AFP（甲胎蛋白）

AFP（甲胎蛋白） 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-03 版序：2005-1 页码：第1 页，共4 页 AFP , AFP是单一多聚体肽键糖蛋白，590个氨基酸，MW为70000D。含糖为4%。AFP的编码基因位于第4对染色体的4q11-q22区域。与血清白蛋白、维生素结合蛋白 属同一基因家族。AFP主要在胎肝合成，其次是卵黄囊、胃肠道粘膜，肾脏也少 量合成。胎儿于6周开始合成，12-15周达到高峰。出生后1-2年降至成人水平。 正常成人肝细胞不产生AFP，而合成白蛋白。当肝细胞癌变后，AFP又重新表达。 , 原发性肝癌 1）AFP增高为原发性肝癌重要指标之一。特异性强、灵敏度高。AFP常用于原发 性肝癌临床检查及普查。大部分患者呈持续性高水平升高，部分患者呈低水平 增高。 2）AFP阴性并不排除原发性肝癌，据统计18%-20%的原发性肝癌患者血清AFP 正常。此时需结合临床及其他指标来降低假阴性。 3）年龄因素：AFP对原发性肝癌的诊断率随患者年龄的增加而逐渐下降。对老年 人AFP正常或轻微升高不能排除肝癌的可能性。 4）预后：原发性肝癌血清AFP水平与预后有关。肝癌切除后AFP能否正常或上升是判断预后的关键因素。 其他肿瘤 部分卵黄囊肿患者血清AFP上升； 胃癌、结肠癌等内胚层衍生的组织发生的癌，即使未发生肝转移也合成AFP； 而非内胚层衍生组织的癌，即使转移到肝脏也不合成AFP； 血清AFP是否上升与癌的原发部位有关，少数消化道肿瘤，如胃癌和胃癌肝转移， 血清AFP增高； 与绒毛膜促性腺激素联合检测有助于生殖细胞肿瘤的分类与分期。 肝脏良性病变 肝脏良性病变时，AFP也可增高。病毒性肝炎患者AFP轻度增高，慢性肝炎患者 约有20%AFP增高。暴发性肝炎患者AFP明显增高。病理检查时可发现AFP升高与肝细胞再生，同时肝脏受损有关系。 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-03 版序：2005-1 页码：第2 页，共4 页 AFP 血清AFP水平降低 孕妇血清AFP浓度降低可作为胎儿染色体异常的指标 原发性肝癌手术彻底切除后，血清中AFP浓度将迅速下降，1周内可降至正常水平。若增高则可能复发，这中增高比肝功能异常出现得更早。 持续性低阳性AFP与肝癌 连续性低阳性患者1年内肝癌发生率比正常者高。对低阳性患者的随访有助于早期 诊断。低阳性性患者同时伴有肝硬变及慢性肝炎时，肝癌的危险性更大。 孕妇血清/羊水AFP检测 反映胎儿状态。母体血清AFP异常增高时可能提示胎儿患低氧症、宫内死亡、遗 传缺陷、先天性神经管缺损、无脑儿、脊柱裂等。 胎儿有先天性肾病综合症、先天性食管及十二指肠闭锁、性染色体异常、脑积水、 及法乐四联症时，羊水中AFP可明显增高。 原理： 采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。 ? 第1步：标本、生物素化的抗AFP单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗AFP单抗混匀，形成夹心复合物。 ? 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲 和素间的反应结合到微粒上。 ? 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质 被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进定。 ?检测结果由机器自动从曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。 试剂： M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。含防腐剂。 R1：生物素化的抗AFP单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。含防腐剂。 R2：Ru(bpy)32＋标记的抗AFP单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。含防腐剂。 储存和稳定性： 存放在2-8 度，切莫倒置。 未开封，可稳定至标明的保质期。 开封后，2－8 度，12周； 放在Elecsys2010，8周；（室温20－25 度；开盖时间累计不超过20小时）。 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-03 版序：2005-1 页码：第3 页，共4 页 AFP 标本采集和准备： 血清：按标准常规方法采集。 血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。（不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。确保标本不被肝素污染。）标本在2－8度可稳定24小时，-20度可稳定12 个月。只可冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。 检测步骤： 提供的材料： 货号： 100人份的Elecsys AFP试剂盒包含： ? M 链霉亲和素包被的微粒 ? R1 生物素化的抗AFP抗体 ? R2 三联吡啶钌标记的抗AFP抗体 需要的材料（未提供）： ? ElecsysAFP定标液（CalSet） ? ElecsysAFP质控品（PreciControl Cardiac） ? Elecsys通用稀释液 ? Elecsys2010分析仪 ? Elecsys系统缓冲液（ProCell） ? Elecsys 测量池清洗液（CleanCell） ? Elecsys 添加剂液（SysWash） ? Elecsys 系统清洗液支架（Adapter for SysClean) ） ? Elecsys 2010反应杯（Assay Cup） ? Elecsys 2010吸样头（Assay Tip） 方法： 按仪器操作进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。仪器通过扫描试剂盒 条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法 阅读条阅读条形码，可以手工输入15位数字。 将冷藏试剂预温到20 度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动 控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。 定标： 每批AFP试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CalSet定标液定标。 文件编号： DGCPH-IMN-SOP-02-03 版序：2005-1 页码：第4 页，共4 页 AFP 定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求： ? 一个月（同一批号试剂） ? 7天（放置仪器上的同一试剂盒） ?根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。 质控： ElecsysAFP质控品（PreciControlCardiac）1和2或其它合适的质控品。 各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各 实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正。 计算： 对每一个标本，仪器会自动计算结果，单位是ng/ml或mg/L。 干扰因素： 该方法不受黄疸（胆红素<27mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.1g/dl）、脂血（脂质<1500mg/dl）和生物素<50ng/ml干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰 （2000U/ml）。50种常用药物经试验对本测定无干扰作用。接受过小鼠单抗治疗或 体内诊断的病人会出现假阳性反应。AFP测定结果应结合病人的病史、临床症状和其他检查结果进行诊断。 检测范围： 稀释： 高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍 数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。 , (Roche Elecsys) < 15ng/ml 建议各实验室建立自己的正常参考范围