高效液相色谱法测定右旋布洛芬凝胶中右旋布洛芬的含量

高效液相色谱法测定右旋布洛芬凝胶中右旋布洛芬的含量 高效液相色谱法测定右旋布洛芬凝胶中右 旋布洛芬的含量 医药导报2008年7月第27卷第7期?835? ? 药品质量控制? 高效液相色谱法测定 右旋布洛芬凝胶中右旋布洛芬的含量米 王文清,汪秋二".z/-方建国,马永贵,汤杰,施春阳 (华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部,武汉430030) [摘要]目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定右旋布洛芬凝胶中右旋布洛芬含量.方法采用Hypersil ODS2色谱柱(4.6mm×250mm,5岬);流动相:乙腈.水(用磷酸调节pH值至3.o)(58:42);检测波长:263nm;流速 1.0mL?min..;柱温:35?.结果右旋布洛芬在25.1,251.0Ixg?mL范围内,线性关系良好,r=0.9999.平均回收 率为101.6%(n=9).结论该方法简便,快速,准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制. [关键词]右旋布洛芬凝胶;色谱法,高效液相;含量测定 [中图分类号]R927.2[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2008)07-0835-03 ContentDeterminationofDexibuprofenintheGelPreparationbyHPLC WANGWen—qing,WANGQiu—lan,FANGJian—guo,MAYong—gui,TANGJie,SHIChun—yang(Department ofPharmacy,Tong]iHospitalAffiliatedwiththeTongfiMedicalCollege,HuazhongUnivers ityofScienceand Technology,Wuhan430030,Cina) ABSTRACTObjectiveToestablishamethodforcontentdeterminationofdexibuprofeninth egelpreparationbyHPLC, MethodsHypersilODS2columnwasused.withacetonitrile—water(pH3.0,58:42)asmobilephase,detecting wavelengthas263nm.flowrateas1.0mL?minandtemperatureas35qC,ResultsThedexibup rofenshowedagood linearcorrelationwitharangeof25.1,251.0g?mL'.,r=0.9999.Theaveragerecoverywas101.6%(n=9). ConclusionThismethodissimple,rapid,accurateandrepeatable,whichcanbeusedforqualit ycontrolinthispreparation. KEYWORDSDexibuprofengel;HPLC;Contentdetermination 右旋布洛芬是布洛芬(外消旋体)中具有抗炎镇 痛活性的对映体,具有比布洛芬外消旋体更强的药效 以及更低的毒性.右旋布洛芬剂型现已有片剂,胶囊 剂,口服混悬剂等.由于其解热,镇痛,抗炎作用 强?,口服吸收迅速,临床用于治疗风湿及类风湿性 关节炎,骨关节炎及各种疼痛.口服非甾体抗炎药有 胃肠道反应,长期服用有消化道出血的危险J,把右 旋布洛芬制成局部外用剂型,对治疗部位具有针对性, 能提高局部药物的浓度,降低全身治疗后所产生的不 良反应.避免对胃肠道的直接刺激,达到局部治疗的 目的.因此,把右旋布洛芬制成局部外用制剂治疗局 部疾病是科学,合理的.高效液相测定含量具有快速, 准确,重复性好等优点,故笔者在本研究中采用高效液 [收稿日期]2007-07-05 [基金项目]湖北省科技攻关项目(基金编号: 2006AA301B116—2) [作者简介]王文清(1969一)女,四川I遂宁人,副主任 药师,硕士生导师,博士,主要从事药物研究工作与中药有 效成分活性评价.电话:027—83649095,E—mail:wwq3560@ 相色谱(HPLC)法对右旋布洛芬凝胶中右旋布洛芬 含量进行质量控制. 1仪器与试药 1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪(美国安捷 伦),包括G1311A型四元泵,G1379A型真空脱气机, 7725i进样阀,VWD紫外检测器,HP1100化学工作站; UV一265FW型分光光度计(13本岛津);AUW220D型 双量程分析天平(13本岛津);Phs一2C型酸度计(上海 雷磁仪器厂). 1.2试剂右旋布洛芬凝胶样品(自制,批号: 060524,060612,060613,060614,规格:20g:0.5g); 右旋布洛芬对照品[含量为99.6%,由湖北百科亨迪 药业有限公司提供(二级对照品),有关物质为 0.09%,左旋体为0.85%,符合右旋布洛芬对照品的 质量规定].乙腈为色谱纯,其他均为分析纯,水 为新制多效纯化水. 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱:Hypersi|ODS2色谱柱 (4.6mmx250mm,5Ixm);流动相:乙腈一水(用磷酸 调节pH值至3.0)(58:42),流速1.0mL?min,;检 ? 