酒精局部注射大鼠肝种植性肿瘤与肺转移关系的实验研究

酒精局部注射大鼠肝种植性肿瘤与肺转移关系的实验研究 酒精局部注射大鼠肝种植性肿瘤与肺转移 关系的实验研究 277—2{}7 中华普通外科杂志1999年7月第l4卷第4期ChlDJGen职.Ju【Yl999,V0__l4.No4 酒精局部注射大鼠肝种植性肿瘤与 肺转移关系的实验研究 V 用群李开宗付由池姚养正窦科锋阎波岳树强刘鹏 礤?7 73—37 【摘要】目的探讨无水酒精局部注射肝肿瘤与肺转移的关系方法将47只大鼠分3组, 酒精瘤内注射组(16只),盐水瘤内注射组(15只)和对照组(16只).肝种植肿瘤后10天,经腹按分组 方法处理后?分钟,切除肝肿瘤及其边缘5111/13的肝组织,再饲养大鼠10天剖杀结果肝肿瘤标 本组织学观察:酒精瘤内注射组和盐水瘤内注射组瘤组织块侵破肝静脉或肿瘤血管分别为31%(5/ 16)和27%(4/15),明显高于无此现象的对照组.3组肿瘤血管或肝静脉瘤栓拉出率分别为75%(12/ 16),67%(10/15)和25%(4/16),酒精瘤内注射组和盐水瘤内注射组显着高于对照组.肝肿瘤切除10 灭后剖杀大鼠,3组肺转移结节数分别为30?14(16倒),33?19(15侧)和13?8(11例),酒精增内注射 组和盐水瘤内注射组明显高于对照组结论无水酒精瘤内注射可促进肿瘤细胞侵^血管和肺转 移,其原因与瘤内注射增加肿瘤内压力有关. 词】堡】0幸髓移. TIleeffect0fetlI町l0liIIje咖into.mIpl州hel~fie衄代in岫onthem曲stheh 卫.mZHOU p叽,血,}~udai,.『】ofGeneralSurgery,451Ho~/to/ofsm— tion^.Xi'n710054 【A岫】0bj删 veTodelenmi~etheeffectofethanolin~eetion0fimplante~lhe.tiecarcinoma0nthe metastasislIiI1mb.MetIl0d47mbwithimplat~edlivereare~weredededintothree: nhainjectiongoup(En=16),I~rmalsalineinjectiongroup(SIt=15),and.controls(CIt=16)da ys afterthelIepaineeulululatienofttm-mr,thee~-tionwaspeffom.,edUJIderlp帅 fnv,thentheI.ekIllR1OI~were Im州edAl】weIesacrifioed10daysaltertherelal~mtomyResTIpathologicalem血 Im0fhepatic tt~nor8|町wed:(a)ineialenee0f雠Io盯embolusintt~norvesselorhep日 c,,reinwassigr.ifieantllrhigh盯ingoupE and.Sthaninupc,75%inE(1~16),67%ins(10/15),and25%inc(4/16)(b)incidence0ftumor ti~ueinvadingtL邶 rvesselhenacveini13groupEandSwere31%and.27%re~eetively,itwasnotfundiIt upc;Thegr憎sspecimen0flungsintendaafte~m0showed:incidence0flungsrrI咖Las图 and. nlln~roflungsmefosticnodulesin蕊村ratsw?signifieentlyincreasedingroupEandS,c叫 ? thefinding~iI1肿呻ClI南nEthanolinjectionittm-mrerdaalicelungmelast~sischmi出 berelat- edwit}Ittm-mrinter~tilialpre褐u糟de珊edfmmi~tloriIIjeefion. 