用啤酒废酵母研制富铬酵母

用啤酒废酵母研制富铬酵母 学位授予单位代码:,,,,， 研究生学号:,,,,,,,,,,,, 山尊经互业学陀 硕士学位论文 用啤酒废酵母研制富铬酵母,,,,,,,,，,, ,, ,,,,,，,,—,，,, ,,,,, ,,,, ,,,,, ,,,,,,’, ,,,,, 院(系)别:食品和生物工程学院 专 业:发酵工程 研究生:潘?指导教师:王秀道 教授 二,,二年十一月 山东轻工业学院硕士学位论文 摘要 富铬酵母是纯天然生物制品，安全性高，吸收效果好，是目前较理想的一种生物补铬制剂。论文阐述了将高浓度的啤酒废酵母于含铬麦汁中培养，利用酵母细胞自身的生物转化能力将无机铬吸收、转化为具有生物活性的有机铬。用本法制备的富铬酵母，培养周期短，有机铬含量较高，而且生产成本低，具有很强的市场竞争能力，适合工业化规模生产。此项技术经检索国内外尚未见过报道。 本文详细介绍了富铬酵母制各的工艺研究，尤其是对制成品中铬的含量进行了有效的化学分析。通过对影响富铬酵母中铬含量的重要因素的大量试验和分析，最终确定了用啤酒废酵母制各富铬酵母的最佳工艺条件:温度控制在,,?，摇瓶培养,,,，酵母添加量和麦汁量比例为,:,(酵母湿重量与麦汁重量相当)，采用浓度梯度加铬的方式，在糖度为,,,,的麦汁中添加,,,的,,,,,溶液，使其浓度累计达到,,,垤,,，即开始时使麦汁中铬浓度为,,,,,,，待培养至,,时再加入,,,,,溶液，使其浓度达到,,,垤,,，待培养至,,时再添加,,,,,溶液，使其总浓度达到,,,肛,,,，最后调节麦汁,,为,(,。 利用上述工艺条件制得的富铬酵母中，总铬含量可达到,,,(,腿,,其中有机铬含景可达到,,,(,?,,,，约占总铬含量的,,(,,。关键词 铬啤酒废酵母 富铬酵母二苯胺基脲分光光度法 些奎墼三些竺堕堡圭丝堡塞 ,,,,,,,,,,,;, ,,,,, ,, , ,,,, ,,,,,, ;,,,, ,,,,,,,; ,,,,,;,(，,’, ,,,,,,,,, , ,,;, ,,,,,;, ,,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,,, ,,,, ,,,,,, ,,, ,,,,;,,,, ,,,,,,,,,,(硎忙,,,,,, ,,,,,, ,,,, ,,,, ;,,;,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,’, ,,,,, ,,, ;,,,,,,,,, ,, 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,:,(,,,,,’, ,,, ,,,,,, ,,,,, ,？,,,,,,,,,, ,,,,’, ,,,,,,)，,,;,,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,,,屺,, ,,,, ,,,, ,,,, ,, ,,, ,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,, ,,,,以,, ,,, ,,, ,, ,,,,,,,,,,,,,,, ,,;,,,,,打,,,,, ,,,,,,,,，,,,, ,,，,,,,, ,,,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,,,,，,,,, ,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,, ,,(,, ,,,, ,,,;,,,,,,,,,,, ,,,,, ,,。