富铜酵母对西门塔尔牛发情周期生殖激素分泌的影响

富铜酵母对西门塔尔牛发情周期生殖激素分泌的影响 富铜酵母对西门塔尔牛发情周期生殖激素 分泌的影响 514中国兽医2009年4月第29卷第4期Chin/fSciApr.2009Vo1. 29No.4 富铜酵母对西门塔尔牛发情周期生殖激素分泌的影响 刘强,王聪,董宽虎,赵祥,高文俊(山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801) 摘要:选用16头18月龄,体况良好,体质量390kg的西r-l塔尔牛育成母牛,采用完全随机分组设计分为4组,研究 富铜酵母(o,8,16,24mg/kg)对发情周期外周血清促黄体素,促卵泡素,孕酮和雌二醇分泌规律的影响.结果显 示,8mg/kg组和16mg/kg组显着提高了发情周期促黄体素,促卵泡素,孕酮和雌二醇水平(P<O.05);24mg/kg 组有提高趋势,但与对照组比差异不显着(P>O.05).结果表明,添加富铜酵母以8,16mg/kg对发情周期生殖激 素分泌有促进作用,以8mg/kg为佳,兼顾基础日粮的含铜量,建议日粮铜水平为13.87mg/kg. 关键词:西门塔尔牛;富铜酵母;发情周期;生殖激素 中图分类号:$816.7;S814文献标识码:A文章编号:1005—4545(2009)04—0514-05 Effectsofcopper—enrichedyeastonreproductivehormonelevelduringestrouscy— cleinSimmentaiheifers LIUQiang,WANGCong,DONGKuan—hu,ZHAOXiang,GAOWen—jun(CollegeofAnimalSci— enceandVeterinaryMedicine,ShanxiAgriculturalUniversity,Taigu,Shanxi030801,China ) 铜对牛的繁殖机能有重要作用,牛缺铜后使母 牛卵巢机能低下],发情紊乱,延迟或受阻,受胎率 低l2],分娩困难,胎衣不下,发生不孕,流产,死胎 等【_3;当补足铜后,奶牛繁殖力提高,不返情率从 53提高到72l4].有机铜要比硫酸铜更容易吸 收,主要是由于吸收率的增加和尿中排出量的下 降].Kincaid等比较了铜蛋白盐和硫酸铜对增 加犊牛体内铜水平的作用,结果发现饲以铜蛋白盐 的犊牛血铜和肝铜分别为0.87mg/L和325rag/ kg,而饲以硫酸铜的分别为0.75mg/I和200rag/ kg.KesslerE研究了有机铜与硫酸铜对奶牛生产 性能和血液指标的影响.而富铜酵母对生殖激素水 收稿日期:2007—09—15 基金项目:山西省科技攻关资助项目(2007031054) 作者简介:刘强(1971),男,副教授,博士. 平的影响尚未见报道.本试验的目的在于通过在西 门塔尔牛日粮中添加不同水平的富铜酵母,测定发 情周期血液中生殖激素(LH,FSH,P,E)的含量, 研究富铜酵母对其分泌规律的影响,为利用营养措 施进行繁殖技术调控提供理论依据. 1材料与方法 1.1试验动物和试验设计在山西省和顺县阳光 占乡牛场,选择16头18月龄,体况良好,体质量390 kg的西门塔尔牛育成母牛.采用完全随机分组设 计分为4组,对照组饲喂基础日粮;处理1组,处理 2组,处理3组以富铜酵母为铜源,分别在基础日粮 中添加铜8(I组),16(II组),24(HI组)mg/kg;本 试验所用富铜酵母(copper—enrichedyeast)由课题 组白行研制,含铜109/6.试验预试期30d,正试期 21d ?一,一一一一一一一一?一,一一,唧 一,一一二量,一 ,,一一一,一,一一一一一,一一一一一一一 中国兽医2009年4月第29卷第4期ChinJVetSciApr.2009Vo1.29No.4515 1.2试验日粮及饲养管理基础日粮的组成和营 养成分见表1.试验牛每日饲喂3次(7:O0,15:O0, 23:oo),单槽饲养,专人负责,采取先精后粗的饲喂 顺序,自由饮水. 