株导致,这 是因为"a"决定簇基因变异使HBsAg蛋白结构和抗原性发生 改变,从而使部分试剂检测HBsAg呈阴性结果,实际上外周 血中变异的"HBsAg"仍呈高水平表达(低水平HBsAg少 见)].正是由于ElISA法敏感性有限,就造成HBV的误诊 和漏诊,在HBV5项免疫标志物检测均阴性的慢性肝病患者 中可检出HBVDNA已被许多研究所证实].如骆抗先等_6] 报道,15例HBV免疫标志物检测均阴性的慢性活动性肝炎患 者中有9例HBVDNA阳性,阳性率高达6o.部分HBV感 染者的血清标志物检测表现为单项抗一HBc阳性.过去认为这 是HBsAg向抗一HBs转化的"窗口期",约经3,6个月后出现 抗一HBs.近来研究发现部分单项抗一HBc阳性患者可持续超 过6个月,甚至再次出现HBsAg阳性_7.作者认为以非活 动期或无症状占多数的HBsAg阴性人群存在的原因不能归 因于s基因的变异,也可能是由于患者感染HBV后机体免疫 系统个体化反应不能完全清除HBsAg及其免疫复合物(机体 感染HBV后在自然清除过程中,因免疫复合物形成和免疫清 除能力低下,不能完全清除免疫复合物),使得机体在较长时期 内处于低水平HBsAg的平衡状态,从而诱导机体产生了一定 程度的免疫耐受.越来越多的证据表明,部分血清HBsAg阴 性患者并不能排除已感染HBV,其具有传染性,并且部分患者 仍可发生肝纤维化,肝硬化,甚至肝癌.因此重新评估HBsAg 阴性血液安全性及正确诊断和治疗HBsAg阴性HBV感染, 是摆在我们面前的重要问题.抗一HBc是HBcAg的相应抗体, 也是HBV感染后血清中最早出现的HBV的标志性抗体.其 持续时间长,甚至终身存在.几乎所有个体在接触HBV后都 能产生抗一HBc,故它是HBV流行病学调查的良好指标[1. 抗一HBc阳性有助于发现HBsAg阴性的HBV感染者和携带 者;有助于献血员的筛查,以确保临床用血安全;有助于确诊处 于"窗口期"(抗原消失,抗体尚未形成)的急性乙型肝炎. 以上研究提示单凭HBsAg是否阳性来判断肝脏中HBV 复制及有无传染性是远远不够的,已造成部分慢性HBV的漏 诊,有HBV感染后的任何血清学依据,都应把血清HBVDNA 检测作为判断是否被HVB感染的必要检测手段. 参考文献 [1]王健,闵福援.乙型肝炎病毒标志物的检测方法及其临床 意义[J].中华医学检验杂志,2005,6(28):115-117. r2]BrechotC,KremsdorID,PaterlinP,eta1.HepatitisBvi— rusDNAinHBsAgnegativepatientsl-J].JHepatol,1991, 13(4):49—55. 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