,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,, ,, ,,, ,,,, ,, ,(,( ,,, ,,,,, ,,,,,,,, ;,,;,,,,,,,,, ,,,, ,,, ,, ,,,(,,,,, ,,,,,,,,,,,,,;, ,,,,, ,,,,,,,, ,, ,,, ,,,,, ,,;,,,,,,,;,, ;,,,,,,,,,，,,,,,,,,,; ,,,,,,,, ;,,;,,缸,,,,, ,,,, ,, ,,,(,?,,,(,,,,, ,,(,,,, ,,, ,,,,,,,,(,,, ,,,,,: ,,,,,,,,，,,,,, ,,,,,,’, ,,,,,，,,,,,,,,,,,;, ,,,,,， ,,,,,,,, ;,,,,,,,,，,,,;,,,,,,,,,,,,, , 山东轻工业学院硕士学位论文 符号说明 英文缩写(全名) 汉语名称 ,,,, 活性干啤酒酵母 ,,,(,) 丙氨酸 ,,, 美国医学会 ,,, 双(,，,,二氨基苯基)磷酸 ,,,(,) 精氨酸 ,,,(,) 天门冬氨酸 ,,,,,, ,,,,,,’, ,,,,, 下面啤酒酵母 ,,,,,,,, 糖尿病 ,,;,,,, ,,,,, 衰亡期 ,,,, 乙二胺四乙酸 ,,,,,,,,,,, ,,,,, 指数期 ,,,,,,,,,, ,,,,, 发酵力 ,,,,,,,,, ,,(,一吡啶基),,，“(扯苯基磺 酸)一,，,,,三嗪钠 ,,,(,) 谷氨酸 ,,,(,) 甘氨酸 ,,, 葡萄糖耐量因子 ,,,,,,, 黑达克面团测定法胁,(,) 组氨酸,,,(，) 异亮氨酸，,,,,,,, 胰岛素 山东轻工业学院硕士学位论文,,, ,,,,, 迟滞期,,,(,) 亮氨酸,,, ,,,,, 对数期,,,(,) 赖氨酸,,,(,) 甲硫氨酸,,,;, 烟酸眦 ,,(,,,,,啶偶氮)一问苯二酚,,,(,) 苯丙氨酸,,,,,,,,, 多 倍体,,, 饮食推荐量,,;;,,,,,,;,, ;,,,,,,,,, 啤酒酵母,,(,) 丝氨酸,,,,,,,,,,,,,,, 稳定期,,, 扯(,,噻唑基偶氮)一间苯二酚,,,,，,,, 氯化十四烷基二甲基苯甲铵,张，(,) 苏氨酸如,(,) 酪氨酸,,,(,) 缬氨酸,,,, 氧值 , 山东轻工业学院硕士学健论文 第一章绪论,(,铬的理化性质简介 铬的原子序数为,,〔,,，原子量为,,(,,,，其稳定同位素有”,,、“;,、,,;,、“;,，其中以,,;,的天然丰度最大。铬是一种活泼的金属，具有，，，、“，，、，?等多种价态，其中以，，,,最稳定。在水溶液中,,(,,,)是以六水台离子【,,(,,妇),”形式存在。,,(,)呈蓝色，;,(,)呈紫色，〔, (,’,),,,，呈蓝紫色。〔,,(,,,),】,，在一定浓度的氨水溶液中转化成黄色的六氨络离子〔,,(,,,),】,，。在六水合离子和六氨络离子之间还可以依溶液中氨浓度不同，生成一系列混合配位体的络离子〔,,(,’,,,),。(,,,,)。,。随着进入内界氨分子数目的增加，络离子的颜色向长波方向变化。,,(，,，)在碱性溶液中可被,,,,,,,、,,,,、,,,,,等氧化成,,(?)，主要是以黄色的铬酸根(,,,,。)形式存在，酸化时变为橙黄色的重铬酸根 (,,,,,,一)。 在对人类健康急慢性效应中【,】，,,(，，，)毒性很小，在通常的摄入量和它可能产生有害作用的量之间存在着广泛的安全界线。;,(?)毒性大，而且,,(,，)又是强致癌剂和氧化剂，常是食品重金属污染和工业污染的来源组成部分。