高效液相色谱法测定氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量

高效液相色谱法测定氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的含量 高效液相色谱法测定氨咖黄敏片中对乙酰 氨基酚和咖啡因的含量 时珍国医国药2006年第l7卷第7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.7 3.2样品?对S.?肉瘤抑瘤作用及NK细胞活性的影响样品? 的不同剂量组对S.s0肉瘤小鼠抑瘤率为32.27%一48.17%,其用 药各剂量与空白组比较差异显着(P<0.05),药物剂量与抑瘤率 成正相关,其中高剂量组与刺五加水煎液样品I比较差异显着 (P<0.05).结果见2. 表2样品?对S.?肉瘤抑瘤作用及NK细胞活性的影响 空白对照组比较P<0.05;与?高剂量组比较P<O.05,n:10 4讨论 为明确药效部位的药效作用和进一步分离有效成分或部位, 以及与其它提取工艺的优化比较,故以刺五加水煎液对照,开展针 对上述不同样品药效实验对比筛选.采用有机溶剂提取不同药效 部位,从提取样品?的成分上讲主要活性部位多糖成分,从上述结 果看,刺五加的抗肿瘤主要药效部位在样品?,样品?虽有一定的 免疫调节作用但抑瘤效果低于样品?.这与以往报道的刺五加抗 肿瘤的有效部位成分基本相同,由此也为今后从抗肿瘤抑瘤作 用为目标进一步分离样品?提供依据,为今后探讨制剂工艺合理 优化提供药效学依据,有关研究还在不断深入之中. __-I-_一 Cj 同 参考文献: [1]张曼颖.刺五加叶皂甙诱导肺癌细胞凋亡的研究[J].吉林大学学 报,2oo2,28(1):37. [2]王峻.刺五加注射液对肺肿瘤化疗患者免疫调节作用的研究[J]. 浙江中西医对合杂志,2001,u(6);339. [3]蔡宇,梁少玲.刺五加水煎液膜分离不同药效部位抗肿瘤作用研究 [J].山东中医,2005,24(4):238. [4]张玮,刘宝珠,裴月湖.刺五加药理作用研究进展[J].沈阳药科大 学,2002,19(2):143. 效液相色谱法测定氨咖黄敏片中 对乙酰氨基酚和咖啡因的含量 熊灿琼,薛朝金 (贵州省毕节地区药品检验所551700) 摘要:目的建立同时测定氨咖黄敏片中对乙酰氨基酚和咖啡因的高效液相色谱方 法.方法采用DalianEliteHypersil ODS2(200mm×4.6mm,5la,m)柱,流动相:0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节 pH至2.6?0.1)-甲醇(6:4),流 速:1.0ml/min;检测波长:254am,柱温:20?.结果对乙酰氨基酚在l0.15— 101.501~g,/ml,咖啡因在0.540—5.4041~g,/ ml浓度范围内线性关系良好;对乙酰氨基酚回收率为99.13%,RSD为0.67%(,l=6);咖啡因回收率为98.89%,RSD 为0.81%(,l=6).结论该方法简便,准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制和评价. 关键词:氨咖黄敏片;对乙酰氨基酚;咖啡因;高效液相色谱法 中图分类号:R284.2文献标识码:A文章编号:1008-0805(2006)07一l188-I)2 HPLCDeterminationofParacetamolandCaffeineinAnkaHuangminTablets XIONGCan-qiong,XUEChao-jin (B0"/eDistrictInstituteforDrugControl,B~iie,Guizhou551700,China) Abstract:ObjecaveToestablishamethodforsimultaneousdeterminationofParacetamolan dCaffeineinAnjkiaHuangminTa- blesbyHPLC.MethodsDalianEliteHypersilODS2(200mmx4.6mill,5m)columnWaSuse d.ThemobilephaSeWaSmetha- nol-0.01tool?KH2PO4solution(pHwasadjustedto2.6? 0.1withphosphoricacid)(6:4).Theflowratewas1.0ml/min;The detectionwavelengthWassetat254am:ThecolumntemperatureWaS20?.ResultsThelinearrangeWaSwithin10.15—101.50 ,theaveragerecoverywaS99.13%(,l=6),RSDWaS0.68%forParacetamol,andalinearrange waswithin0.540—5.404 ,theaveragerecoverywaS98.90%(,l=6),RSDWaS0.80%forCaffeine.ConclusionThemet hodWaSsimple,accurateand withagoodreproducibilityandcallbeusedforthequalitycontrolofthetablets. Keywords:AnkaHuangmintables;Paracetamol;Caffeine;HPLC 氨咖黄敏片是临床常用的抗感冒药,为复方制剂.每片内含 对乙酰氨基酚250mg,咖啡因l5mg,马来酸氯苯那敏1mg和 收稿日期:2005-O8-01;修订日期:2006-03—12 作者简介:熊灿琼(1969一).女(穿青族),贵州大方人,现任贵州省毕节地 区药品检验所主管药师,主要从事化学药品检验工作. ? l188? 