二甲基甲酰胺对小鼠睾丸组织结构和睾丸酶的影响道

二甲基甲酰胺对小鼠睾丸组织结构和睾丸酶的影响道 环境与健康杂志,,,,年,月第,,卷第,期, ,,,,,,, ,,,,,,，,,,,,,,,, ,,,,，,,,(,,，,,(, ?,,,? 【论著】 文章编号:,,,,(,,,,(,,,,),,,,,,,,,, 二甲基甲酰胺对小鼠睾丸组织结构和睾丸酶的影响 郑芸鹤，黄璐，侯旭剑，于素芳 摘要:目的探讨二甲基甲酰胺(,,,)对睾丸组织结构及睾丸酶活力的影响。方法将,,只,,,级健康成年雄性 昆明种小鼠随机分为空白对照组(, ,，,【,)、低(,(, ,，，【,)、中(, ,,,【,)、高(, ,,,,)剂量染毒组。每天灌胃染毒,,,一次，空 白对照组以蒸馏水灌胃，连续灌胃,, ,。于染毒前, ,称重小鼠，以后每, ,称重,次。于第,,日摘除眼球取血并颈椎 脱臼处死小鼠。每组随机抽取两只小鼠的一侧睾丸，制备病理切片。采用试剂盒测定其余睾丸琥珀酸脱氢酶(,,,)、乳酸 脱氢酶(,,,)、酸性磷酸酶(,,,)活力。结果与空白对照组(,非,)比较，染毒第,天后各染毒组小鼠体重下降(,,(,,)。 随染毒剂量增高，睾丸组织中,,,活力有增高趋势，各染毒组,,,活力显著高于空白对照组(,,,(,,)。中、高剂量染毒组 ,,,活力显著低于空白对照组(,,,(,,)。各染毒组,,,活力显著低于空白对照组(,,,(,,)。结论在本实验染毒时间和 剂量范围内，,,,能引起小鼠睾丸组织病理学改变并且抑制睾丸酶的活力。 关键词:二甲基甲酰胺;睾丸;病理学:睾丸酶 中图分类号:,,,,(, 文献标识码:, ,,,,;, ,, ,,,,,,,,,,,,, ,,,,(,,,),, ,,,,,,,,,;,, ,,,,;,,,, ,,,,,,,,,, ,;,,,,,, ,, ,,,,,, ,, ,,;, ,,,,, ,,,—,,， ,,,,, ,,。,,,,,,,,,,,,,以,;,,,,,,,,,,,; ,,,,,,，,,,,,,,, ,,,,,,,,,,，月’,,,，,,,,,,,, ,,,,,,，,,,,, ,,,,,,;,:,,,,;,,,, ,, ,,,,,,, ,,, ,,,,;, ,, ,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,, ,, ,,, ,,,,,,,,,;,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,,,,, ,;,,,,,, ,, ,,, ,,,,,, ,, ,,;,(,,,,,,, ,, ,, ,,,, ,,;, ,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,, ,,,,,, ,, ,,, ,,,,, ,, ,，,(,，, ,,, , ,,,, ,,,,,;,,,,,,， ,,;, , ,,,(,,, ,, ;,,,,;,,,,, ,,,,(,, ,,, ,,(,,, ,,;, ,,,,, ,,,,,,, ,,,, ;,,,,;,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, ,,,,, ,,, ,,;, ,,,, ,,,,,,( ,,, ,,;, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,;,,, ,, ,,;, ,,,,, ,,, ,,, ,,,,,;,, ,,, ,,,,,,, ,, ,, ,,, ,,,,,,,,,;,, ,,,,,,,,,,,(,,,, ,,,,, ,,, ,,, ,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,，,,;,,,,,, ,,;;,,,; ,;,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,)，,,;,,,, ,,,,,,,,,,,,,(,,,),,, ,;,, ,,,,,,,,,,, (,,,)(,,,山缸 ,,,,,,,, ,,,, ,,, ;,,,,,, ,,,,,，,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,, , ,,,,,,,;,,, ,,;,, ,,, ,, ,,,, ,,,,,,,(,(,,),,,,, , ,;,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,,;,,, ,,,,,,(,,,(,,),,, ,, ,,,, ,, ,,,,,,,,,(,,,,,,,, ,,,, ,,, ;,,,,,, ,,,,,，,,, ,,, ,,;,,,,, ,, ,,,,,, ,, ,,,，,,,,;,,,,,, ,, ,,, ,, ,,, ,,,,,, ,,,,,, ,, ,,;,,,,,,, ,,,,,，,,,,, ,,, ,,, ,,, ,;,,,,,, ,,, ,,,,,,,,(,,, ,;,,,,,, ,, ,,, ,, , ,，,, ,,, , ,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,,,,;,,, ,,,,,(,,,(,,)。,,, ,,,,, ,, ,,, ,;,,,,,, ,, ,,, ,,, ,,,,,,, ,,,,,,(,,,;,,,,,, ,,, ,,,,,,,, ,,, ,,,,,;, ,,, ,,,,,,, ,,,,;, ,, ,,, ,,,,,,,;,, ,,,,;,,,, ,,, ,,,,, ,,, ,,,,,, ,, ,,;,( ,,, ,,, ,;,,,,,, ,, ,,,,:,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,;,,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,, 二甲基甲酰胺(,,,,,,,,,,,,,,,,,，,,,)是一种 ,,,,,,,公司)，,,,,,,,型石蜡漂洗机(英国,,,,,,,低毒类有机溶剂(广泛应用于聚氨酯面料、染料及制药 公司)。,,,为分析纯，由济南实验试剂有限公司提等行业。近年来国内外对,,,潜在的雄性生殖毒性有 供。酸性磷酸酶(,,,)、乳酸脱氢酶(,,,)、琥珀酸脱所关注(流行病调查资料显示,,,可使男工的性功能 氢酶(,,,)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。受到不同程度的影响。如精子的损伤和活力的降低【,】。 ,(,动物染毒及处理但是，有关,,,雄性生殖损伤机制的研究报道尚少。 选择,,,级健康成年雄性昆明种小鼠,,只。体本研究通过对雄性小鼠染毒。初步探讨,,,对睾丸组 重,,—,, ,(由山东大学实验动物中心提供，动物合格织结构及睾丸功能酶的影响。 证号:,,,,(鲁),,,,(,,,,。饲养条件为每天光照 ,, ,，普通饲料喂养，温度为(,,?,),,，相对湿度为,与方法 (,,?,,),。适应性喂养一周后，随机分为空白对照组,(,主要仪器与试剂 和低(,(, ,,,,)、中(,‖,,)、高(, ,瓜,)剂量染毒组，每 多功能冷冻水平离心机(德国,,,,,, ,,,,,,, 组,,只。每天灌胃染毒,,,一次。空白对照组以蒸馏,,,,,,,公司)，,,,,,型紫外(可见分光光度计(美国 水灌胃，连续灌胃,, ,。于染毒前, ,称重小鼠，以后,,;,,,, ,,,,,,,股份有限公司)，,,,,型光学显微镜 每, ,称重,次。于第,,日摘除眼球取血并颈椎脱臼(日本,,,,,公司)，,,,,,,,,,,型切片机(英国 处死。每组随机抽取两只小鼠的一侧睾丸。放人预先配 制好的中性福尔马林溶液中(,,甲醛)进行固定，用于作者单位:山东大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学研究所(山东 济南,,,,,,) 制作病理切片，其余睾丸一,,?保存不超过, ,，用以作者简介:郑芸鹤(,,,,,)，女，硕士研究生，从事职业卫生研究。 测定睾丸,,,、,,,、,,,活力。