,(,铬的化学测定方法“, 关于铬的化学测定方法很多，对实验样品进行化学分析时常用以下几种方法:,(,(,二苯胺基腮法 又名二苯碳酰二肼、二苯卡巴脲、二苯偕肼，白色或浅红色细碎块或粉末状物质，分子式为,,(,,?,,,?,,如),，结构式如左图所示:喊、,,,,,，,,一液，嘉嚣翳篙嬲凳鬈量慧鬈 、”,一““一《:?,,(?)的普遍方法。魔,,等发现，只有在二苯胺基脲氧化为二苯胺基腙之后才能生成金属整合物。根据,,,,,的报道，;,基脲氧化为二苯胺基腙之后才能生成金属螯台物。根据,,,,,的报道，;, 山东轻工业学院硕士学位论文 第一章绪论 ,(，铬的理化性质简介 铬的原子序数为,,〔”，原子量为,,(,,,，其稳定同位素有,,,,、,,,,、”;,、”;,，其中以,, ,,的天然丰度最大。铬是一种活泼的金属，具有，，,、，，,,、，,，等多种价态，其中以，，，，最稳定。在水溶液中,,(?，)是以六水合离子〔,,(,,,),,,，形式存在。,,(，，)呈蓝色，,,(，，，)呈紫色，〔;, (,,,),,,，呈蓝紫色。〔,,(,,,),】,，在一定浓度的氨水溶液中转化成黄色的六氨络离子【,,(,,,),,。在六水合离子和六氨络离子之间还可以依溶液中氨浓度不同，生成一系列混合配位体的络离子〔,,(,,,),。(,,,)。,”。随着进入内界氨分子数目的增加，络离子的颜色向长波方向变化。,,(，，，)在碱性溶液中可被,,,,,、,,,,、,,,,,等氧化成,,(?)，主要是以黄色的铬酸根(,,,,,一)形式存在，酸化时变为橙黄色的重铬酸根 (,,,,,,。)。 在对人类健康急慢性效应中【,】，,,(，，，)毒性很小，在通常的摄入量和它可能产生有害作用的量之间存在着广泛的安全界线。,,(?)毒性大，而且,,(,，)又是强致癌剂和氧化剂，常是食品重金属污染和工业污染的来源组成部分。,(,铬的化学测定方法“, 关于铬的化学测定方法很多，对 实验样品进行化学分析时常用以下几种方法:,(,(,,苯胺基脲法 又名二苯碳酰二肼、二苯卡巴脲、二苯偕肼，白色或浅红色细碎块或粉末状物质，分子式为,,(,,?,,,?;拽),，结构式如左图所示: 一，,,一舳一《厂飞 它在酸性介质中与,,(?)反应形成紫红色溶,。;,阡,卜否鍪’。蔫麓鬻麓裟鋈翼笺塞基脲氧化为二苯胺基腙之后才能生成金属螯合物。根据,,,,,的报道，,, 山东轻工业学院硕士学位论文 (,，)与二苯胺基脲反应的有色产物的摩尔吸光系数,,,(,,×,,,， ‰萨,,,,,，反应所得的颜色强度受所用二苯胺基脲试剂质量和剂量的影 响。 ,,”氧化为,,,,,,。的反应通常在,(,,,,(,,,,,,,的,,,,,介质中用 ,,,,。或(,,,,,,,,来完成。二苯胺基脲法对于铬(,，)的测定几乎是特 效的。,,(?)溶液中如果含有较高量的,,(，，,时，可用磷酸或乙二胺 四乙酸(,,,,)掩蔽;若还含有,,(，，，)时，可以首先以铝或铁作为收 集剂，用氨水作为沉淀剂把,,,，沉淀为氢氧化物而分离，然后把沉淀溶解， 将,,(，，，)氧化为,,(,，)，再用二苯胺基脲测定。鉴于此法精确度比较 高，本实验采用此法作为富铬酵母样品中铬含量的测定方法。 ,(,(,,,,法 ,,(,一吡啶偶氮)一间苯二酚(,,,)试剂灵敏度高，选择性较差，常 需用溶剂萃取、离子交换等方法分离干扰离子后才能进行测定。用氯化一卜 四烷基二甲基苯甲铵(,,,,,,)氯仿溶液萃取,,(?，),,,,络合物 而后测定,,(,,,)可获得较高的槊舳群透哐?裥浴?在煮沸的,,为,的醋酸缓冲液中，,,,(,,,)与,,(，，,)生成,:,的络合物，此物与,,,,，生成离子缔合物(,,,,，):,,(,)(,,,)，可被氯仿萃取。在,。,,,,,,处，,,,,(,,×,,,。,,(,,),形成后，可加入,,,,作为掩蔽剂。本方法可成为测定,,的专属方法。,(,。