血浆纤维蛋白原

血浆纤维蛋白原 血浆纤维蛋白原(Fbg)测定 (分析仪器法) 编号: 某某人民医院 血浆纤维蛋白原(Fbg)测定 版本:1 检验科临检室 (分析仪器法) 页数:共5页 1. 实验原理: 确定量的血浆样本经过一定时间的加温后,加入纤维蛋白原试剂,采用波长为660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,从散射光光强度的测定,可以作出凝血曲线,通过Percentage Detection Method法求得凝血时间,再通过凝血时间,求出Fbg含量. 2. 标本采集 2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血. 2.2 3.8,(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀. 3. 标本存放 1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2,8?保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，(-70?不超过6个月),只能冻融1次，在37?迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试. 4. 标本运输:低温条件下运输. 5. 标本拒收的:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定. 6. 实验: 6.1 德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶试剂,每瓶加1ml蒸馏水溶解(20人份),未开封试剂2,8?贮存到说明书上有效期.复溶试剂2,8?保存不超过5天. 6.2 Owren′s巴比妥绥冲液(PH7.35?0.1)用于标本的稀释,2,8?贮存到说明书上有效期. 6.3 Dade Control质控血浆.用蒸馏水1ml溶解后放置30分钟,才能使用或分装.复溶后,室温保存2小时,2,8?4小时. 7. 仪器设备: 7.1 仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪 1 7.2 仪器厂家:日本Sysmex公司 7.3 仪器型号:Sysmex CA-1500 7.4 仪器技术参数: 7.4.1 速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时 7.4.2 试剂位:36个,具冷藏功能. 7.4.3 样本位:50个,可自动连续添加. 7.5 仪器校准程序: 7.5.1 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准. 7.5.2 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定师执行) 8. 操作步骤: 8.1 检查前准备: 8.1.1 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽. 8.1.2 添加足够反应杯(不能超出警告线) 8.1.3 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等. 8.2 开机 先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定. 8.3 输入工作清单: 从主菜单选Work List?出现第一架样本工作清单输入画面,选ID NO Entry输入第一个样本号?按相应实验项目名称键Fbg,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”，可按Profile #1组合选项选择，选中项目相应位置标记为“?”，选完项目后按ENTER确认，要删除某项目时只需按该项目(按键如PT?变为PT-)即可，?用??键，同样输入其他标本编号项目。(快速输入可用Repeat键，输入重复标本数，复制同样项目的输入. 8.4 放置样本 按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本) 8.5 按Start键开始测定. 盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按Start键,进样开始,?测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”，此时 2 可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按Rigester,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,?测定完成,测定项目背景变为“?”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态. 8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护. 8.6.1 冲冼针Rinse Probe 8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯. 8.6.3 将试剂架连用试剂放入冰箱. 8.7 关机:先关主机,再关打印机. 9(检验结果的判断与分析: 9.1 仪器测定Fbg线性范围在0.25g/L-10g/L,测定完成仪器将显示每个参数的计算结果(包括凝固时间与Fbg含量g/L),若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息: ,,,,,出现错误,不能得到分析数据 ˉˉˉ,ˉ不能计算参数 ，，，，，数值超出线性范围. 9.2 仪器设定Fbg参考范围在1.7-4.5g/L,如果得到一个不正常数值,在数据的左侧将出现下列标记: , 出现错误信息 < 数据低于可的低限 > 数据高于可报告的高限 10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控.质控规则详见室内质控作业指导书. 11. 临床意义:Fbg是用于判定血栓前状态或血栓性疾病的必查项目. 11.1 参考范围: 1.7-4.5g/L 11.2 Fbg含量增高:高凝状态(如糖尿病伴血管病变,急性心肌梗塞,脑血管病变,口服避孕药,妊娠及其中毒症,深静脉血栓形成,动脉粥样硬化,高血脂症等);亦见于急性传染病,急性感染,肾小球疾病活动期,放射治疗后,烧伤,休克,外科手术后,恶性肿瘤,多发性骨髓瘤等. 11.3 Fbg含量减少:肝脏疾病(重症肝炎,慢性肝炎,肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纤溶期,溶栓治疗的监测,原发性纤维蛋白原缺乏症,原发性纤溶活性亢进, 3 恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等. 11.4纤维蛋白原异常:纤维蛋白原异常是一种遗传疾病,是常染色体显性遗传.患者Fbg含量可能在正常范围,但纤维蛋白原有质的异常.主要是Fbg分子的一个多态上出现一个异常氨基酸,临床上可无症状或有轻度出血倾向. 12(变异的潜在来源 12.1 抗凝剂:草酸盐、EDTA、肝素不能用于Fbg测定项目，抗凝比例不当也将 影响结果的准确性。 12.2 样本采集处理不当，如血与抗凝剂未充分混匀，出现小凝块;混匀时过分 用力，使红细胞破坏出现溶血，均会造成结果变异。 12.3 纤溶药物的影响:如双香豆素、链激酶、尿酶等 12.4 妊娠与急性炎症的影响 13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解 13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括:蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定 溶解液，必须按说明书要求使用。 13.2 溶解时，轻轻转动容器，保证干粉完全溶解，避免剧烈振荡。 13.3 复溶后，室温放置5-10分钟方可使用。 14. 仪器维护与保养 14.1 日常维护(见8.6) 14.2 每周维护 14.2.1 液路冲洗:仪器在“Ready”状态下，从主菜单按 Special Menu?按Maintain ?按Rinse, Prepare ? 按 Execute 键运行此程序?完成后按 Return 返回。 14.2.2 清洁仪器:定期用擦布擦干净仪器内外，包括试剂槽。 14.3 需要时维护: 14.3.1 调整压力:仪器在“Ready”状态下，以主菜单按Special Menu?按Maintain ?按Pressure Adjust 键，显示压力是否在其调整范围内,若不在，则打开 仪器右侧相应压力调整旋钮，旋动调整好压力，再锁紧旋钮。 14.3.2 更换灯泡:关机?从仪器右侧取下灯泡外盖及内盖?换上好的灯泡?装上 内外盖?从主菜单按Special Menu?再按Maintain?按 Calib lamp?确认 关上遮光盖，按Execute运行调整程序。 14.3.3 更换保险管:关机?从仪器左侧旋下保险盖?更换上好的保险管?装上保 4 险管盖。 15. 参考文献 15.1 叶应妩.王毓三等《全国临床检验》第三版，东南大学出版社. 15.2 Sysmex公司《Sysmex CA-1500操作手册》 1998.6修订本. 编写人签名 复审人签名 审批人签名 生效日期 姓 名: 姓 名: 姓 名: 编写日期: 复审日期: 批准日期: 5