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芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的影响

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芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的影响芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的影响 [摘要] 目的:观察芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症及对机体非特异性抵 抗能力的影响。方法:利用环磷酰胺建立小鼠白细胞减少症模型,通过检测白细胞、红细胞、 血小板计数、胸腺指数和脾脏指数,探讨芪归升白胶囊对环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少症的 影响;采用耐低氧实验与负重游泳实验观察芪归升白胶囊对机体非特异性抵抗能力的影响。结 果:芪归升白胶囊可明显升高模型小鼠的白细胞、红细胞、血小板计数、胸腺指数、脾脏指数, 差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),能明显延长...
芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的影响
芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制及免疫抑制的影响 [摘要] 目的:观察芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症及对机体非特异性抵 抗能力的影响。方法:利用环磷酰胺建立小鼠白细胞减少症模型,通过检测白细胞、红细胞、 血小板计数、胸腺指数和脾脏指数,探讨芪归升白胶囊对环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少症的 影响;采用耐低氧实验与负重游泳实验观察芪归升白胶囊对机体非特异性抵抗能力的影响。结 果:芪归升白胶囊可明显升高模型小鼠的白细胞、红细胞、血小板计数、胸腺指数、脾脏指数, 差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),能明显延长小鼠耐低氧、游泳时间,差异有统计学意义 (P<0.05或P<0.01)。结论:芪归升白胶囊对环磷酰胺所致小鼠造血功能低下有显著的促进恢 复作用,并能增强机体非特异性抵抗能力。 [关键词] 芪归升白胶囊;骨髓抑制;免疫抑制 [中图分类号] R-332[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)04(c)-019-03 The effect of Qigui Shengbai Capsules on leukocytopenia induced by Cyclophosphamide and the nonspecific resistance in mice CAI Guangxian1, XIE Zhaohui2, CAI Ping1, WANG Yuhong3, LIAO Liangying3, TANG Ying3 (1.Hu'nan Academy of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410006, China; 2.Department of Pharmacy, the First Affiliated Hospital of Hu'nan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, China; 3.Pharmacology (Cardiovascular) Laboratory, the First Affiliated Hospital of Hu'nan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, China) [Abstract] Objective: To study the effect of Qigui Shengbai Capsules on leukocytopenia induced by Cyclophosphamide and the nonspecific resistance in mice. Methods: The leukocytopenia model in mice was induced by Cyclophosphamide intraperitioneal injection and adopted to observe the effects of Qigui Shengbai Capsules on leukocytopenia induced by Cyclophosphamide, white blood cell count, red blood cell count, hemoglobin, the platelet count, thymus index and spleen index were detected; mouse hypoxia