西藏发现一类新的动物病原菌

西藏发现一类新的动物病原菌 A n ew k in d of pa thogen ic m icroorgan ism s iso la ted , f rom d isea sed ch icken ca ttle an d ra bb it in T ibe t 1 2 2 2 1 2, , , , J i C h u an y iZen g Q u n h u iC a Guo Zh u Guo yu H u an g J ifen gan d J i Sh u lin g 1 (, , ,210095; Co llege o f V e te r in a ry M ed ic in eN an jin g A g r ic U n ivN an jin g 2, D ep t o f A n im a l H u n sb an d ry an d V e te r in a ry M ed ic in e ), , , 860000T ib e t A g r icu ltu ra l Co llegeB ay iT ib e t 1995, 1996 年间, 作者在西藏林芝等地的血尿症病牛及高度致死性鸡病和兔病的自然病例中检 () 现和分离到一类特殊的细菌 图 1, 4, 经病因学、 微生物学、 病理学、 免疫血清学及防治等试验 该细菌为一类新的动物病原菌。三种动物来源的细菌虽然分别与不同的动物疾病相关, 不能交互致 体亦不能交互凝集, 但它们均具有相似的培养特性、 生理生化特性和独特多变的形态及染色特征。 分离培养均十分困难, 在添加有 营养液的复杂培养基上可缓慢生长。 在动物组织及尿样 1640 R PM I+ 料中均为 、 具抗酸染色性的微小球菌, 直径只有 012, 014 有时可见到特征性 “孢囊”, 成 , GΛm 囊内有大量微小球菌。 初代培养物亦见有大量微球菌及孢囊, 但在体外培养传代适应后, 在适宜的 - 多变成 杆菌或球杆菌, 条件下,形态和繁殖方式与普通细菌无异,并可在含 7%的高盐培养 GN aC l + - - + + 重现独特的 “抗酸微球菌?杆菌?长丝状体内排列有成串的 球体?大小不一球菌? GGGGG 巨型孢囊?孢囊成熟破裂释放微球菌”的周期性变化过程。 动物回归试验证实 3 种动物来源的细菌 应的动物均具有很强的感染性和致病性, 且都是“胞内菌”, 血清抗体不能有效抵御人工感染。敏感 + 素虽治疗有效, 但人工感染家兔在停药后仍会复发致死。细菌表型鉴定结果表明, 该类细菌属 不 G 1 无芽 胞 杆 菌 类 群, 尽 管 在 形 态、 染 色 的 周 期 性 变 化 及 生 理 生 化 特 性 方 面 与 该 类 群 的 节 杆 () 有些类似, 但其某些形态过程及阶段抗酸染色性又类似于该类群的诺卡氏菌属; 另外A r th ro b ac te r 显著的变态和特有的节孢子、 厚坦孢子及孢子囊孢子等繁殖方式的许多特性, 与所有已知的细菌科1 , 3 不相符。 查新检索报告认定, 该类细菌在国际上尚未见报道, 分类地位独特。 随着分子生物学技术的发展和应用, 生物系统分类研究已取得了重大进展, 经典的、 以表型为 分类系统已开始转向以基因序列为基础的系统发育分类体系。80 年代美国创立了 16 W o e se S rRN A () () 分 析 技 术, 发 现 了 古 生 菌 , 并 据 此 将 生 物 划 分 成 古 生 菌、 细 菌 和 真 核 A rch aea B ac te r ia 4, 5 () () 三个域 , 从而揭示了地球上所有生命的系统发育关系。根据的生 E u k a ryadom a in sW o e se 已知的细菌只是原核生物总进化图中的极小部分, 尚有大片空间有待发现和填补。 目前我们正对上 物病菌的 16序列进行测定和, 以期确定其在系统发育树上的遗传学分类地位。初步研究 S rRN A 表明, 高寒、 缺氧、 干燥或高渗、 抗体及动物体内环境条件, 均可引发细菌形态、 大小、 染色特性 殖方式的显著变化, 推测这种变态不仅与其独特的致病与免疫机理有关, 也是恶劣的高原环境条件 自然选择的结果, 是研究细胞发育分化的理想原核生物模型。 作为在西藏独特高原生态环境下所发 一类动物病原菌, 为便于交流, 我们将其暂命名为 “西藏孢囊菌”。 3 农业部九五牧业重点科研项目、 西藏自治区科委九五重点科研项目 收稿日期: 1999202207 ' 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 图 1 兔肝组织触片中的孢囊及微小球菌 ×7 000图 2 鸡“西藏孢囊菌”初代培养物中的孢囊及球菌 ×6 000 11C y st s and m ic ro co cc i o b se rved in th e live r F ig 12P ho to g rap h o f th e o r ig ina l ch ick en iso la te sm ea r o f d isea sed rabb it F ig show n a s cy st s and co cc i 图 3 体外培养连续传代适应的 “西藏孢囊菌”的形态变化×3 000图 4 牛菌培养物超薄切片, 示丝状体破 裂释放的厚垣孢子 ×30 000 左:在适宜的培养基上多为杆菌或球杆菌; 在含 7%的高盐培养基上, 培养后期出现的长丝体及孢囊N aC l 右: 214Sup e rth in sec t io n o f th e ca t t le F ig 13, F ig T h e o rgan ism s tu rned iso la teshow ing th e co cco id T h e m o rp ho lo gy o f th e adap ted cu ltu re L ef t: fo rm re lea sed f rom th e f ilam en2 to be ro d s in a p rop e r m ed ium ; R igh t: A lo t o f co ccco id fo rm s a r ranged in th e ()to u s e lem en t s ba r: 200 nm f ilam en to u s e lem en t s and cy st s m ay o ccu r a t a stage o f th e g row th cyc le in a 7% 1640 N aC l R PM I m ed ium 参 考 文 献 1 , , , . ′. 9. Jo h n G H o ltN o e l R K r ingP e te r H A Snea th e t a lB e rgeys M annua l o f D e te rm ina t ive B ac te r io lo gyth edB a lt i2 1993 m o re: W illiam s and W ilk in s, 2 111 斯克尔曼著 1 细菌属的鉴定指导 1 蔡妙英译 1 北京: 科学出版社, 1978 V B D 3 杨本升, 刘玉斌, 苟仕金, 廖延雄主编 1 动物微生物学 1 长春: 吉林科学技术出版社, 1995 4 1 1 , 269, 1987, 51: 221W o e se C R B ac te r ia l evo lu t io n M ic ro b io l R ev 5 W o e se C R , Kand le r O , W h ee lis M L 1 T ow a rd s a na tu ra l sy stem o f o rgan ism s: p ropo sa l fo r th e dom a in s A rch aea, B ac2 111990, 87: 4576, 4579, te r ia and E uk a ryaP ro c N a t l A cad Sc iU SA () 责任编辑 是雅蓓 ? 1994-2013 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved.