[doc] 高产液相色谱法测定复方利福平片中利福平、异烟肝及吡嗪酰胺的含量

[doc] 高产液相色谱法测定复方利福平片中利福平、异烟肝及吡嗪酰胺的含量 高产液相色谱法测定复方利福平片中利福 平、异烟肝及吡嗪酰胺的含量 ? 570?巾目抗生素杂志2002年9月第27卷第9期 文章编号:1001.8689(2002)09—0570.02 高效液相色谱法测定复方利福平片中利福平, 异烟肼及吡嗪酰胺的含量 Determinationofrifampicin,isoniazidandpyrazinamidein compoundrifampicintabletbyHPLC 李群力蒋晓萌 LiQu.一li,JiangXiao—meng (浙江尖峰药业有限公司, (ZhejiangJianfengPhannaceutic’,:dCo 施存元 andShiCun—Vllan 金华321000) Ltd.,I1I1ua32】000) 摘要:用HPLC法测定复方利福平片中利福平,异烟肼及吡嗪酰胺的含量.方法:采用SpherisorbCN (9_50nun×4.6mm,5Inn)色谱柱,流动相采用0.01mol/L庚烷磺酸钠溶 液(pH2.2)一乙腈(4,4:56,v/v), 流速为2.0ml/min,检测波长为254Tml.结果:利福平在71.76,166.40t~g/ml,异烟肼在47.64,】11.16 【11l,吡嗪酰胺在】37.76,321.44t.Lg/ml范围内线性良好,r分别为0.9999,0.9991,0.9999(n=9),平均 回收率分别为:99.57%,99.51%,100.10%,RSD分别为:0.71%,0.51%,0.62%(n=7).结论:本法 简便,准确,灵敏度高. 关键词:复方利福平片;利福平;异烟肼;吡嗪酰胺;高效液相色谱 中图分类号:R927.2文献标识码:A 复方利福平片为利福平,异烟肼和吡嗪酰胺按 120,80,250mg组成(参照美国马乐道尔公司的Rifater 处方)的复方抗结核制剂.利福平,异烟肼和吡嗪酰胺 为其有效成分,在制定本品的质量时,用HPLC 法测定其中有效成分的含量,先进,准确,便于控制 产品的质量. 1与试药 仪器:高效液相色谱仪Waters486;试剂:乙腈(色 谱纯),庚烷磺酸钠(纯);对照品:利福平,异烟肼 和毗嗪酰胺对照品(100.1%,99.5%,99.64%);样品: 复方利福平片(自制;批号20001101,20001102, 20001103). 2方法和结果 2.1色谱条件 SpherisorbCN(250ramX4.6mm,5ym)色谱柱;流动 相为0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液(pH2.2)一乙腈(44: 56,,,/v)2,3,流速2.0ml/min;检测波长254mn;进样体 积20y1: 2.2对照品溶液的制备 精密称取105~C干燥至恒重的对照品利福平约60rag, 异烟肼约40mg,吡嗪酰胺约125mg,五氧化二磷干燥器 减压干燥至恒重,置于lOOml容量瓶中,加甲醇振摇溶 解并至刻度,摇匀,精密量取该溶液5ml置25ml容量 瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,备用. 2.3供试品溶液的制备 取样品20片,精密称定,研细,精密称取细粉适量 (约相当于利福平60mg),置于lOOm1容量瓶中,加甲醇 振摇溶解并至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml, 置25ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀. 2.4测定方法.] 分别精密吸取对照品溶液与样品溶液各20yl,注 入液相色谱仪,按上述色谱条件测定面积,计算,即得 (图1). 2.5标准曲线及线性范围 精密称取干燥对照品利福平约60mg,异烟肼约 40mg,吡嗪酰胺约125mg,置lOOm1容量瓶中,加甲醇溶 解,并至刻度,摇匀,精密量取3,4,5,6,7ml容量瓶中, 置25ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,照含量 测定项下方法取20l进样,记录各组分峰面积, 以各组分进样量(t~gXm1)为横坐标,相应峰面积为纵 收稿日期:2002.02.26修回日期:2002.05.16 作者简介:李群力,女,生于1969年,学t,执业药师.主要从事产品开发工作. 高效液相色谱法测定复方利福平片中利福平,异烟肼及吡嗪酰胺的含量李群力等?571? l{_18 一一—厂l 一 .. 一 . 图1复方利福平样品HPLC测定【墨I谱 1:吡嗪酰胺;2:异烟肼; 3:利福平 坐标,计算回归方程.结果见1. 2.6稳定性试验3 取样品(20001101)所配制溶液,室温放置1,2,3, 4h,重复测定4次,考察溶液放置稳定性.结果利福 平,异烟肼,吡嗪酰胺的D分别为0.44%,0.35%, 0.1l%;说明溶液在放置3h内稳定. 2.7精密度试验 取样品(20001101)所配制溶液,进样6次测定,结 果D小于0.5%,因而方法精密度良好. 2.8回收率试验 精密称取利福平均60mg,异烟肼约40mg,吡嗪酰 胺约125mg,置100ml容量瓶中,按处方加人相应辅料, 加甲醇溶解,按测定方法测定.结果平均回收率 为利福平99.57%,RSD为0.71%;异烟肼99.51%, RSD为0.51%;吡嗪酰胺100.1%,RSD为0.62%(rj= 表1线性关系测定结果 9). 2.9样品含量测定 精密吸收样品溶液20/~1,进样测定,结果见表2. 表2复方利福平片中利福平,异烟肼,吡嗪酰胺 含量测定(%,n=3) 3小结和讨论 本方法溶剂系统0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液一乙 腈中,用甲醇代乙腈试验表明以0.01mol/L庚烷磺酸 钠溶液一乙腈(44:56,v/v)分离效果最f}2]. 本方法精密度高,线性关系良好,回收率满意.因 而简单,准确,灵敏度高. 本文报道的复方利福平中利福平,异烟肼,吡嗪酰 胺含量的HPLC测定方法,能有效地控制产品质量,为 成品质量标准的建立提供了依据. 参考文献 [1JNationalCommitteeofPharmacopoeia.PharmacopoeiaofpeopleS RepublicofChina[S].vo12(中华人民共和国药典),Bei— jing:Chemic’,dIndustrialPublishingHouse,1995:Appendix25 l2JPangQY,IY,YuL,et.Analyticalseparationofri— fampicin,isoniazidandpyrazinamideincompoundrifampicin tabletsbyRP-HPLC[J].ChinJPhannaAnal(药物分析杂 志),1998;18(4):259 I3JZhouJY,WangP,LiYZ.EffectofpHandbuffersO11thestabili— tyofrifampicinsolution[J].Chin?J(中国药学杂志), 1996;31(7):4O6