通讯作者:于素芳(,,,:(,,,,),,,,,,,, (,,,( 环境与健康杂志,,,,年,月第,,卷第,期, ,,,,,,, ,,,, ,,，,,,,,,,,, ,,,,，,,,(,,，,,(,,(, 睾丸酶活力的测定 有增高趋势。,,,、,,,活力有下降趋势。各染毒组 取一,,?保存的睾丸，去被膜、血管，准确称重，加 ,,,活力明显高于空白对照组(,,,(,,)，中、高剂量组,倍冰生理盐水。用玻璃匀浆器在冰水浴条件下研磨 ,,,活力明显低于空白对照组(,,,(,,，,,,(,,)，各染, ,,,，制成睾丸匀浆。然后，在低温(, ,,)离心机中以 毒组,,,活力明显低于空白对照组(,,,(,,)。, ,,, ,,,,,(半径,(,。,(, ;,)离心,, ,,,，静置片刻， 袭, ,,,染毒对雄性小鼠睾丸,,,、,,,、,,,活力的影响 (,,,,，互拶)取上清液检测,,,、,,,、,,,活力。具体操作按试剂盒说明进行。,(,睾丸组织切片的制作过程 通过取材、固定、洗涤、脱水、透明包埋、脱水、透明、封藏等步骤制成病理切片，镜下观察睾丸组织。,(,统计学分析 注:与空白对照组(,以,)比较，经方差分析和,,,检验，(,,,(,,， 实验数据以面拯示。所得数据采用,,,, ,,(,软 ”,,,(,,;。与空白对照组(,班,)比较，经,,,,,,,,,,,,检验，,,,(,,。件进行正态性检验和方差齐性检验。单因素方差分析时。若方差齐，用,检验;方差不齐，用,,,;,法进行 ,讨论近似,检验。进一步比较时，选择,,,检验;方差不齐 雄性生殖能力的维持需要有足够的精子数量以及进行,,,,,(,,,,,,检验。 较强的活力。睾丸是产生精子的场所。外来化学物质影 响雄性生殖功能时(无论是直接作用于睾丸组织。还是,结果 通过影响性激素水平间接作用，最终都会导致睾丸组,(, ,,,染毒对小鼠体重的增长状况影响 织的病理学改变〔,,。本实验睾丸组织的病理切片显示， 表,可见(各染毒组小鼠从染毒第,天开始体重 染毒组小鼠睾丸曲细精管明显萎缩，曲细精管中各级与对照组相比明显降低(,,,(,,)。第,,天，各染毒组 精母细胞减少，细胞间有中毒空泡，个别曲细精管管腔小鼠与对照组相比。体重均降低了将近,,,。 中可见脱落的生精细胞，管腔内成熟精子变少或消失; 裘, ,,,染毒雄性小鼠体重随时间变化 (,,,,，互地，,) 间质疏松，血管扩张。推测,,,可以直接作用于生精 细胞，破坏生精过程，从而造成睾丸的损伤，影响雄性 生殖功能。 睾丸酶为性腺细胞分化正常的指标〔,,。目前已有 多种酶经研究作为性腺毒性的预测指标(检测这些酶 的活力可以评价生殖损伤的程度。,,,广泛存在于生 注:，与空白对照组(,‖,,)比较，经方差分析和,,,检验，,,,(,, 精小管内，催化丙酮酸转化为乳酸进行无氧代谢。由于 ,,(, ,,,染毒小鼠睾丸组织病理切片 睾丸曲细精管精母细胞粗线期以后的各级生精细胞位,(,(, 对照组 睾丸被膜光滑完整。生精小管横切面 于支持细胞紧密连接的上方，难以直接通过基膜从间可见精原细胞及不同发育阶段的精母细胞、精子细胞、 质获取营养。而主要依靠糖酵解进行，所以,,,是生精子,—,层排列有序。组成多种形态的生精上皮细胞。 精细胞糖代谢生能的主要酶。,,,活力与生精过程及少数间质细胞呈成纤维细胞样状态(封三图,,、,)。 精子活动、获能及受精有关，可作为预测生精能力的重,(,(,低剂量组细胞排列疏松。部分曲细精管中各 要指标【,】。在本实验中发现,,,活力与空白对照组相级精母细胞减少，成熟精子数量减少，但精原细胞的数 比显著降低(,,,(,,)，说明,,,可以使该酶活力受到量及形态未见明显改变。间质血管轻度扩张(封三图 抑制，能量供给受阻逐渐导致细胞 的变性，使得各级生 ,,、,,)。 精细胞数量减少，精子生成数减少。在睾丸中，,,,主,(,(, 中剂量组细胞排列疏松无序，层次感差，部分 要分布于曲细精管和生精细胞的线粒体内，在精子的 曲细精管中各级精母细胞数量减少。个别曲细精管管腔 能量代谢中起重要作用。它催化三羧酸循环中琥珀酸 中可见脱落的精母细胞，间质血管扩张，见封三图,,、,。 和延胡索酸间的反应，是生精细胞和精子进行有氧呼,(,(,高剂量组细胞数量减少(排列明显疏松，见封 吸的关键酶，其活力大小与精子的发生成熟密切相 三图,,，管腔内成熟精子明显变少或消失。