输异品种兔全血及洗涤红细胞对肠吻合口愈合影响的实验研究

输异品种兔全血及洗涤红细胞对肠吻合口愈合影响的实验研究 输异品种兔全血及洗涤红细胞对肠吻合口 愈合影响的实验研究 一 }?I× ? 研究l《0告? 锍 g眷第3 输异品种兔全血及洗涤红细胞对肠吻合口 愈合影响的实验研究一 !苎孙启龙李占元榇崇恩,中_._法---奎,---格建华/ 疋47 既往一直认为输异体血会促进组织伤口愈 合,然而,近年来研究证明输异体全血可抑制机 体的免疫功能",可能是通过抑制免疫反应 而损害伤口的愈合.消化道吻合口瘘是增加术 后死亡率的严重并发症之一,笔者通过兔输血 模型,研究输异品种兔全血及洗涤红细胞 (WRBC.)对肠吻合愈合的影响,现报告如下 1材料与方法 1.1动物与分组同品系,同月龄成年普通级 日本青紫兰雄兔45只,选7只体重相近者作为 相关分析组(体重25054-3g),另外38只(体重 2512?2)被随机平分成第l,2实验组,每组 再随机分为输全血组(7只),WRBC组(6只), 生理盐水组(6只,对照组);42只同品系,同月 龄成年雄性比利时兔(济南相公实验动物养殖 中心提供)做供血者,全部被单只分隔饲养,颗 粒饲料及饮水任其自由采食,实验开始前均被 观察7d,以排除潜在的疾病. 1.2手术过程及输血术前10,1213全麻 (2硫贲妥钠1.5mg/kg,静脉注射),每只供 血兔心脏穿刺抽血24m1,0.1肝素防凝,取 4ml用作交叉配血,其余20ml放入4?冰箱冷 藏;每只受血兔耳缘静脉抽血4ml,肝素防凝, 供受血兔之间交叉配血;将WRBC组的血液经 交叉配血后置4?冰箱冷藏,于术前l,2h制 成20mlWRBC悬液,制备方法参照文献[6].手 术兔旋以全麻(3戊巴比妥铺lmg/kg,静 注),将它们仰卧位固定于手术台,备皮,75酒 i{ 精消毒术野,铺无菌巾,取腹部正中切口约5cm 逐层切开入腹腔,距回盲部约30cm处结扎系 膜血管,切除4cm肠管一段,断端用0.1新洁 尔灭棉球涂擦清洁,0号丝线间断全层对端缝 合(8,10针),腹壁切口运层缝合;术中失血约 20mr,自耳缘静脉输全血20ml,对照组输生理 盐水20m[,另一组输WRBC20ml,相关分析组 输不等量全血,切口覆盖纱布,包扎,待动物清 醒后进饲养中心.术后2h恢复饮食. 1.3手术取标本及肠爆裂压测定第l组于 术后3d,第2组于术后7d,全麻下经原切口入 腹腔,观察并记录腹腔内渗液,积血,吻合口瘘, ,梗阻等情况,切取包括吻合口在内 脓肿,粘连 的肠管lOcm,注意保存吻合I:1周围粘连组织; 冲净肠管内容物,置测压器(航天部太行仪表厂 制造)上充气测爆裂压,记录爆裂位置;将肠管 自然舒展放置,在距吻合I:1两侧各约0.5cm处 切断肠管.将吻合I:1段肠壁速冻后送检,动物经 静脉注入空气处死. 1.4羟脯氮酸测定参照文献[7],吻合口组 织经称重,碎解,冻干,6mol/L盐酸溶液水解等 一 系列处理后,由日立835—5O型氮基酸分析仪 (t3本制造)测定胶原蛋白的代表氨基酸——羟 脯氨酸含量. 1.5统计学方法各组间均数的比较采用多 样本比较的秩和检验;组间的两两比较采用推 广t检验;相关实验组求不同输血量与晒爆裂 压及羟脯氨酸含量之间的直线相关系数,且建 立回归方程. l250012山东医科大学附属医院;2山东省血藏中心t3山东省卫生防疫站 展 七丁 中国输血杂志1996年第9卷第3期 2结果 2.1第l组?并发症及死亡数:输全血组发 生吻合口脓肿1只,吻合口瘘伴弥漫性腹膜炎 1只,1只术后排恶臭昧稀便,提示并发肠炎,固 麻醉过深于术后立即死亡1只;输WRBC组刀 口轻微感染1只.吻合不全梗阻1只;对照组无 感染及瘘发生.?爆裂压,羟脯氨酸含量测定 值:见表1,爆裂口各组均发生在吻台口处 2,2第2组?并发症及死亡数:输全血组1 只肠瘘伴弥漫性腹膜炎.