反相离子对色谱法测定复方利血平片中硫酸双肼屈嗪的含量
反相离子对色谱法测定复方利血平片中硫
酸双肼屈嗪的含量
药品鉴定2009年8月第16卷第16期
反相离子对色谱法测定复方利血平片中
硫酸双肼屈嗪的含量
吴红英.范玉峰
(1.河南省信阳市食品药品检验所,河南信阳464000;2.河南省信阳职业技术学院附属医院,河南信阳464000)
【摘要】目的:建立反相离子对色谱法测定复方利血平片中硫酸双肼屈嗪含量的方法.方法:采用AgilentEclipse
XDB—C8色谱柱,乙腈一甲醇一1.2%庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节pH=2.5+0.1)(20:10:70)为流动相,柱温:28?,检测波
长为310nm,流速1.0ml/min.结果:硫酸双肼屈嗪在0.0785-0.7848g范围内与峰面积呈良好的线形关系(r=
0.9999);其高,中,低3种浓度的平均回收率分别为100.01%,99.82%,98.94%;RSD分别为0.92%,0.86%,1.07%.
结论:本方法简便,准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制.
『关键词】反相离子对色谱法;硫酸双肼屈嗪;复方利血平片
时I图分类号】R927【文献标识码1B【文章编号】1674—4721【2009)08(b)一062—02
Analysisofdihydralazinesulfateincompoundreserpinetabletsbyreversed
phaseionpairchromatograpy
WUHongying~,FANYufe,
(1.InstituteforFoodandDrugControlofXinyangCity,Xinyang464000,China;2.Affiliated
HospitalofXinyangPolytech—
nicofHenanProvince,Xinyang464000,China) 【Abstract]Objective:Thedeterminationofthecontentofdihydralazinesulfateincompoun
dreserpinetabletswasestab-
lishedbyevemedphaseionpairchromatograpy.Methods:AAgilentEclipseXDB—C18chromatographiccolumnwasused withacetonitrile-methanol-1.2%sodiumheptanesulfonate(adjustpHtopH=2.5?0.1byphosphoricacid)(20:10:70)as mobilephaseat28?.Thedetectingwavelengthwas310nm.Theflowratewas1.0ml/min.Re
sults:Thelinearrangewas
0.0785-0.7848}xg(r=-O.9999).Theaveragerecoverieswere100.01%,99.82%,98.94%wi
thcorrespondingRSDof0.92%,
0.86%,1.07%.Conclusion:Themethodissimple,accurateandreproducible.Itcanbeusedint
hequalitycontrolofthis
preparation.
【Keywords]Reversedphaseionpairchromatograpy;Dihydralazinesulfate;Compoundre
serpinetablets
复方利血平由利血平,氢氯噻嗪,硫酸双肼屈嗪,盐酸异
丙嗪等组成,其质量
收载于《国家药品标准化学药品地
方标准上升国家标准》第14册l1l,无硫酸双肼屈嗪的含量测
定,不能有效控制药品质量.本文参考有关文献建立高效
液相色谱法测定复方利血平片中硫酸双肼屈嗪含量.该方法
简便,准确,重现性好.
1仪器与试药
Agilenttechnologies1200Series高效液相色谱仪(德
国),Chemstation工作站;precisa92SM一202A—DR电子分析天 平(瑞士);UV一2401紫外可见分光光度计(日本岛津);As
5150AUltrasoniccleaner超声仪(天津奥特赛恩斯仪器公
司).
硫酸双肼屈嗪对照品(中国药品生物制品检定所,批号:
100514—200301,供含量测定用);复方利血平片(常州制药,一
有限公司,批号:09030612,08061314:山西亚宝药业集团股份
有限公司,批号:081031);乙腈,甲醇为色谱纯,水为纯化水, 其他试剂均为分析纯.
[作者简介】吴红英,本科,河南省信阳市食品药品检验所主管药师.通讯 地址:河南省信阳市工区路397号,河南省信阳市食品药品检验所. 62中国当代医药CHINAMODERNMEDICINE 2方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱,AgilentEclipseXDB—Cl8(4.6mmx150mm,5 Ixm);流动相,乙腈一甲醇一1.2%庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节 pH=2.5?0.1)(20:10:70);流速1.0ml/min;柱温28?;检测波 长310nm;进样量10Ixl;理论塔板数不低于3000. 2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备精密称取80?减压干燥后的硫酸 双肼屈嗪对照品l9.64mg,置100ml量瓶中,用水超声溶解 并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液;精密量取对照品储 备液5ml,置25ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得对 照品溶液(每1毫升中含硫酸双肼屈嗪39.28g). 2.2.2供试品溶液的制备精密称取本品适量(约相当于硫酸 双肼屈嗪4mg),置100ml量瓶中.用水超声溶解并稀释至 刻度,摇匀,用0.45I.Lm微孔滤膜滤过,取续滤液为供试品溶 液.
