体外循环对瓣膜置换术病人红细胞膜功能的影响

体外循环对瓣膜置换术病人红细胞膜功能的影响 体外循环对瓣膜置换术病人红细胞膜功能 的影响 ,/) 《6333 体外循环对瓣膜置换术病人红细胞膜功能的影响 杨玉萍畅天德黄永平刘桥义,'——一, ,.IL摘要目的:观察体外循环对红细胞膜的损伤作用:利用DPH荧光标记测定10例瓣膜置换 术病人红细胞膜流动性,并测定红细胞膜三磷酸腺苷(ATP)酶活性和丙二醛含量结果:转流30分红细 胞膜平均微牯度(1),各向异性(y)和雨二醛均明显增加(P<0.01).而膜上Na.K一ATP酶,Ca一ATP 酵和Mg"一ATP酵活性明显降低(P<O.01)停机后30分上述各值仍未恢复到转滤前水平.结论:CPB 可通过引起红细胞膜脂质过氧化反应增强,降低膜流动性和膜上ATP酶活性,对红 关键调苎盐i卫兰盟瞳旦要丝上三亘呈I三磷酸腺苷酶磅锵 lnflueucesof~dlopulmonarybyonmembraneousfuncttonoferythrocyleinpatientsundergo ing~axdlacvalvular replacementYangyuplng,YangTiande,ttuangyon勘ing,?.如伽nz0厂Ane*tOesiology,XinqiaaHospital, ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqlng630037 AbstractOb】ectire;Toobservetheeffectsofcardiopu]monarybypassoneryt~-ocytemembranedurln~ca rdiac— valvular口】a?nt.Method:Thefluidityofthemembranelabltedwkh1,6-dtphenyl一1,3.5-hexatr[ene(DPH) measuredbyf[uorometry,andmerebra/3~ousadenosinetr[phosphatases(ATPase)activitie sandmatondi~tdyhyde(MDA) eoflte~tweres[mutaueous]yassayedResult-DuringCPB30minsthemicroviscosity—anistopyandMDAcomentin- erasedsignificantly(P~001)一andtheactivitiesofNa.K一ATPase,Ca一ATPaseandMg一ATPasedecreased (P<001)comparedwiththosebeforeCPB*30minsafterCPB,them[croviscosky.antstop yandMDAcontent higherandtheactivities0fATPaseswlowerthanthos~hetoreCPB.ConclusionCPBmightca usethedamageto erythrocytehytheenhencement0lipidperoxidation-thedecreasesoffluidityandATPasesac tivitiesinerythrocyte membrane. KeywordsCardiopu]monarybypassErythrocytesMembraneFluidityMalondia]dyhydeA denosinet riphosphatase 体外循环(Cardiopulmonarybypass,CPB) 对病人血液流变学的最大干扰是红细胞变形能 力降低,易导致组织器官微循环障碍,加重缺血 缺氧性损害..我们利用DPH(1,6二苯基一1, 3.5已三烯,1,6-Diphenyl一1,3,5-Hexatriene, DPH)荧光标记法,来观察CPB对瓣膜置换术 病人红细咆膜流动性的影响,同时浏定红细胞 膜脂质过氧化产物一丙二醛(MDA)含量和 ATP酶活性变化 资料与方法 随机选择瓣膜置换术病人lO例(二尖瓣置 科 作者单位630037重庆市,第三军医大学新桥医院麻醉 换7例,二尖瓣,主动脉瓣置换3例),男女各5 例,年龄19,43岁,体重4O,53kg,术前心功 能I,?