表1试验基础日粮组成和营养水平 日粮组成营养水平 玉米秸秆60.0综合净能/(MJkg一)6.56 混合精料40.0粗蛋白质1O.82 混合精料组成中性洗涤纤维56.89 玉米52.0酸性洗涤纤维35.72 麸皮10.0钙0.78 豆粕16.5磷o.54 棉粕l2.0铜/(mg?kg)5.87 菜粕5.0 石粉1.5 食盐1.0 预混料2.0 注:*示每千克含:VA150000I,VD360000IU,VE750IU,Fe 1500mg,Zn1500mg,Mn2000mg,I12.5mg,Se15rag,Co5mg 1.3发情周期的判定及血液样品的采集与制备 预试期仔细观察母牛,出现爬跨即行直检,触摸卵泡 发育及排卵情况,根据发情征兆判断母牛是否发情. 从发情开始21h内,每隔3h采血1次,之后每天采 血1次,直至下次发情期前1d.采血时间恒定在 9:O0,均在颈静脉采血,采血量20mL,静止30min, 在2500r/rain离心10min后,取血清,置于一4O? 冰箱保存备用. 1.4生殖激素的测定与计算采用放射免疫分析 方法在山西农业大学动物科技学院临床医学实验室 GC一911y一计数仪测定雌二醇(Estradiol,E.),促黄 体素(Luteinizing—hormone,LH),促卵泡素(Folli— cle—stimulatinghormone,FSH)和孕酮(Progester— one,P)含量,试剂盒是由北京科美东雅生物技术有 限公司提供的双抗体标记的放射免疫分析测定盒, 按试剂盒说明进行测定. 1.5数据处理及统计分析试验数据应用 SPSS10.0统计分析软件的One—way—Anova进行方 差分析和LSD多重比较,分析结果以?S表示. 应用SPSSIO.0统计分析软件的Regression中的 CurveEstimation进行不同铜水平对各生殖激素影 响的曲线拟合. 2结果 2.1富铜酵母对西门塔尔牛发情周期促黄体素分 泌的影响由表2可知,发情周期工组和?组LH 平均值显着高于对照(P<O.05).发情后12h最 高,I组和?组显着高于对照(P%0.05),之后处于 较低水平.第1O天出现第2个峰值,第16天出现 第3个峰值,I组和?组显着高于对照组(P< 0.05),第17天逐渐升高到发情前的水平. 表2富铜酵母对西门塔尔牛发情期促黄体素分泌的影响(?)IU/I 注:*示同行肩注不同字母表示差异显着(P<O.05).下同 2.2富铜酵母对西门塔尔牛发情周期促卵泡素分 泌的影响由表3可知,发情周期FSH逐天平均值 I组和?组显着高于对照组(P<O.05).发情期为 上升趋势,I组和?组显着高于对照组(P<O.05), 之后处于较低水平.第8天出现高峰,I组和?组 显着高于对照组(P<O.05).然后逐渐下降,第9, 1O天处于较低水平,直到第12天出现第2个峰值, 第15d出现第3个峰值,工组和?组显着高于对照 组(Pd0.05). 516中阎兽医2009年4月第29卷第4期(ittL,,SciApr.200,0Vof.29No.4 2.3富铜酵母对西门塔尔牛发?隋周期孕酮分泌的 影响由表4可知,发情周期P平均值I组和?组 显着高于对照组(,j<0.05).整个周期变化不大, 较平稳.发情期处于较低水平.l,7d平均较低, 8,15d含量增加,形成1个台状峰,I组和?组显 着高于对照组(P<O.05).第16天开始逐渐下降, 直到发情. 表{富铜酵母对西门塔尔牛发情期孕酮分泌的影响(.'?)"g/L 2.4富铜酵母对西门塔尔牛发情周期雌二醇分泌 的影晌由表5可知,发情周期E:平均I组和?组 显着高于对照组(P<0.05).发情开始后的12h达 到高峰,【组和U组显着高于埘照组(P<0.05). 随后下降到较低水平.第4天后逐渐上升,第5,8 天出现第2个峰,I组和?组显着高于对照组(P< 0.05).再下降到发情前的水平. 表5富铜酵母对西门塔尔牛友情期雌二醇分泌的影响(.'?)ng/L 中国兽医2009年4月第29卷第4期ChinJVetSciApr.2009Vo1.29No.4517 3讨论 LH与FSH协同促进卵泡生长成熟和粒膜增 生,能够促进排卵和形成黄体,并参与内膜细胞合成 分泌雌激素.发情后12h为最高,之后处于较低水 平,第1O天出现第2个峰值,第16天出现第3个峰 值,这与徐直等测定结果一致.Madej等_9测定 了5头荷斯坦牛,基础值为0.3,3.5g/I,排卵前 几小时出现1个单独的峰,峰值为6.7,16g/L. Larsson["用超声波结合测定LH,认为LH峰出现 在发情开始后的7.4h,本试验结合触摸卵巢和激 素测定确认6,12h,与王聪等Lll_测定结果,致. 