2.3系统适用性
分别取硫酸双肼屈嗪对照品溶液,供试品溶液以及空白 溶剂按"2.1项下"色谱条件进行试验,考察系统适用性. HPLC色谱图见图1.硫酸双肼屈嗪峰保留时间约为9min, 2009年8月第16卷第l6期药品鉴定
A
n
JL—/L
8
C
图1反相离子对色谱色谱图
(A.空白溶剂,B.对照品,C.供试品,1.硫酸双肼屈嗪) Figlreversedphaseionpairchromatograpy
(A.blank,B.referencesubstance,C.sample,1.DihydralazineSuhce】 空白溶剂对测定没有干扰.
2.4线性范围考察
分别精密量取硫酸双肼屈嗪对照品储备液2,5,10,15,
,加水至刻度,摇匀,依次吸取10l 20rnl于50m1的容量瓶
注入液相色谱仪测定,以对照品进样量(Ixg)为横坐标,以峰 面积为纵坐标,绘制标准曲线,并进行回归分析,结果硫酸双 肼屈嗪进样量在0.0785,0.7848la,g范围内,呈良好的线性 关系,回归方程为Y=I.2084x103X一15.4830.99991. 2.5稳定性试验
取同一供试品溶液(批号:09030612)分别在0,2,4…68 10h进样测定,结果硫酸双肼屈嗪峰面积的RSD为1.49%,
明供试品溶液在10h内稳定.
2.6精密度试验
取对照品溶液,连续进样5次,测定硫酸双肼屈嗪峰面 积,结果RSD为0.85%.
2.7重复性试验
取同一供试品(批号:09030612),按"2.2.2项下"供试品 溶液制备方法平行配制5份供试品.分别进行测定.结果平 均含量3.406ms/片.尺SD为1.21%.结果表明本法重复性良 好.
2.8回收率实验
取已知含量的同一批号样品f批号:09030612,含量 3.406mg,片,0.1191g,片),精密称取9份,每份约0.036g, 置100ml容量瓶,分别精密加入对照品储备液4,5,6ml,每
种加入量平行操作3份,按"2.2.2项下"供试品溶液的制备 方法,依法操作测定,结果见表l.
表1回收率试验结果
TablResultsofrecoverytest 2.9样品测定
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1OLL1,按上述色 谱条件重复进样3次,以峰面积按外标法计算硫酸双肼屈嗪 含量,3批样品的含量分别为3.406,3.264,2.795ms/片. 3讨论
3.1测定波长的选择
取硫酸双肼屈嗪对照品适量.用水配成浓度为20txg/ml 的溶液,在200,400nm范围内进行扫描,硫酸双肼屈嗪分别 在310,273,222am处有最大吸收,因222,273llm处样品中 其他成分也有吸收,而310nm其他成分无干扰.故确定为本 实验的测定波长.
3.2流动相的选择
实验中选择不同比例乙腈一水,甲醇一水,乙腈一甲醇一水 做流动相,发现乙腈一甲醇一1.2%庚烷磺酸钠溶液(磷酸调节 pH=2.5~0.1)(20:10:70)为流动相,分离效果好,保留时间,拖 尾因子和理论板数达到理想效果.
【参考文献】
【1】国家药典委员会.国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第 十四册【S】.2003年版.
【21吴艳琳,林志华,汪洋,等.高效液相色谱法测定复方利血平片中4种成 分的含量叫.中国药师,2007,10(6):559—560.
[3】赵雪梅,张淑琴.反相高效液相色谱法测定复方利血平片中6个组分 的含量叨.药物分析杂志,2003,23(5):335,337. 【4]车宝泉.HPLC法测定复方降压片中5个成分的含量[j】.药学, 2004,39(~:618—620.
【5】冀宛丽,赵家太.HPLC法测定复方罗布麻片(?)中硫酸双肼屈嗪的含 量fJ].海峡药学,2008,20(1):41—42.
【6】刘书睿,王芳,路玉锋,等.HPLC法测定注射用阿魏酸钠有关物质?.河 北化工,2007,23(3):59,60,63.
[7】冀宛丽,赵家太.HPLC法测定复方罗布麻片(?)中硫酸双肼屈嗪的含 量[J1.海峡药学,2008,20(1):52—53.
【8]张火旺.HPLC法测定复方罗布麻片(?)中氢氯噻嗪的含量[J】.中国药 事,2007,21(~:727—728.
(收稿日期:2009-06—23)
CHlNAMODERNMEDlCINE中国当代医药63