级. 麻醉及体外循环:术前30分肌注哌替啶 ]mg?kg,,异丙嗪0.5mg?kg一,东莨菪碱 0.06rag?kg,;用芬太尼5;zg?kg,,安定 o.0Zing?kg,,琥珀胆碱2mg?kg静脉快速 诱导,气管插管,控制呼吸,维持血气正常.间断 静注芬太尼(总量30~40/zg?kg)和潘库溴 铵0?08,0.1mg?kg维持麻醉;用丹麦 Polystan人工心肺机及西京l一8O型鼓泡式氧 合器行非搏动性动脉体外循环,平均泵流量 72?6?16.9ml一kg..?rain.平均灌注压 8.23士1?43kPa,血球压积23?5分别于 转流前lo分,转流30分和停机后3O分抽静脉 334 血进行指标测定. ChinJAnesthesM,June1997.Vo[17,No.6 1体外循环红细胞膜泷动性变化(;士) Na,K一ATP酶 (vM.Pi/mg.Prot/h) Ca+十一ATP酶 ("M.Pi/mg.Prot/h) Mg一ATP酶 (州.Pi/mg.Prot/h) 与转观前相比,nP<O01与转瓤30分相比,'P<O.01 用一步低渗法溶血制备红细胞膜,Lorwys 定蛋,取膜制剂(约SO~g)加入0.01mol/LPBS 1.5ml,DPB工作液(2×lOmol/L)1.5ml, (DPB由Sigma公司生产),25?温育3O分,在 丑立MPF一4型荧光分光光度计上测定各个方 向上的荧光强度(激发波长为362nm,发射波 长为432nm,狭缝为10nm)按公式计算荧光 偏振度P及平均微粘度[1—2p/(0.46一p)]和 各向异性(anistopy)[7—2p/(3一P)]".膜 MDA含量测定参照Ohkawa.的方法进行. 红细胞膜ATP酶活性测定:同上法制备 膜制剂,按药盒说明(药盒由南京建成生物工 程研究所提供),用定磷法测定Na,K__ATP 酶,Ca一ATP酶,Mg一ATP酶,以M?Pi? mg?Protein?h表示,血红蛋白按常规法 涣I定. 用华西医科大学PEMS2.0医用统计软件 对各时相点计量资料进行统计处理,结果用均 数?差(?s)表示,行方差分析及Stu— dent—Newman—Keuls比较多组均数间相差的 显着性,以P<O.05表示有显着差异. 结果 转流3O分红细胞膜平均微粘度(7),各向 异性(y)明显增加(P<O.01),膜脂质过氧化物 (MDA)也明显增加(P<O.01),停机3O分,7 和MDA仍高于转流前,见表1.转流3O分红细 胞膜Na,K+-ATP酶,Ca~-ATP酶,Mg ATP酶活性均明显低于转流前(P<O.O1),并 持续到停机3O分,见表2. 讨论 细胞膜是细胞维持内环境稳定,保持形态 和功能正常的结构基础.而细胞膜具有重要的 生物学特性即流动性,当细胞膜流动性改变时, 将直接影响细胞膜和细胞的功能,特别是膜上 受体,载体和膜酶的功能状态.体外循环引起红 细胞膜损伤的原因很多,过高的灌注压,不适当 的血液稀释度和心内吸引可引起红细胞膜损 伤.近年的研究表明,CPB时脂质过氧化反 应增强,磷脂质酶A激活,花生四烯酸代谢异 常,可能改变红细胞膜成份的质和量,导致膜损 伤.我们发现,CPB时红细胞膜荧光偏振度 (P),膜平均微粘度(1)和各向异性(7)明显增 加,膜脂质过氧化产物即丙二醛(MDA)也明显 增加,而膜上Na,KATP酶,Ca,Mg一 ATP酶活性却明显降低,说明CPB可引起红 细胞膜脂质过氧化反应增强,膜流动性降低和 1997年6月第17卷第6 膜上ATP酶活性降低,这些变化可能是CPB 时红细胞形态和功能异常,变形性下降以及红 细胞破坏的物质基础和重要原因. 参考文献 1橱玉萍,刘桥义.杨天德,等GIK溶液在心瓣膊置换木中 对血液流变性的影响.