人根尖乳头干细胞和牙髓干细胞生物行为的比较研究

人根尖乳头干细胞和牙髓干细胞生物行为的比较研究 ???分类号密级单位代码学号◎厶茹办硕士学位 论文题目一人根尖姒孑勾坳为一垃砌行为酌比镀衍克和甲锄锣蹦租盹加咖厶抛甲妣必一讫甲剐御占纵“础绅觚她作者豸函专业望窿煌塞盈匿导师扬丕』盘缝合作导师圣量到盔煎伽『年多月日??原创性本人郑重声明所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体已经发或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名墨函期望坦二苎二叫关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版允许论文被查阅和借阅本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定论文作者签名墨丘自导师签名?结 论……………………………………………………………………………讨论………………………………附图……………………………………………………………………………参考文献………………………………………………………………………‘致谢……………………………………………………………………………攻读学位期间发表的文 章 ……???山东大学硕士学位论文人根尖乳头干细胞和牙髓干细胞生物行为的比较研究研究生马丽专业口腔内科学导师杨丕山教授王燕副教授摘要目的 等发现牙髓组织中存在干细胞 。该细胞具有强增殖性、多向分化的潜能在体外诱导可向成牙本质样细胞分化。同时将植入免疫缺陷鼠体内发现有牙本质样基质形成最近等研究发现在根尖乳头组织中存在干细胞命名为根尖乳头干细胞 并证明这类细胞是与牙髓干细胞不同类型的细胞。本实验目的是体外培养人根尖乳头细胞经地塞米松矿化诱导诱导矿化结节的形成及和其他相关蛋白的表达同时将肿瘤坏死因子对其进行干预观察其对矿化过程及牙本质样细胞形成的影响探讨炎症条件下根尖乳头细胞用于牙本质再生的可行性。同时与同一牙的牙髓细胞进行比较研究。取岁以下根尖未发育完成的健康阻生第三磨牙用型胶原酶和消化法进行根尖乳头细胞和牙髓细胞的培养细胞达到汇合后进行传代取第一代细胞用于实验。取第代细胞将根尖乳头细胞、牙髓细胞以个的细胞悬液分别接种于预先放置有细胞爬片的孔板中用免疫荧光方法鉴定细胞的间充质干细胞表面标记物的表达。将根 尖乳头细胞、牙髓细胞分别以个接种于孔板中孵育后采用法检测细胞的增值状况。将根尖乳头细胞、牙髓细胞分别以个肺接种于孔板中细???山东大学硕士学位论文胞大部分伸展贴壁后加入矿化诱导液孵育后茜素红染色法检测矿化结节形成情况免疫组化法检测牙本质特异性蛋白、矿化相关蛋白 表达情况。将根尖乳头细胞、牙髓细胞分别以个接种于孔板中后将含有?煌泉铼楠帷臁??绲呐嘌杭尤敕跤螵瑾铼锓觳馄涠细胞增殖活性的影响。将根尖乳头细胞、牙髓细胞分别以×个接种于孔板中细胞大部分伸展贴壁后加入含有的矿化诱导液孵育后茜素红染色法检测矿化结节形成情况免疫组化法检测牙本质特异性蛋白、矿化相关蛋白表达情况。结果原代培养的根尖乳头细胞呈梭形、多角形或纺锤形形似成纤维细胞。牙髓细胞也似成纤维细胞形状与根尖乳头细胞相似。免疫荧光技术表明部分细胞染色阳性。法结果表明较之具有更强的增值活性。矿化液体外诱导根尖乳头细胞和牙髓细胞叠层生长形成肉眼可见的结节茜素红染色有橘红色矿化结节形成免疫组织化学染色技术显示细胞诱导后牙本质特异性蛋白、矿化相关蛋白阳性表达。在和两个浓度时耵盯一对根尖乳头细胞、牙髓细胞两种细胞的增值均具有促进作用。用含有的矿化液诱导根尖乳头细胞和牙髓细胞在较早的时间便有肉眼可见的结节形成。茜素红染色显示有橘红色矿化结节形成免疫组织化学染色技术显示细胞在炎性因子的诱导后、 阳性表达。结论体外培养的根尖乳头细胞形似成纤维细胞表达阳性人根尖?????山东大学硕士学位论文 、析?曲 — 山东大学硕士学位论文 骼? か?,か矮,, ?,か?蔼,传,か?か氮矮,か?颡蹭か氮か?愍蝎,か矮í瞠氇?瞠氆勃唱か?传かǐǐ矮?，か,?か传か?勃 か?勃?か?かお? ?か? 联í绔,か?蔼,，矮矮か??か?—铼楠岖?绔勃 か?,矮?齺 、 晰廿 — 、 山东大学硕士学位论文 、 盯吨 吨 皿 而 而 山 东大学硕士学位论文缩略语陂 符号说明英文解释 伽 一一 中文解释根尖乳头干细胞牙髓干细胞人牙周韧带细胞根尖乳头细胞牙髓细胞‘胎牛血清一种细胞培养液磷酸盐缓冲溶液甲基噻唑二苯基四嘘溴盐肿瘤坏死因子牙本质涎蛋白骨涎蛋白每分钟转数小时分钟???山东大学硕士学位论文人根尖乳头干细胞和牙髓干细胞生物行为的比较研究研究生马丽专业口腔内科学导师杨丕山教授王燕副教授?上一—?一刖罱虽已萌出但未达到牙合平面在形态、结构上尚未成熟的恒牙称为年轻恒牙。恒牙一般在牙根形成左右时开始萌出萌出后牙根继续发育于萌出年内完全形成【。在临床工作中遇到意外露髓的年轻恒牙要根据情况采取直接盖髓术或者活髓切断术的治疗方法保存生活牙髓使年轻恒牙的牙根继续发育成熟。在牙髓组织中存在未分化的间充质细胞可向受损部位移行并极化分化为成牙本质样细胞在受损伤处相对的髓腔壁上合成修复性牙本质以保护牙髓。等【于年提出牙髓干细胞 的概念认为牙髓组织中存在具有干细胞性质的未分化细胞该细胞有多向分化潜能可分化为功能性的成牙本质细胞形成牙本质。然而经临床研究发现根尖未发育完成的年轻恒牙发生牙髓坏死以及由此引起的根尖周炎经根尖诱导成形术.