tolerance in normal pressure influence and loaded swimming time were adopted to observe the effects of Qigui Shengbai Capsules on the nonspecific resistance in mice. Results: Qigui Shengbai Capsules significantly increased white blood cell count, red blood cell count, the platelet count, thymus index and spleen index (P<0.05 or P<0.01), and mouse hypoxia tolerance in normal pressure influence and loaded swimming time were significantly prolonged (P<0.05 or P<0.01). Conclusion: Qigui Shengbai Capsules plays a significant role in promoting the recovery of Cyclophosphamide-induced hematopoietic function in mice, and can improve the nonspecific resistance of body. [Key words] Qigui Shengbai Capsules; Bone marrow suppression; Immunodepression 白细胞减少症系指外周血液中白细胞总数持续低于4.0×109/L者,是目前临床内科常见 的一种病症,是由多种原因引起的一组综合征,根据其发病原因可分为原发性和继发性两种, 而继发于肿瘤放疗、化疗后的白细胞减少症尤为常见[1]。升白方由西洋参、黄芪、麦冬、制 首乌、鸡血藤、阿胶等组成,具有益气滋阴、养血填髓之功,用于放、化疗后白细胞低下、头昏、倦怠、口干等,证属肝肾不足、气阴两亏者,临床应用多年,疗效确切,无毒副作用,深受患者欢迎。环磷酰胺是临床常用的化疗药,但其在杀伤癌细胞的同时,也对人体产生不同程度的毒副作用,其中主要是骨髓抑制和免疫功能低下,造成白细胞减少症。本实验采用环磷酰胺诱导的小鼠骨髓造血功能及免疫功能抑制模型为实验动物,观察芪归升白胶囊对化疗引起的骨髓抑制及免疫抑制的影响,为其临床应用提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 药物与试剂芪归升白胶囊(本实验室自制),规格0.42 g/粒,批号080104,临床推荐成人日用量为38.52 g生药。利可君片(江苏吉贝尔药业有限公司生产,20 mg/片,国药准字H32025444,批号040202,临床成人用量为60 mg/d)。西洋参粉(湖南中医药大学第一附属医院提供,成人用量6 g/d)。环磷酰胺注射液(江苏恒瑞医药股份有限公司提供,国药准字H32020857,规格200 mg/瓶,批号08103021)。钠石灰(上海陆都化学试剂厂提供,规格500 g/瓶,批号20080906)。 1.1.2 实验动物与仪器ICR小鼠160只,雌雄各半,SPF级,体重18,22 g,由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,许可证号为SCXK(沪)2008-0002,合格证号0089728。鼠用全价颗粒饲料由中南大学湘雅动物部提供。实验动物环境设施合格证号SYXK(湘)2008-0001。雅培血细胞分析仪(美国雅培-1700);电子天平AY-120(日本岛津)。 1.2 方法 1.2.1 芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的影响[2-3]将ICR小鼠按体重随机分为6组,每组10只。具体如下:?正常对照组(A组);?CTX模型组(B组);?利可君片组(C组);?芪归升白胶囊高剂量组(D组);?芪归升白胶囊中剂量组(E组);?芪归升白胶囊低剂量组(F组)。腹腔注射环磷酰胺(CTX)100 mg/kg,1次/d,连续3 d。于造模前预防给药3 d,第4,6天造模。从造模当日起继续给药10 d。正常组和CTX模型组给予同容积蒸馏水,利可君片组7.8 mg/kg,芪归升白胶囊高、中、低剂量组分别灌胃10.0、5.0、2.5 g(生药)/kg,为成人用等效量的2.0、1.0、0.5倍。各组每天灌胃1次,每次20 ml/kg。分别在造模后7、10 d末次给药1 h,眶静脉丛采血,检测外周血白细胞总数,并于造模后10 d以颈椎脱位法处死小鼠,取胸腺、脾脏称重,计算其脏器指数。 1.2.2 芪归升白胶囊对小鼠游泳时间的影响(抗游泳疲劳实验)[4]取健康小鼠50只,体重18,22 g,雌雄各半,随机分为5组,分别为正常对照组,芪归升白胶囊高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 g/kg),西洋参粉组(0.8 g/kg),灌胃体积20 ml/kg,对照组灌以同等剂量的蒸馏水,每天灌胃1次,连续用药10 d,末次给药后1 h,每只小鼠尾根部负相当于体重10%的铅丝,置水中游泳,观察小鼠游泳至力竭(在水下10 s不能上浮),该时间为小鼠的游泳时间(min)。 