细胞间可 关〔,,。并且，,,,是连接氧化磷酸化与电子传递的枢纽 见中毒空泡，曲细精管管腔中可见脱落的精母细胞，间 之一，可为真核细胞线粒体和多种原核细胞需氧和产 质疏松，血管明显扩张(封三图,,、,)。 能的呼吸链提供电子。,,,的活力可作为睾丸成熟、,(, ,,,染毒对小鼠睾丸酶活力的影响 精子功能成熟和形态完善的标志酶。本研究中，与空白 表,可见。随染毒剂量增高睾丸组织中,,,活力 对照组比较，中、高剂量组,,,活力显著降低(,, 环境与健康杂志,,,,年,月第,,卷第,期, ,,,,,,, ,,,,,,。,,,,,,,,, ,,,,(,,,(,,(,,(, (,,,? 【论著】 文章编号:,,,,(,,,,(,,,,),,(,,,,,,, 电磁辐射对家兔小脑蛋白激酶,活力的影响 刘勇，黄蔚初，程绪浩，唐功臣，王修德，刘延秋 摘要:目的研究电磁辐射对家兔小脑蛋白激酶,(,,,,,,,,,,,,,,，,,,)活力的影响。方法选择,,只清洁级日本 大耳白家兔，体重(,(,,?,,,,),,，随机分为对照组和电磁辐射组〔包括于辐射后即刻(,)、,、,,和,, ,测定,,,活力的, 个时相组〕。每组,只。辐射组给予平均功率密度为,, ,,,;,,的,波段电磁波，持续辐射,, ,,,，对照组于相同环境下接 受假辐射。测定辐射前和辐射后即刻家兔的肛温并计算比吸收率(,,,;,,,; ,,,,,,,,,, ,,,,，,,,)值:采用改良的,,,,,法检 测,,,的活力。结果电磁辐射后即刻(, ,)家兔肛温升高,(,,?。,,尺值为,(,, ,;,,,,,;小脑,,,的活力在电磁辐射后 即刻(,,)与对照组比较显著降低，差异有统计学意义(,,,(,,)。小脑,,,的活力在电磁辐射后,、,,、,, ,与对照组比 较，差异无统计学意义(,,,(,,)。结论,, ,,，;,,电磁辐射,,,,,可导致家兔机体产生明显热效应。并抑制小脑,,, 的活力。 关键词:辐射;小脑;蛋白激酶,;家兔 中图分类号:,,,,(, 文献标识码:, ,脏;, ,, ,,,;,,,,,,,,,,; ，,,,,,,,,,, ,, ,;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, , ,, ,,,,,, ,,,,,,,,,, ,，, ,,,,，日,阻，旧,,,,;,,， ;,,?; ,,,,,,，,, ,,(,,,,,,，,, ,,,,,,, ,腑以,,, ,,,,,,,,,, ,,,,’,,, ,,,,,,,, ,,,,,,，,,’,,,，,,,,,,,, ,,,,,,， ’ ,,,,, ,,,,,,;,:,,,,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,,,;,, ,, ,,,;,,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,;,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,, ,(,,,),,, ,,, ;,,’,,,,,,, ,,,,,,,,(,,,,,,, ,,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,,,, ,,, ,,,,,,, ,,,, ;,,,,,, ,,, ,,,;,,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,, ,,,,, (,,;,,,,,, , ,,,,，, ,,,,,，,, ,,,,,，,, ,,,,, ,,, ,, ,,,,, ,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,,)，,,,,,,, ,, ,,, ,,,;,,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,, ,, ,, ,,,;,, , ,,,？