livin基因在口腔粘膜白斑与口腔癌中的表达

livin基因在口腔粘膜白斑与口腔癌中的表达 Livin基因在口腔粘膜白斑与口腔癌中的 表达 【摘要】  目的:探讨Livin基因基因在口腔粘膜白斑、口腔癌的表达相关性。方法:应用免疫组化(S-P)法检测Livin基因在48例口腔粘膜白斑(轻度增生l2例～中度增生l8例～重度增生l8例)、口腔癌32例中的表达。结果:在口腔粘膜白斑轻、中度不典型增生组织中Livin基因呈弱表达(1,12～ 3,18),在口腔粘膜白斑重度不典型增生中表达率明显增高(13,18～72(2,)～口腔癌中Livin基因表达率很高(29,32～90.6,)～口腔粘膜白斑的轻、中度不典型增生与重度不典型增生的表达比较有显著的意义(P<0.05)～但与癌的表达无显著意义(P>0.05)。结论:Livin基因的表达与增生的程度有关～Livin基因的表达可能与口腔癌的发生有关。 【关键词】  口腔粘膜白斑 凋亡抑制蛋白(IAP)是一类含众多成员的凋亡抑制蛋白家族～在抑制凋亡和促进肿瘤细胞增生中起着重要的作用。Livin是新发现的IAP家族成员之一～主要是通过和Caspase蛋白结合抑制其级联激活反应而发挥抗凋亡作用。已有研究表明Livin在多种肿瘤组织呈阳性表达～在肿瘤组 织的增殖和凋亡过程中发挥重要作用,1,。由于Livin在一些肿瘤组织中呈特异表达～故而进一步研究它与肿瘤病理类型、分化程度以及化疗后对其表达的影响的关系～以此为临床的有效诊治提供依据。我们采用免疫组化方法～检测口腔粘膜白斑不典型增生的Livin基因蛋白的表达情况～并与口腔癌的表达情况进行对比～探讨Livin基因与白斑不典型增生恶性转化关系。 1  和方法 1.1  材料来源:90例口腔组织蜡块取自我院及广东医学院附属医院病理科～为2000年至2006年手术切除或活检标本～其中口腔粘膜白斑48例～口腔癌32例～所有组织均经4,甲醛固定～常规石蜡包埋。 1.2  组织学分类:依据《诊断病理学》刘彤华主编推荐标准将口腔粘膜白斑分为轻、中、重三类～其中轻度不典型增生12例～中度不典型增生18例～重度不典型增生18例～口腔癌32例。其中唇癌12例～舌癌13例～口底癌7例。 1.3  方  法 1.3.1  免疫组织化学方法:采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化酶连接(SP)免疫组织化学方法～抗Livin单克隆抗体及SP试剂盒～均为福州迈新生物技术开发公司产品。实验步骤按试剂盒说明书进行～用PBS代替一抗作为阴性对照。 1.3.2  结果判定:在组织切片中显示胞核或胞浆染为淡黄至黄棕色者为阳性细胞标志～将阳性细胞按其数量及显色强度分为3级:表达弱阳性(+)～即阳性细胞数<10,～显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈黄至棕黄色染色,表达强阳性(+++)～即阳性细胞数>60,～多数细胞呈黄至棕黄色染色,表达中度阳性(++)～即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性与强阳性之间。凡显色强度与背景无明显差别者为阴性。 1.4  统计学方法:采用X2检验。 2  结  果      Livin基因蛋白在口腔粘膜白斑与口腔癌中的表达～ 见表1。 表1  口腔粘膜白斑不同类型与口腔癌组织中Livin基因蛋白表达 略 3  讨  论      凋亡抑制蛋白是一类内源性细胞凋亡抑制因子～在很多物种中起着抑制凋亡的作用～其过度的表达引起细胞凋亡不足与肿瘤的发生发展密切相关。Livin作为人类IAP家族的新成员～有明显的抗细胞凋亡作用～它主要通过与介导细胞凋亡的下游效应分子Caspase～即激活形式的Caspase3和Caspase7结合～并抑制其活性而发挥作用的。Livin与Caspase结合有高度的亲和性和特异性～这依赖于BIR(N端86—154)结构域的完整。BIR是一种新型的锌指结构～而Livin中BIR结构是抗凋亡活性所必需。如BIR结构域单个氨基酸发生突变可导致Livin与Caspase亲和力下降～使Livin的抗凋亡能力明显减低甚至消失,2～3,。Livin是近几年新发现的一类内源性细胞凋亡抑制因子～它含IAP家族特有的BIR和RING(C端环指结构)结构域。Livin在正常组织一般不表达或表达很低～但其在一些肿瘤系中却高表达～ 如黑色素瘤、胃肠癌、膀胱癌、乳腺癌、白血病及淋巴瘤等,3,。      我们用免疫组织化学方法～对80例口腔粘膜上皮恶性不同转化不同阶段的石蜡包埋标本Livin基因蛋白表达的检测。结果发现口腔粘膜白斑在轻、中度不典型增生组织中Livin基因蛋白表达率很低～口腔粘膜白斑重度不典型增生～Livin基因蛋白表达率明显上升～与口腔癌的Livin基因蛋白表达率相比无显著的差异～说明Livin基因蛋白表达在一定程度上与细胞的恶性倾向有关。可以推测重度不典型增生的口腔黏膜白斑内的Livin基因蛋白的表达～它们具有一定恶变的潜能。临床上对重度不典型增生的口腔黏膜白斑应高度重视～密切观察临床经过。   【参考文献】   ,1, KASOF GM～COMES BC(Livin～a novel inhibitor of apoptosis protein family member,J,( Biol Chem～2001～276:3238-3246( ,2, 张华东～袁守军～陈惠鹏(Livin一癌症治疗 的新靶点,J,(中国药理学通报～2003～19(8):845-847( ,3, D Vucic, HR Stennicke, MT Pisabarro,et al.ML-IAP, a novel inhibitor of apoptosis that is preferentially expressed in human melanomas,J,. Curr Biol, 2000～10(21): 1359-1366. ——,,