1.2.3 芪归升白胶囊对小鼠耐常压低氧存活时间的影响[4]取小鼠50只,体重18,22 g,雌雄各半,随机分为5组,分别为正常对照组、芪归升白胶囊高、中、低剂量组(10.0、5.0、2.5 g/kg,)西洋参组(0.8 g/kg),灌胃体积20 ml/kg,对照组灌以同等剂量的蒸馏水,每天灌胃1次,连续用药10 d,末次给药后1 h,将小鼠单个放入盛有15 g钠石灰的250 ml广口瓶内,用凡士林将瓶口密封,观察并记录小鼠低氧死亡时间。 1.3 统计学分析 数据以均数?标准差(x?s)表示,采用SPSS 14.0软件进行统计学分析。多组间比较采用方差分析,组间比较采用独立样本t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。 2 结果 2.1 芪归升白胶囊对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的影响 2.1.1 芪归升白胶囊对外周血白细胞总数(WBC)的影响与正常对照组比较,CTX模型组WBC、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)均明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01),提示造模成功。与CTX模型组比较,利可君片组与芪归升白胶囊高、中剂量组WBC明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);芪归升白胶囊中剂量组第10天时RBC、Hb和PLT也明显上升,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而利可君片组RBC、Hb和PLT变化不显著,这是因为G-CSF的作用主要是促进骨髓粒系造血祖细胞的增殖及分化。结果见表1。 2.1.2 芪归升白胶囊对胸腺、脾脏的影响小鼠腹腔注射环磷酰胺后,其胸腺、脾脏明显萎缩,芪归升白胶囊胸腺指数及脾脏指数明显提高。与CTX模型组比较,芪归升白胶囊高、中剂量组的胸腺及脾脏指数差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结果见表2。 2.2 芪归升白胶囊对小鼠游泳时间的影响 与正常对照组比较,芪归升白胶囊高、中剂量组小鼠游泳时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结果见表3。 2.3 芪归升白胶囊对小鼠耐常压低氧存活时间的影响 与正常对照组比较,芪归升白胶囊高、中剂量组小鼠耐低氧时间明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结果见表4。 3 讨论 中国每年癌症新发病例为220万例,因癌症死亡人数为160万例。近20年来,中国癌症死亡率上升了近30%,癌症死亡人数占疾病死亡人数的1/5,发病率逐年上升并呈年轻化趋势[5]。目前在癌症的治疗中,约有1/5的患者接受手术治疗,1/3的患者接受放疗或化疗,有接近1/2的癌症患者选择中医治疗。放疗及化疗是治疗恶性肿瘤常用的有效手段,但其对骨髓抑制均较严重,易引起白细胞减少等副作用,白细胞减少会使人体的免疫能力下降而容易出现感染,严重缺乏时,会引起严重感染导致死亡。癌症患者常常由于放疗、化疗后导致白细胞严重减少而无法完成整个治疗周期而失去生存的机会。西药利血生、沙肝醇、维生素B4等常用升高白细胞药物疗效均不显著,而促粒细胞生成因子则因价格昂贵,且有一定的副作用,故无法广泛、长期使用[6]。因此,寻找一种廉价而副作用小的升高白细胞的中药具有十分重要的意义。 芪归升白胶囊是以中医药理论为指导的中药复方制剂,现代药理研究证明方中当归能拮抗外周血白细胞减少,抗肿瘤抗辐射,对造血干细胞的损伤有保护作用,黄芪气阴双补具有增强免疫功能、延长细胞存活和抗病毒活性;制首乌能增加正常白细胞总数,促进血细胞的新生和发育;鸡血藤可保护人体造血系统,改善骨髓微循环,具有显著升高白细胞的作用;阿胶能使白细胞升高,诸药合用可提高整个机体的免疫力,改善症状,使白细胞达到正常水平。本实验结果表明,芪归升白胶囊可升高环磷酰胺致白细胞减少症模型小鼠的WBC、RBC、PLT,增加受损免疫器官胸腺及脾脏的重量,能明显延长小鼠的耐低氧时间和游泳时间,这些结果与临床疗效一致,为临床推广应用提供了一定的实验依据。 [参考文献] [1]沈云辉,陈长勋,徐振晔.双黄升白颗粒剂对白细胞减少症模型小鼠造血细胞作用的研究[J].中国中药杂志,2006,31(9):754-758. [2]李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科技出版社,2006:703-704. [3]杨东旭,储妍,任宏雪,等.升白方对环磷酰胺致小鼠白细胞减少症的影响[J].中药药理与临床,2007,23(5):195-196. [4]陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,2006:788-789. [5]中国健康编辑部.癌症治疗呼唤规范[J].中国健康,2007,(4):17-18. [6]韩旭.中医药治疗放化疗后白细胞减少症研究进展[J].国医论坛,2008,23(2):50-53. (收稿日期:2010-02-08)
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