,,,;, ,,,,, ,,,;,,,,,,,,,,; ,,,,,,,,,,, ,,, ,, ,,,,,,,(,,, ,,;,,, ,,,,,,,,,,, ,聃,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,, ,,, ,,, ,,,;,,,; ,,,,,,,,,, ,,,,(,,,),,,,,, ,,,, ;,,;,,,,,,，,,, ,;,,,,,, ,, ,,, ,,, ;,,,,,,,,, ,,, ,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,,,, ,,,,, ,,,，,,,(,,,,,,, ,,, ,,;, ,,,,,,, ,,,,,,,,, ,(,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,?,,,,, ,,,,,,,,,,,(,,, ,,,,, ,,,,(,, ,,,,,,,(,,,,;,,,,,,,,;,,,,,, ,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,(,,,;,,,,,, ,,,,,,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,,,,,, ,,,;,,(,,,,,,, ,,,,,,, ,,,,;, ,,,, ,, ,,,,;,,, ,, ,,, ,,,,,, ,,, ,,, ,;,,,,,, ,, ,,, ;,,,,,,,,, ,,;,,,,,, ,,,,,,,;,,,,,( ,,, ,,,,,:,,,,,,,,,;,,,,,,,,,,;,,,,,,, ,,,,,, ,:,,,,,, 研究表明，电磁辐射能够损害中枢神经系统，影 记忆的主要功能脑区【,,。突触长时程抑制(,,,, ,,,,响学习记忆功能【,’,】。中枢神经系统中，除了海马脑 ,,,,,,,,,,，,,,)是小脑运动性学习记忆功能的神经区具有学习记忆功能外(小脑已被证实是运动性学习 电生理基础〔,,，小脑,,,的形成和保持受蒲肯野细胞 上,一氨基(,(羟基(,(甲基一,一异嗯唑丙酸(仅(,,,,,,,(作者单位:济南军区联勤部疾病预防控制中心卫生监督科(山东济南 ,,,,,,,一,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,; ,;,,(,,,,)受体 ,,,,,,)作者简介:刘勇(,,,,,)。男，博士，主治医师，从事电磁辐射的生物学效 的调控，,,,,受体包括谷氨酸受体(,,,,,,,,, 应研究。 ,,;,,,,,，,,,),、,、,和,共四种亚型，其中,,,, ,及,(,,)，推测,,,可以导致小鼠睾丸生精细胞能量生成 参考文献:不足，从而干扰生精过程。并且,,,也可以影响睾丸 〔,〕,,,,, ,,，,,,,”，,，,,, ,,，,,;,,(,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,, ,(,(,,,,,,,,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,，,,,,, ,,,,,,, ,,,,,,,,的成熟以及,,,的生成，而在精子中, ,,,不足可导致 ,, 〔,〕(,,,,,, ,,,,,,，,,,,，,,:,,,,—,,,,(精子活动度的降低。,,,主要分布于睾丸支持细胞的 〔,〕丁训诚，蒋学之，顾祖维(男性生殖毒理学〔,)(北 京:中国人，,，出 版社(,,,,:,,,—,,,(胞浆内，是支持细胞溶酶体的特异酶，该酶存在于精细 〔,〕王心如(毒理学基础〔,〕(,版(北京:人民卫生出版社，,,,,:胞溶酶体的前体〔,,。睾丸内的,,,主要发挥清除受损 ,,,—,,,(或衰老细胞的功能，其水平升高可能是由于,,,造成 〔,〕,,,,, ,，,,,,,,, ,，,,,,,, ,,(,‰, ,, ,,,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,〔,,(,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,，,,,,。,,:,,—,,(睾.