血红蛋白测定SOP（手工法）

血红蛋白测定SOP（手工法） 文件编号: xxxx医院 XXXX 临床检验实验室 版序:xxxx 页码:第1 页，共2 页 血红蛋白测定[ Hgb ] [测定原理] 血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与氰离子(cn-)结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白(hemiglobim cyanide,简写HiCN) 。氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰，可用校准确的高精度分光光度计进行直接定量测定，或用HiCN参考液进行比色法测定。 [试剂及仪器] 1，试剂: HiCN试剂的配法: 氰化钾 50mg 高铁氰化钾 200mg 无水磷酸二氢钾 140mg Triton X-100 1.0ml 蒸馏水 加至1000ml 纠正pH至 7.0-7.4 此液为淡黄色透明溶液,用蒸馏水调零,比色杯光径1.000cm，波长540nm处的吸光度应为零。贮存在棕色有塞玻璃瓶中，放4?C冰箱保存.一般可用数月。 2，仪器: (1) 一次性微量吸管。 (2) 721型分光光度计。 [品] 人标准血红蛋白液(卫生部临床检验中心) [质控品] COULTER ACT 4C PLUS全血质控品。(血液细胞自动化分析仪介绍) [标本采集] 未梢血或静脉血用EDTA-K2 抗凝。 凝集，血量小于0.4 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本，拒收。 [操作步骤] ?取充分混匀的全血20ul，标准品分别加到5mlHiCN试剂中，充分混和，静 置5min。 ?分光光度计 (常规测定时带宽应小于6 nm)，波长540nm处，光径 (比色杯 内径) 1.0 cm，以HiCN试剂或蒸馏水调零，测定吸光度(A)。 文件编号:XXXX xxxx医院 临床检验实验室 版序:xxxx 页码:第2 页，共2 页 血红蛋白测定[ Hgb ] [计算结果] 1，血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×64458×251/44000 =测定管吸光度×367.7 2，血红蛋白(g/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×标准浓度(g/L) [质量控制] 1(每天检测工作前后，清洁仪器面，确保仪正常进行。 2(每天利用三水平质控品与标本同步进行室内质控一次，及时查找失控原因 并纠正。 3(在工作中，当发现标本某些检测结果项出现倾向性结果时，必须重新进行 一次室内质控制，找出和排除原因。 4(抽查微量吸管质量，确保采样准确。 5(定期更新标准品，检测标准品质量。 6(操作人员必须经过培训，能熟练掌握各操作步骤。 [参考范围] 男:120-160g/L 女:110-150g/L [临床意义] 血红蛋白浓度测定(HGB)临床意义与红细胞的基本相同，一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系，但在部份贫血患者，二者数值的比值与正常人的比值有一定的差异，这些差异对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。