日粮添加富铜酵母促进了LH的分泌,以8,16 mg/kg较为显着.以富铜酵母为铜源时,发情周期 LH水平与日粮铜水平呈2次项曲线模型:.y=一 0.0264x+1.0693z一1.0077(R.一0.9995). FSH能够刺激卵巢生长和生长至出现空腔的 卵泡继续发育增大并接近成熟Il.发情期FSH为 上升趋势,之后处于较低水平,第8天出现高峰,然 后逐渐下降,第9,10天处于较低水平,直到第12 天出现第2个峰值,第15天出现第3个峰值.Ak— bar等m和Bolt等的测定结果均高于本试验,但 趋势十分近似,说明发情后FSH维持较高水平约 12h[引,这与王聪等测定结果一致.日粮添加富 铜酵母促进了FSH的分泌,以8,l6mg/kg较为 显着.以富铜酵母为铜源时,发情周期FSH水平与 日粮铜水平呈2次项曲线模型:Y一一0.0082x.+ 0.3069x+0.8333(R一0.8862). 生殖道在雌激素作用下开始发育,在P协同作 用后,才能充分的发育.少量的P能与雌激素共同 作用使母畜出现外部发情表现,而大量P会抑制垂 体FSH和LH的释放,从而抑制发情.整个周期变 化不大,较平稳.发情期及开始1,7d平均较低,8 , 15d含量增加,形成1个台状峰.第16天下降直 到发情,这是由于发情周期末黄体分泌黄体物质而 引起ll.Smith待测定了12头奶牛,发情前4d P开始下降直到发情为1>g/L,在周期中达到了6 , 7ttg/L.Beckers等测定了15头法国荷斯坦 牛的P水平,结果从发情前5d的6.0#g/I降低 到发情时的0.6ptg/L,之后增加到第15天的7.19 t,g/L.与本试验比较,P含量绝对值有所差异,但 周期P含量的变化趋势相似.日粮添加富铜酵母 促进了P的分泌,以8,16mg/kg较为显着.以 富铜酵母为铜源时,发情周期P水平与日粮铜水平 呈2次项曲线模型:一一0.0013x+0.0527x+ 0.3033(R一0.9953). E的分泌与P呈负相关,对照组发情周期平 均为6.58ng/L,发情前2d处于较低水平,在发情 开始时略微升高,到发情开始后的12h达到高峰, 随后下降到较低水平,形成第1个峰.第4天后逐 渐上升,第5,8天出现第2个峰.然后再下降到发 情前的水平.与P变化相反,在发情时达到高峰, P下降时,E却上升,并在发情时达到最高,这与 卯泡的发育及形态变化相一致[1,这种P水平的 下降,随后雌激素迅速上升是引起发情行为所必须 的口.给切除卵巢的奶牛注射低剂量的P,12h 后再注射雌激素,结果引起奶牛明显的发情现 象心..,可见P与E在引起发情时是协同作用的. Smith等l_】认为周期中E.有2个峰,第1个峰出现 在发情前1d,峰值为11.2ng/L,第2个峰出现在6 , 8d,峰值为7.9ng/L,与本试验结果相接近.日 粮添加富铜酵母促进了E的分泌,以8,16mg/kg 较为显着.以富铜酵母为铜源时,发情周期E:水平 与日粮铜水平呈二次项曲线模型:一一0.0178x+ 0.6816x+2.5949(R一0.9318). 日粮添加富铜酵母8,16mg/kg提高了发情 周期生殖激素的分泌水平,考虑对高铜对生态环境 的影响,建议以添加8mg/kg为佳,兼顾基础日粮 的含铜量,建议日粮铜水平为l3.87mg/kg. 参考文献: HidroglouM.Traceelementdeficienciesandfertilityin ruminants:areview[J~.JDairySci,1979,62(8):1195— 12O6. ThomasS,AnkeM,GrunM.Effectofthecoppersta— tusonthereproductionperformanceandthemilkyield ofCOWSin2copper—deficientlocationsII.Effectof copperdeficiencyonthereproductionperformanceand the~nilkyieldofCOWS[J].ArchTierernahr,1981,31 (10):697—704. 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