人工牛黄10mg.收载于《国家药品化学药品地方标准上升 国家标准》第三册,应用重氮化法测定对乙酰氨基酚的含量,剩 余碘量法测定咖啡因的含量,该法操作繁琐,影响因素诸多,准确 性和重现性差.本文采用高效液相色谱法…通过多次实验,同 时测定对乙酰氨基酚和咖啡因的含量,结果表明本实验方法简 单,准确性高,灵敏度高. LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.7时 珍国医国药2006年第17卷第7期 1仪器与试药 瑞士ME1TrLERTOLEDO—AG135电子天平;日本岛津LC— IOATVP高效液相色谱仪,包括SPD—IOAVP紫外检测器,LC- IOATVP泵,HT-230A柱温箱. 对乙酰氨基酚对照品(批号:100018-200408),咖啡因对照品 (批号:171215-200406),马来酸氯苯那敏对照品(批号:100047- 200305)(均由中国药品生物制品检定所提供),人工牛黄(原料 药,符合药用规定),磷酸二氢钾(分析纯),甲醇(色谱纯),水为 高纯水.氨咖黄敏片(贵州科晖制药厂批号:20041208, 20041103;贵州健友制药有限公司批号:20040231). 2方法与结果 2.1色谱条件采用DalianEliteHypersilODS251.Lm(200mmx 4.6mm)柱,流动相:磷酸盐缓冲液(取0.O1mol/L磷酸二氢钾溶 液,用磷酸调节pH值至2.6?0.1)-甲醇(6:4)为流动相,流速: 1ml/min,检测波长为254nm,柱温:20?,进样体积20l. 2.2系统适用性实验对乙酰氨基酚和咖啡因分离良好,分离 度为4.0,理论板数:对乙酰氨基酚不低于3500,咖啡因不低于 3500. 2.3对照品溶液的制备精密称取在105?干燥至恒重的对乙 酰氨基酚0.1g于100rnl量瓶中,咖啡因15mg于250ml量瓶 中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得对照品贮备液.精密 量取上述溶液各2ml于50ml量瓶中,加入流动相稀释至刻度, 摇匀,即得对照品溶液. 2.4供试品溶液的制备取氨咖黄敏片20片,精密称定,研细, 精密称取25mg于25ml量瓶中,加入流动相溶解并稀释至刻 度,摇匀,过滤精密量,取续滤液1ml于10ml量瓶中,加流动相 稀释至刻度,摇匀,即得. 2.5空白样品溶液的制备按处方量去掉对乙酰氨基酚,咖啡 因,制成空白对照,其余同供试品处理即得.分别取对照品溶液, 供试品溶液,空白样品溶液各20l,注入高效液相色谱仪,按2.1 色谱条件测定.结果空白样品溶液色谱图中,在对照品溶液色谱 图中相应的位置上,无干扰峰.结果见图1. 2.6精密度实验分别精密吸取对乙酰氨基酚,咖啡因的对照 品贮备液配制,对乙酰氨基酚,咖啡因的浓度分别为40.6o, 2.162g/rnl的对照品溶液,重复进样6次,测定峰面积.对乙酰 氨基酚RSD为0.17%(17,=6),咖啡因RSD为0.15%(17,=6). abc a一对照品b一供试品c一空白样品 1.对乙酰氨基酚2.咖啡因 图1HPLC色谱图 2.7线性关系考察分别精密吸取对乙酰氨基酚,咖啡因对照品 贮备液配制系列浓度,对乙酰氨基酚的浓度依次为10.15, 20.30,40.6o,6o.9o,81.20,101.50g/ml;咖啡因浓度依次为 0.540,1.081,2.162,3.242,4.323,5.404~g/ml.按2.1色谱条 件进样,测定峰面积,以对照品浓度c对峰面积A作回归计算, 对乙酰氨基酚回归方程:A=1.13X10C一0.75(,l=6),r= 0.9999:咖嘲}因:A=3.28×10.C+0.179(n=6),r=1.00130. 结果表明:对乙酰氨基酚在10.15—101.50m1,咖啡因在 0.540—5.404I-Lg/ml浓度范围内线性关系良好. 2.8重复性实验精密称取同一批号(20041208)6份,按供试品 溶液的配制方法制备并测定峰面积,结果为对乙酰氨基酚: (96.24?0.82)%(,l=6),RSD=0.89%;咖啡因:(93.81? 0.93)%(,l=6),RSD=0.94%.表明该方法重复性良好. 2.9加样回收率实验精密称取已知含量的同一批样品 (20041208)6份,分别为0.01422,0.01346,0.01325,0.01258, 0.01318,0.01224g,准确加入对照品贮备液分别为2.5,5.0, 10.0ml各两份,再按供试品溶液的制备方法制备并测定峰面积. 结果见表1. 表1对乙酰氨基酚,咖啡因加样回收率实验结果 2.10供试品洛液的稳定性实验取供试品溶液(批号: 20040231)室温避光保存,分别于0,2,4,6,24,26h按"样品测 定"项下规定方法测定峰面积.结果表明26h之内测定样品稳 定,对乙酰氨基酚RSD为0.78%(,l=6),咖啡因RSD为0.92% (n=6). 2.11样品测定按供试品溶液的制备方法制备并测定峰面积计 算.测定3批样品.结果见表2. 表2样品测定结果% 3讨论 原标准中测定对乙酰氨基酚所用的指示终点的方法是以外 指示剂法,滴定过程中要不时取滴定溶液少许以检查终点是否达 到.滴定溶液酸性较强,碘化钾在酸性溶液中遇空气中的氧亦会 缓缓被氧化成碘,致使终点不十分明显,没有的工作者难于 掌握;咖啡因含量采用氯仿提取后剩余碘量法滴定,氯仿毒性较 大.且挥发性强,步骤繁琐.本实验采用高效液相色谱法同时测 定对乙酰氨基酚和咖啡因的含量,方法简单,准确性较高,重现 性好. 参考文献: [1]国家药典委员会.国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准, 第lO册[S].2002,10:96. ? 1189?