836?HeraldofMedicineVo1. 27No.7July2008 测波长:263nm;柱温:35oC;理论塔板数按右旋布洛 芬计算,应不少于2000. 2.2对照品溶液的制备精密称取右旋布洛芬对照 品适量,用流动相溶解并制成每1mL含右旋布洛芬 0.1mg的溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备精密称取本品适量(相当 于右旋布洛芬2.5mg),置25mL量瓶中,加流动相适 量,超声10rain后,用流动相加至刻度,摇匀,滤过,取 续滤液为供试品溶液,即得. 2.4空白辅料干扰实验精密称取空白辅料 0.5043g,置于25mL量瓶中,用流动相适量溶解,超 声10rain,再用流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤 液作为空白辅料溶液.按上述色谱条件,精密量取右 旋布洛芬对照品溶液,供试品溶液和空白辅料溶液各 1O,分别注入液相色谱仪,色谱图,即得.结 果:空白辅料在此色谱条件下可出现辅料峰,但与主峰 及杂质峰的分离度良好,右旋布洛芬主峰的保留时间 约为7.5min,空白辅料及溶剂的出峰时间<5rain, 对本品物质测定无干扰.结果见图1. ' t/mlnt/mlnf/mln 对照品空白辅料供试品 图1右旋布洛芬对照品,空白辅料溶液及供试品溶液HPLC 色谱图 1.右旋布洛芬;2.辅料 2.5标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的右旋 布洛芬对照品12.55mg,置25mL量瓶中,用流动相 溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液,分别精 密量取储备液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL,分别置 于10mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,作为供 试品溶液.分别取各供试品溶液10L进样,以峰面 积(A)对浓度(C)作线性回归,得回归方程:A= 1.78334C+3.1971.r=0.9999.可见在25.1, 251.0Ixg?mL.范围内,峰面积与浓度线性关系良好. 2.6最小检测限检查精密称取右旋布洛芬对照品 4.75mg,置50mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻 度,再不断用流动相稀释后测定其峰面积,精密量取 1O进样,记录色谱图.当信噪比约为3:1时右旋 布洛芬的浓度为0.95Ixg?mL..,因此其最低检测量为 9.5ng. 2.7精密度实验取标准曲线项下的3号溶液(浓 度约为0.1mg?mL'.)10IxL进样,连续5次,记录色 谱图.测定并计算右旋布洛芬峰面积的RSD为 0.33%,说明仪器精密度良好. 2.8稳定性实验取同一供试品溶液,于室温(2O, 25oC)下放置,在不同时间段(0,2,4,6,8,10h)内取 1OL进样,记录色谱图.测定并计算右旋布洛芬峰面 积的RSD为1.23%,表明供试品溶液在10h内稳定. 2.9重复性实验选择同一批号右旋布洛芬凝胶 (批号:060524),按"2.3"项下方法制备供试品溶液6 份,分别取1OL进样,测定并计算,右旋布洛芬含量 的RSD为1.67%,结果表明本法重复性良好. 2.10回收率实验分别精密称取右旋布洛芬原料适 量,加入按处方比例称取各辅料制成的空白凝胶中,混 合均匀后分别制成含右旋布洛芬80.O%,100.O%与 120.O%的模拟样品,置25mL量瓶中,再按"2.3"项下 方法制备供试品溶液.另精密称取右旋布洛芬对照品 适量,用流动相溶解并制成每1mL含右旋布洛芬 0.1mg的溶液,作为对照品溶液.分别取供试品溶液和 对照品溶液各1O进样,记录色谱图.按外标法计 算.结果平均回收率分别为100.3%(RSD=1.26%), 102.7%(RSD=1.15%),101.9%(RSD=1.84%). 2.11耐用性实验 2.11.1不同色谱柱的影响取同一供试品溶液(批 号:060524),分别采用3个不同品牌的色谱柱 (HypersilODS2,HypersilBDS,LicrosorbC18)进行实 验,其他色谱条件不变,测定并计算,右旋布洛芬含量 的RSD为4.08%,表明色谱柱对该方法影响较小. 2.11.2流动相比例变化的影响分别采用3种不同 比例的流动相(55:45),(58:42),(61:39)进行实 验,其他色谱条件不变,测定并计算,右旋布洛芬含量 的RSD为2.69%,表明流动相比例变化在以上范围内 对该方法基本无影响. 2.11.3不同柱温的影响分别采用3种不同柱温 (35,4O,45?)进行实验,其他色谱条件不变,测定并 计算,右旋布洛芬含量的RSD为2.04%,表明柱温变 化在以上范围内对该方法基本无影响. 2.11.4不同流速的影响分别采用3种不同流速 (0.9,1.0,1.1mL?rain)进行实验,其他色谱条件 不变,测定并计算,右旋布洛芬含量的RSD为1.35%, 表明流速变化在以上范围内对该方法基本无影响. 2.11.5流动相pH值的影响用磷酸调节水溶液 pH值,分别在pH值为2.75,3.0和3.25时进行实验, 其他色谱条件不变,测定并计算,右旋布洛芬含量的 RSD为1.85%,表明流动相pH值在以上范围内对该 医药导报2008年7月第27卷第7期?837? 