【Keywolds】LiverneoplasmsNe0plasmmelastasis 近十年来,超声引导经皮穿刺酒精局部注射已 广泛应用于肝癌的治疗…,但其治疗可能发生的副 效应尚缺乏详细的观察和研究[.本实验选用大鼠 肝种植性肿瘤模型,研究酒精局部注射治疗是否促 进肺转移,及其可能存在的病理机制. 一 ,实验方法 材料和方法 作者单位:7[0054西安.中国人民解放军第四五一医院肝胆外科 (周群);第四军医大学西京医院肝胆外科(李开宗,付由弛,窦科峰 同波,岳树强,刘鹏);陕西师范大学生物系(姚养正) ? 279- 论着 选用中国近交系大鼠47只,体重180,350g,雌 雄不限.无菌开腹后,肝左外叶包膜下种植SMCR- 86瘤块,肝种植肿瘤成功率100%.宿主大鼠和瘤 块均由陕西师范大学生物系提供. 随机将肝荷瘤大鼠分为3组,酒精瘤内注射组 16只,以0.3无水酒精瘤内注射;盐水瘤内注射 组l5只,以0.3ml生理盐水瘤内注射;对照组16 只,空白对照.肝种植肿瘤后10天,各组大鼠无菌 开腹,测肝肿瘤长短径,按分组要求处理肝肿瘤后20 分钟,将肿瘤及其边缘5Fllnl内的肝组织切除,制各 病理切片,肝创面止血L3后关腹.再饲养l0天剖杀 280中华普通外科杂志1999年7月第14卷第4期GltinJG叫&驱,Jdv1999. 埘14.1/o.4 各组大鼠,观察大鼠肝和肺表面转移瘤结节数. 二,组织学检查方法 切除肝肿瘤标本固定,沿其横轴等距切成4块, 均制作病理切片.光镜下观察瘤组织块侵破肿瘤血 管或肝静脉;肿瘤血管或肝静脉和门静脉瘤栓;肿瘤 组织内出血.对上述观察指标记数. 三,免疫组织化学染色 每份肿瘤标本均作5ban厚切片4张,采用抗生 物素.生物素.过氧化物酶法(ABE法)染P2(ra8癌 基因产物P21),染色结果参照张立新等L4半定量综 合记分法,对照染色采用磷酸缓冲生理盐水(ws)替 代一抗进行同步染色,结果均为阴性. 四,统计学处理 将上述观察指标量化,率的比较采用检验, 均数的比较采用方差分析,两两比较统计学处理, P<0.05认为有统计学意义. 结果 肝种植肿瘤后1O天,3组肝肿瘤直径分别为 9.8?1.7,10.1?1.6和9.9?1.5n1lIl,各组比较无显 着差异.肝肿瘤切除标本组织学观察,酒精瘤内注 射组和盐水瘤内注射组瘤组织侵破肿瘤血管或肝静 脉检出率分别为3l%(5/16)和27%(4/15),明显高 于无此现象的对照组;3组肿瘤血管或肝静脉瘤栓 检出率分别为75%(12/16),67%(10/15)和25%(4/ 16),酒精瘤内注射组和盐水瘤内注射组明显高于对 照组;3组门静脉瘤栓检出率分别为25%(4/16), 33%(5/15)和13%(2/16),各组比较无显着差异;酒 精瘤内注射组和盐水瘤内注射组肿瘤组织内均有出 血,其检出率也明显高于对照组13%(2/16).各组 肿瘤组织P2反应强度见表1,酒精瘤内注射组和 盐水瘤内注射组瘤栓与其周围肿瘤组织100个瘤细 胞P2阳性百分比分别为0.72?0.13和0.71? 0.17,比较无显着差异,对照组瘤栓检出率低,未做 统计. 表1各组肝肿瘤组织融反应强度 注:E组为酒精瘤内注射组,S组为盐水宿内注射组,C组为对照组 肝肿瘤切除后10天剖杀大鼠,酒精瘤内注射组 和盐水瘤内注射组大鼠均有肿瘤肺转移,其发生率 明显高于对照组69%(11/16);在发生肺转移的大鼠 中,3组肺转移结节数分别为30?14(16例),33?18 (15例)和13?8(11例),酒精瘤内注射组和盐水瘤 内注射组肺转移结节数明显高于对照组,3组大鼠 肝转移率分别为13%(2/16),27%(4/15)和6%(1/ 16),各组比较无显着差异. 讨论 本组实验采用肿瘤局部注射和切除一次完成的 方法.切除肝肿瘤标本组织学检查可明显发现,局 部注射增加肿瘤压力,促进相关的瘤细胞释放侵入 血管.