福尔马林-EDTA脱钙液
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福尔马林-EDTA脱钙液
简介:
脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。福尔马林-EDTA脱钙液主要由福尔马林、EDTA等组成,pH值约为7.2~7.4,相对于常规EDTA脱钙液,该试剂脱钙后对组织结构损害小,但脱钙速度更慢。
组成:
编号
DD0004 Storage 名称
福尔马林-EDTA脱钙液 500ml RT
使用说明书 1份
操作步骤(仅供参考):
1、 骨组织脱钙时,取材不易过厚。
2、 组织固定后,用PBS清洗。
3、 组织用蒸馏水洗清洗。
4、 组织转移至20~30倍体积的福尔马林-EDTA脱钙液脱钙。
5、 用蒸馏水冲洗数次。
6、 常规脱水、包埋。
注意事项:
1、 厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙即可。
2、 适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40?。
3、 脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
4、 骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
5、 每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
附录:
脱钙终点的测定(物理法):采用针刺、手掐、钳夹等方法,当骨组织变软或针刺时没有阻力感即可终止脱钙。物理检测法会对组织结构有一定的损害, 尽量避免用力过大或反复检测。