方法基本无影响. 2.11.6不同检测波长的影响分别采用3种不同检 测波长(253,263,273nm)进行实验,其他色谱条件不 变,测定并计算,右旋布洛芬含量的RSD为3.83%,表 明检测波长的变化在以上范围内对该方法影响较小. 2.12样品含量测定分别精密称取不同批号的右旋 布洛芬凝胶,按"2.3"项下制备方法制备供试品溶液. 分别精密吸取上述溶液各10,注入液相色谱仪,记 录色谱图.按外标法以峰面积计算,即得.3批供试 品(批号:060612,060613,060614)为标示量的百分含 量分别为99.8%(RSD:1.58%),98.2%(RSD: 1.07%)和98.7%(RSD:2.34%). 3讨论 参考《中华人民共和国药典)2oo5年版二部布洛 芬含量测定项下色谱条件,改用乙腈一水(用磷酸调节 pH值至3.0)(58:42)为流动相,则峰形良好,且此条 件下杂质峰保留时间为4min,而主峰保留时间为 75min,即杂质峰与主峰达到基线分离. 称取右旋布洛芬对照品适量,溶于流动相中,进行 紫外(200—400nm)扫描,右旋布洛芬在波长263nm 处有最大吸收峰,且参考《中华人民共和国药典~2oo5 年版二部布洛芬含量测定项下亦采用263nm为检测 波长,故选择本品含量测定的检测波长即为263nm. 右旋布洛芬含量测定有非水滴定法,HPLC法等, HPLC法有专属性强,检测灵敏度高,分析速度快,重现 性好等等优点.故可作为右旋布洛芬质量控制方法. [参考文献] [1]王文清,李明,方建国,等.右旋布洛芬凝胶的抗炎镇痛作用 [J].医药导报,2007,26(4):364—366. [2]EVANSAM.ComparativepharmacologyofS(+)2inbuprofen and(RS)ibuprofen[J].ClinRheumatol,2001,20(1):9一l4. [3]沈灏.右旋布洛芬的临床应用[J].现代诊断与治疗,2003,14 (3):175—176. [4]植江,胡晓云,冯枫,等.持续与间断硬膜外阻滞加浅全麻用 于老年患者手术的观察[J].中华肿瘤临床与康复麻醉,2001,8 (6):99. [5]方建国,王文清,汪秋兰,等.布洛芬凝胶的制备与质量控制[J]. 医药导报,2006.25(1):52—54. 健脾养胃颗粒质量标准研究木 赵洪芝,叶挺祥一,刘征辉一,程奕,刘新元,李春 (1.天津海世达检测技术有限公司,300384;2.天津市现代中药质量检验中 心,300384;3.天津中新药业隆顺榕 制药厂,300457) [摘要]目的建立健脾养胃颗粒的质量标准.方法采用薄层色谱(TLC)法鉴别制剂中的甘草,白术,党参, 用高效液相色谱(HPLC)法同时测定厚朴酚与和厚朴酚的含量,色谱柱:AgilentEclipseXDBC柱(4.6nlnl×250nlnl,5 m);流动相:甲醇一水(65:35);流速:1,0mL?min,;波长:294nnl,柱温30?.结果在TLC色谱中均能检出甘草, 白术,党参;厚朴酚与和厚朴酚的线性范围分别为57.04,570,40ng(r:0,9997)和37.76377,60ng(r:0.9995):平 均回收率分别为97.0%(RSD为1,0%)和97.7%(RSD为1.9%).结论所建鉴别方法专属性强,定量方法快速简 单,快速,准确,可为健脾养胃颗粒的质量标准. [关键词]健脾养胃颗粒;质量标准;薄层色谱法;色谱法,高效液相 [中图分类号]R286;R927.11[文献标识码]A[文章编号]1004-0781(2008)07-0837-04 EstablishmentofQualityStandardforJianpiyangweiGranules ZHAOHong—zhi一,YETing—xiang一,LIUZheng—hui'_,CHENGYi一,LIUXin—Yuan,LIChun(1.0nn High—standardQualityTestingLab.,0声n300384,China;2.TianCenterforQualityTestingofTCM. Tianjin300384,China;3.TianZhongxinPharmaceuticalGroupCorporationLimitedLongs hunrong Factory,Tianfin300457,China) ABSTRACTObjectiveToestablishthequalitystandardforfianpiyangweigranules.Metho dsGlycyrrhetin1'c. RhizomaAtractylodisMacrocephalaeandRadixCodonps~wereidentifiedbyTLC.Contentsofma-Ilo1o1andhonokio1were determinatedbyHPLC?ThechromatographiccolumnwasanAgilentEclipseXDBC l8(4.6nlnlx250nlnl,5m),themobile phasewasmethanol— water(65:35),thedetectionwavelengthwas294nm,withtheflowrateat1.0mL?min,.andt he columntemperatureat30oC.ResultsGlycyrrhetinic, RhizomaAtractylodisMacrocephalaeandRadixCodonpsiscouldbe