,,,,法 ,,(,一噻唑基偶氮)一间苯二酚(,,,)与痕量,,(，，，)可定量反应，在分光测定,,(,,，)时无需氧化和萃取,,(，,,)。此法灵敏度和离子选择性更高。在,,,(,时，加热至,,一,,。,时,,(，，,与,,,形成,:,的红色络合物。在,—,,,,,,处，,,,(,,×,,,，测定范围为,(,,,,(,,,,,,,,。此法主要用于钢中铬的测定。,(,(,三元络合物法 在,,,(,的弱酸介质中，,,(,，)与邻羟基对苯二酚和氯化十六烷基三甲基铵组成摩尔比为,:,:,的三元络合物，其,，，。,,,,,,，,,,(,,×,,,，灵敏度,(,,,,,, ,,(?),;,,，测定范围,,,,垤,,(?),,,,,。可用于钢中,,(,，)的测定。 , 山东轻工业学院硕士学位论文 胡之德等采用,,(?)一二苯胺基脲一对甲苯磺酸钠三元络合物测定镍、铜、铁矿和废水中,,(,，)。该络合物的组成为,:,:,，厶。,,,,,,，,《×,,,，方法灵敏度为,埃埃玻校纾悖恚病,ツ诜疾氐壤茫茫颍ǎ龋桑?拇嬖诳墒梗悖酰ǎ桑桑?桓跆烨啵笠宦然耐榛谆谢绾衔锿噬浣硬舛ǎ茫颍ǎ桑桑桑,舛ㄊ比芤旱模穑扔Φ髦粒梗担舛úǔの担常?,,,,，方法灵敏度为,(,,,,,,,,;,,。夏道沛等采用,,(，，,一铬菁,,溴化十六烷基三甲基铵三元络合物法，并利用在微酸性溶液中，,,,,,,与,,,,,,反应时可诱导,,,,,,。与,,,，发生反应，同时,，,,,对三元络合物的形成有催化作用，从而提高了方法的灵敏度。该络合物的组成为,:,:,，,。庐,,,,, ,，,,,(, , ,,’。该法曾用于矿石中微量铬的测定。,(,(,其他化学测定方法 ,,(?)与苯基萤光酮在,,,(,的,,,乙醇介质中形成摩尔比为,:,与,:,的络合物，它们的最大吸收波长分别为,,,与,,,,,。,:,络合物在,,,姗能遵从比耳定律，其,值为,(,×,,,，测定范围为,(,,,—,(,,,,,,。,(?)与,,,,有干扰。 ,,(,，)可通过对,,(，，)的氧化作用而进行间接测定。过量的,, (，，)在加入,,,,,,,,,〔,,(枷比啶基),,，缸(,,苯基磺酸)一,，,，,,三嗪钠盐】与之形成有色络合物，之后，在,,,,,进行测定。该络合物的,值为,(,, , ,,,。 ,,(,，)与双(,，,,二氨基苯基)膦酸(,,,)在,,,,的介质中发生氧化反应，其反应产物的,。,,,,,,，,值为,(,,×,,,。,,含量在,,,,,,肛,,,,,,范围内遵从比耳定律。 有许多采用三苯甲烷染料测定铬的分光光度法，例如:邻苯二酚紫、二甲酚橙和铬菁,。,,,,,,所作关于测定铬的试剂综述中，还提到甲基百里酚蓝、甘氨酸百里酚蓝和甘氨酸甲酚红等试剂。 此外，用于铬的分光光度法测定的有机试剂还有:,—羟基喹啉、,—羟基喹哪啶、茜素红,、吡啶?，,,二羧酸、噻吩甲酰三氟丙酮、邻氨基苯基硫代氨基甲酸及硫代乙醇酸等。 山东轻工业学院硕士学位论文 ,(,铬的生物学意义 早在二十世纪六、七十年代,】，通过给小鼠日粮添加,,(,,,)，可使其正常生长并延长其寿命的实验就已经,,(，，，)是生物体必需的微量矿物营养元素。 进一步的研究证明:,,(，，，)是胰岛素(，,,,,,,)的辅助因子，能激活胰岛素和细胞膜之间的二硫键，提高胰岛素和特异受体的结合力，促进葡萄糖向细胞膜的输送和肝糖元的合成，使高血糖向低血糖转化;能维持核酸结构的完整性和稳定性，是核酸的稳定剂和某些酶的活化剂;有助于甘氨酸(,咖)、丝氨酸(,,,)和甲硫氨酸(,,,)等氨基酸在组织中的贮存，使合成蛋白质作用增加。同时，,,(，，，)有助于抑制血清胆固醇水平，参与动物机体胆固醇的平衡作用。另外，,,(,,,)有增加免疫机能和抗应激的能力，还可刺激机体的造血功能。 人体缺铬会产生葡萄糖、脂肪、蛋白质代谢障碍【,,〕，引起各种疾病，如糖尿病(,,,,,,,,)、冠心病、动脉粥样硬化、末梢神经炎、近视眼等，尤其是婴儿缺铬易患消瘦性蛋白质营养不良症等;动物缺铬会导致血脂浓度高、对应激敏感、免疫功能受抑制、繁殖功能下降、生产水平低以及胴体品质下降等，大量的研究证实铬是人体和动物必不可少的一种微量元素。,(,铬的补充量和方式及其在生物体内的代谢 根据临床全静脉营养的需要,,(,’”，,,,,年美国医学会(,,,,,;,,,,,,;,,,,,,;,,,,,,，,,,)推荐成人经静脉摄入的元素铬应为,,,,,肛,,,。美国的饮食推荐量(,,;,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,;,,，,,,)则建议铬的膳食摄入安全适宜量为:成人,,,,,,,,,,,。然而铬在天然食物中的含量一般在, ,,,以下，远不能满足人体正常需要。因此，食用适量的补铬制剂可使这一问题得以很好的解决。在研究铬的补充时〔,，,,，,,，,,〕，主要有无机铬〔常用,,,,,?,,,,,,、,,,(,,,),、,,(,,,),等】和有机铬(常用甲基吡啶铬、葡萄糖酸铬、烟酸铬、酵母铬、加铬复合纤维等)两种形式。 铬的生物活性的发挥需要;,,，的形式，;,,，是葡萄糖耐量因子〔,,，,,，,,，,,】 (,,,;,,, ,,,,,,, ;, ,,;,,,，,,,,)的中心活性成分，能协助胰岛素维持正常糖耐量，并影响糖类、脂类、蛋白质和核酸的代谢。从啤酒酵母中分离 山东轻工业学院硕士学位论文 出来的具有,,,活性的铬配合物主要由,,(，，，)、烟酸(,,,;,,)、谷氨酸 (,,,)、甘氨酸和含硫氨基酸等组成，并证明由这些成分合成的铬配合物 具有很好的生物活性。极谱研究结果提示【,”，,,,与胰岛素、膜受体形成 三元配合物。另外，,,(，,,)还能促使人和动物机体糖代谢过程中葡萄糖 磷酸变位酶正常工作。铬进入体内，经肠道吸收，在血液里与运送铁的球 蛋白结合，导致吸收率不同，因此铬的吸收与化学结合形式有很大关系， 无机铬不但毒性大，而且吸收水平非常低，约为,(,,,(,,;而有机铬安全性高，生物活性强且易被吸收，如啤酒酵母铬的吸收利用率可达 ,,,,,,,,,，,,(,,〕。 蛋白质的存在有利于铬的吸收和在机体内发挥生物活性。高碳水化合物、低铬日粮则可促进机体组织铬的消耗。生物体对铬的吸收随着年龄的增长而减少。,,,,,,,〔,,,采用注射氯化铬(,,,,,)的方法研究了铬在小鼠体内的分布。注射,天后测定结果，老年鼠以脾、肾、睾丸和附睾中分布最多，心、肺、脑组织中最少，其他组织介于二者之间。青年鼠以骨组织中分布最多。吸收后的铬在血液中存留时间很短，血液铬不能反映机体铬的水平状态，肝是活性铬的储存器官。 铬的排泄途径主要是通过尿液圆，少量通过胆汁随粪便排除，皮肤汗腺排除的更少。动物在应激状态下尿铬含量明显上升。日粮中，,,、,,,、,;、;,等元素的含量愈高，愈促使机体铬的排除。,(,铬在动物体及养殖业方面的应用研究进展 近年来，铬除了在医学中治疗糖尿病方面得到了很大的成功，各国对铬在动物体方面的研究和利用也有了很大的进展，展现出一片光明的开发应用前景〔,,，,,〕。 泰国,,,,,,,,,大学和美国路易斯安那农业实验站等通过在日粮中加铬育猪的实验证明，在日粮中添加,,,,,,或更多一点的有机铬量，对提高猪的日增重、眼肌面积、瘦肉率、降低背脂厚度和血清胆固醇含量有明显作用。 ,,,;,等认为，应激状态中的动物体的血清皮质激素水平会升高。皮质激素有抑制机体免疫系统和拮抗产奶的作用。给生长期牛、肉牛、奶牛的日粮中添加,,,,,,铬量的富铬酵母，饲喂到第,,天时，血清皮质激素开始下降。