中国流变学杂志-1995?5(4):49 2聂松青,薄惠卿,林克椿蜂王精对大鼠红细胞膜流动性 的影响北京医学院,i983,15:249— 3林光椿,聂松青细胞膜流动性生理科学碰展-1985, 1683. 4OhkawaH,OhlshiN,YgLK.AssayT]ipidperoxides】n 335 a?a】【L…ebvth[obarbituricacidreaction.Anal BioChem. 1979,95:951 5史忠,李建华,王舟琪心畦瓣膜置抉术中血花生四烯 酸受其代封酶的变化.中华麻醉学杂志,1995,15:373 6Roysto?D,Flem[n~JS.DesaiIB,eta__Increasedpro4uc— tionofperoxidatlonproductsassociatedwithcardiacoper ?tis.EvidenceforheeradicalgenerationJThraeCa dbovascSurg,1986t91795- 7陈建文,张兰萍,朱剑陶.脂质过氧化对人红细胞疃流动 性的影响生物物理,1992,8:502 收稿:1996—05—06修回:199703—05) 很一— 至.壶苎墨一毛祖烈赵明珍 婴儿手术的麻醉多属急症手术,具有病情危重等 特点近年来我院共收治79侧+由于麻醉方难选择适 宜,加强术中监测和管理,取得较满意效果. 临床资料79例中男47例,女32倒.年龄最小1 无,最大l2个月,平均7.2月.其中1月蹦内33例 "1.7).ASAI,I级41倒,1一?级船倒.术前 均有不同程度脱水及酸中毒和电解质紊乱.手术种类 包括先天性肠道畸形38倒,骶尾部畸胎瘤摘除8例, 急性机械性肠梗阻8例,脊膜膨出修补术3例,腹部巨 大包块3例,嵌顿疝修补术8倒,先天性幽f1肥厚7 例.先天性食管闭锁,颞骨凹陷性骨折,融疝修补术,巨 太多房性淋巴辔各1例. 麻醉前常规肌注苯巴比妥钠3,4mg/kg,阿托品 0.o1,o.02mg/kg作胃肠减压,纠正电解质及酸碱紊 乱等.采用基础麻醉加硬膜外阻滞75倒,全麻4倒.肌 洼氯胺酮4~5mg/kg]5例.硫喷妥钠静脉推注60例 0—5,1硫喷妥钠7,8mg/kg,先用试验量1.5, 2mr静脉推入,待1,2分钟无不良反应,再继续缓慢 推入至入睡,然后摆好体位进行硬膜外穿刺.待硬膜外 穿刺完毕.洼试验量5分钟后观察无蛛阿膜下腔阻滞 觋象,测试麻醉平面,根据麻醉节段出现多少而补充部 分剂量或剩余全量硬膜外和骶管用药为0.j,1 利多卡周6,8mg/kg.同时静脉推^羟丁酸钠50mg/ 作者单位:550{103贵用市儿童医院 kg即可手术全麻为1硫喷妥钠8mg/kg,芽太尼 5,ug/kg,琥珀胆碱]mg/kg静脉诱导,插管后用普鲁卡 目复合液维持(i普鲁卡困]OOml+芬太尼0-l,,,g/kg +琥珀胆碱lOOmg),潮气量为8,lOml/kg 结果垒麻组中呼吸颡率增5,10次/分,脉搏 增快1O,I5次/分.基础加硬膜外组呼吸频率增快4, 6坎,分,脉率增快5,10次/分.所有病倒鼻导管给氧, 氧流量0.5,1L/[I】ln—spo296,99,手术时间25, 180分钟.平均71分钟出血量l0,2ooml,平均78ml. 术中4例失血15o,200mi,及时输血.3倒固体位不当 导致呼吸道不畅,当Sv()下降95立即矫正体位.并 面罩紧闭辅助呼吸,待SpO升至98以上改为鼻导 管鲼氧 讨论(1)做好必要的术前准备是麻醉手术成功 的关键,包括术前用药,纠正酸碱平衡和电解质紊乱, 对禁食,禁水时间不够者.作胃肠减压并准备好吸引装 置,防止返流和误吸;(2)基础麻醉药物我们使用硫喷 妥钠加羟丁酸钠便于控制平面控制平面是减少生理 干扰及小儿麻醉并发症的关键.但是,硫喷妥钠可引起 呼吸抑制,我们在使用过程中采用:先用试验量;不同 月龄不同浓度,单位时间内注速不宜过快;(3)加强呼 吸,循环管理t保持呼暇道通畅头后仰,肩部略垫高. 厦时有教吸蠖必要时面罩给氧.另外,加强术中监测, 注意保暖,是提高麻醉安全的重要措施之一; t收稿:l997—0108修回:199704—23)