其病理形态特点:(1)瘤组织块侵破肿瘤血管 或肝静脉,酒精和盐水瘤内注射组此现象检出率分 别为31%和27%,明显高于无此现象的对照组,更 有特征的现象是瘤组织块侵破壁薄的肿瘤血管或肝 静脉时,其周围组织很少出血(图1),若侵破壁厚的 血管壁时,其周围组织可见广泛出血(图2).分析 原因可能是肿瘤局部注射的高压力将血管周围的瘤 组织块直接挤入血管,若血管腔内压力低,周围组织 很少出血或无出血,若血管腔内压力高,随局部注射 后压力下降,侵破的血管引起继发性出血.(2)酒精 和盐水瘤内注射组中,肿瘤组织内出血检出率均明 显高于对照组.(3)酒精和盐水瘤内注射组中,肿瘤 血管和肝静脉瘤栓(图3,4)检出率也明显高于对照 组.(4)酒精和盐水瘤内注射组中,肿瘤血管和肝静 脉瘤栓检出27处,与瘤栓和其周围瘤组织转移相关 基因产物P2L5阳性细胞检出率比较无明显差异, 提示此现象可能与瘤细胞被动侵入血管有关. 本组实验门静脉瘤栓检出率和肝转移率较低, 各组比较无显着差异,未发现局部注射促进肝内转 移的现象. 本组实验切除肝肿瘤标本组织学检查发现,酒 精和盐水瘤内注射组肿瘤血管或肝静脉瘤栓检出率 高于对照组,肝肿瘤切除后1O天,此两组大鼠肺转 移率和肺转移结节数均高于对照组.结果提示,肿 瘤局部注射促进瘤细胞侵入血管与增加肺转移,肿 瘤局部注射强加于肿瘤的压力为瘤细胞侵入血管提 供了动力,迫使瘤细胞沿压力梯度扩散侵入血管,也 可将血管周围的瘤组织块直接挤入血管;此压力也 为肿瘤转移提供了条件. 无水酒精可使组织脱水和蛋白质凝固,坏死. 本实验选用0.3nd无水酒精有效杀伤剂量6进行实 验研究.结果显示,瘤内酒精注射促进肺转移,可能 中华普通外科杂志1999年7月第14卷第4期ChlnJC-en瑕,J山1999, ?.14,No.4?281 圈l局部注射组瘤组织慢破肝静脉(HE×4?)圈2局部注射组瘤组织侵破血管(HE ×leo)圈3局部注射组肝静脉 瘤桂(HEx400)田4局部注射组肿瘤血管瘤桂(HE×400) 的原因是局部注射的酒精弥散速度低于注射压力传 导的速度.以致酒精不能杀伤因注射压力而侵人血 管进人循环的瘤栓.另外,本实验采用酒精注射后 20rain切除肝肿瘤制备组织切片,因肿瘤组织坏死 时问短和酒精固定组织的作用,本实验未能观察到 注射酒精引起的肿瘤组织大片坏死的病理形态. 实验结果表明:无水酒精和盐水瘤内注射可促 进肿瘤细胞侵人血管和肺转移,其原因与瘤内注射 增加肿瘤内压力有关.鉴于动物实验研究的结果, 我们主张小肝癌首选手术切除,大肝癌应以肿瘤血 管阻断等方法综合治疗,以预防和治疗转移. 参考文慧 1蹦_衄S,Tagaw~K,UnumaT,eta1.P~tmeous,ahandoaion d叫forthetreamamtofhepatoeellularcarcinoma./OP,.1990,154: 947-951. 2Ravc~tCH衄.】tlXmmwmt0f'-l曲-.1-|皿JOnco1. 1993,3:104-III 3周群,李开宗,付由池.等.氰基丙烯酯医用胶耐大鼠肝切除断 面粘固止血的实验研究.第四军医大学.1996,11:466. 4张立新.史景泉,左声鹤.等.Ihs癌基因产物与肿瘤癌胚蛋白 AFP,CEA在^肝癌的对比研究.中华病理学杂志.1994.23: 155-1豫. 5NiodsmGL.Tmmr?Uir=,tabL!itydiversificationandpIDEmthe cpba咿e:h0m0ll目?etoooncofetalm?C.ano~ . 1987.47:1473. 6Ain.IF.CmilalC,Bertr~S,etalImmlhepD脯?u'masplant~d 口llde:arelavant圈姐_咖ll矗lmoddtoassessttma~出呲 al~uholizati.mJ,1994,57:M6-372 (收稿:1998-04-27修回:1998-11-2.3) (本文编辑:李燕华)