这既揭示铬抗应激的作用，又表明，产生抗应激作用有比较缓 , 山东轻工业学院硕士学位论文 慢的过程。 另外，我国养殖业生产中，动物缺铬现象十分普遍，铬在机体内的吸 收与排泄受到蛋白质和,,、,,、,,、,,、,,、,,、,,等因素的影响。 我国蛋白质饲料供应不足，广泛使用上述微量元素添加剂导致了铬的吸收 不足，排泄增加。因而，大力开发有机铬制剂产品和开发应用铬制剂作为 饲料添加剂的综合配套适用技术，必将会大大推动我国养殖业的发展。 ,(,啤酒酵母的生化特性及生长规律阻,—,, ,(,(, ,卑酒酵母的生化特性 啤酒酵母(,,;;,,,,,,;,, ;,,,,,,,,,)是兼性厌氧菌，属酵母科，酵 母菌属。其繁殖方式主要为出芽繁殖。啤酒工业所应用的酵母菌常为多倍体(,,,,,,,,,)下面啤酒酵母(,,,,,, ,,,,,,, ,,,,,)。 酵母的细胞组成，可用,出,,,,,表示，分子量为,,,，并含有约,,,的灰分。,,,,,,,,于,,,,年分析得出的酵母菌化学组成百分率为，含碳,,(,，氢,(,，氧,,(,，氮,(,;而,,,,,,,于,,,,年得出的百分率为，含碳,,，氢,(,，氧,,，氮,(,。生长一定量的酵母菌的 需氧量，可根据酵母菌的化学组成计算出来，通常以生产每克干菌体的需氧量(克)表示，称为氧值(,,,,)。以蔗糖为底物，,,,,,,,,得出的酵母菌氧值为,，,,,克，而,,,,,,,得出的氧值为,(,,克。两人有差异，是因为他们所测定的酵母化学组成中碳水化合物和蛋白质的含量不同所致。 啤酒酵母属嗜温性酵母菌，其最适生长温度,庐,,—,,。,，并在,,。,左右时其繁殖速度达到最高。啤酒酵母适合在偏酸性环境中繁殖生长，最适,,为,(,,,(,。,(,(,啤酒酵母的生长规律 酵母菌纯培养的生长曲线(见图,)大体可分为迟滞期(,,,,,,,,)、对数期(,,,,,,,,)、稳定期(,,,,,,,,,,,,,,,)和衰亡期(,,;,,,,,,,,,)。 母伊仨述度 ,,闻 ?(，品:篇麓慧。，。。， ,, 山东轻工业学院硕士学位论文 处于迟滞期的细胞，体积增长较快，代谢活力强，细胞中,,,含量较高，对不良环境敏感。迟滞期被认为是细胞进入新环境后为合成必需量的酶、辅酶或某些中间代谢物，以及适应新环境而出现的代谢调整期。由于迟滞期的长短能影响酵母菌的正常生长周期，所以在生产实践中总是设法缩短迟滞期。 对数期是酵母菌经过迟滞期，适应了新环境后，以最快速度进行繁殖的时期。由于处于此期的菌数按几何级数增加，即以‖—,,,—?,,—?,,……,,速度增长(,,为细胞分裂次数或世代数)，所以又称为指数期(,,,,,,,,,,,,,,,,)。处于对数期的酵母，其代谢活跃，生长率高，群体中的化学组成及形态和生理特征比较一致，通常在生产上用作接种种子，实验室也多以对数期细胞作为实验材料。啤酒酵母的世代时间约为,,，在一般温度条件下，上面啤酒酵母的世代时间短于下面啤酒酵母。 随着培养基中营养物质的逐渐消耗和有害代谢产物的不断积累，酵母菌生长速率下降，死亡率渐增，致使新增细胞数与死亡细胞数趋于平衡，活细胞数保持相对稳定，这一时期称为稳定期。若要得到大量的酵母菌体，一般应在这一时期收集。继续培养，菌体死亡率大大增加，以致死亡数大大超过新生数，酵母进入衰亡期。,(,啤酒酵母作为富集铬的载体的优点 目前，在各种酵母铬的研制过程中，以啤酒酵母作为铬的有机载体有着诸多的优势【,,】。(,)啤酒酵母是一种安全不致病、不产生内毒素且遗传背景较清楚的微生物，它是不需要做毒性试验即可直接食用的少数几种菌种之一:(,)啤酒酵母的生长,,比细菌低，可在有抗菌素的条件下生长，因而在培养基中容易抑制杂菌的生长而对酵母菌无.