于术后4d死亡.2只 局限性腹腔内感染;输WRBC组1只并发腹腔 内少量积血,1只发生腹壁刀口渗液,裂开i对 照组无感染及瘘发生?爆裂压,羟脯氨酸含量 测定:见表2,爆裂口输全血组除1只外均发生 在吻合线处,WRBD组和对照组各有2只自吻 合线处爆裂. 2.3相关分析实验组吻合口爆裂压,羟脯氨 酸含量测定见表3.随着输血量的增加,吻台口 爆裂压,羟脯氨酸含量明显降低,呈高度负相关 (图l,2) 表1第1组实验爆裂压及羟脯氨酸含量测定 注:输垒血组爆裂压项5#余=6 表2第2组实验爆裂压及羟脯氨酸含量测定(n=6) l1O 1Oc 罾9o 蛊60 晡 暮 70 6O】 Vt=lO5.56—1.47xo.e6P<L;Oc5 ? ————................... l8243036 固1输血量与弪捕氨酸古量的关系 瑚 谢 壁 车{i皿垣… 固2输血量与爆裂压的关系 .lI6' 3讨论 近年来越来越多的临床实践显示,输血可 一 定程度抑制受血者的免疫功能一.细胞免疫 功能在伤口愈合过程中具有重要的作用,若其 功能被抑制将可能不利于伤口的愈合,因此,明 确输血与吻合口愈合间的关系具有重要意义. 人类输血只作血型交叉配型,组织相容抗 原仍具有较大的差异.供,受血双方选不同品种 的兔,使得组织相容抗原差异加大,可更接近人 类同种异体输血时的实际情形:.在组织愈合 过程中,巨噬细胞Ia抗原表达增加,释放纤维 细胞活化因子,生长因子等,促进纤维母细胞及 血管内皮细胞的增殖和生长.巨噬细胞游走,吞 噬和分泌功能的降低能减弱纤维母细胞增殖, 减少胶原合成Waymack等报告,输血小鼠 巨噬细胞花生四烯酸代谢存在异常,具有强细 胞免疫抑制效应的前列腺素E大量生成和释 放,吞噬能力明显减弱.因此,输血对伤口愈合 的损害与输血f起的巨噬细胞活性降低有密切 的关系.T淋巴细胞产生的巨噬细胞活化因子, 干扰素,IL.4等,有激活并增强巨噬细胞活性 的作用.输血可削弱淋巴细胞对有丝分裂原刺 激的反应,增强Ts亚群活性,抑制m?2的产 生,使T细胞总数减少.因此,输血引起 的T淋巴细胞活性降低及数量减少,可导致伤 口纤维愈合能力的降低. 实验中相关分析组的实验结果提示,在一 些必须输异体全血的情况下,应尽量减少全血 的用量.Kaplan口.等认为,异体组织相容性抗原 可对受血者的细胞免疫功能产生抑制,使巨噬 细胞,淋巴细胞活性降低.一般认为,成熟红细 胞不含白细胞抗原,因此,输用少或无白细胞和 中国{旨血杂志1896年第9器第3期 血浆的WRBC不会对受血者产生明显的免疫 干扰.实验中输WRBC组吻合口爆裂压,羟脯 氨酸含量明显高于输血组,并与对照组问无显 着性差异,表明输WRBC不影响吻合口的愈 合. 实验结果表明,输异品种兔全血可影响瞄 吻合口愈合,其机理可能与输血引起的免疫抑 制有关.输血量越大,对吻合口愈合损害越大, 而输WRBC对吻合口愈合无不良影响. 参考文献 ISpen~RK-eta1.Transfusionandsurgery.CurtProblsurg 1993~15(1Z)l11Z1 2KaplanJ'eta1.DiminishedH~]pef/Suppressorlymphocyte rallosandnatttralkilleractivityinreciylentsofrepeated bloodtransfusion.Blood1984:64'308 8Waymaek-etal_Effectotransfusiononmacrophage? lymphocyteinteractioninananimalmode].AnnSur8 1986l204'681 4W?dML,计a】.Effectbloodt~nsfusionon.2pro. duction.Transfusion1988,48'930 8WaymackJP—eta1.Effectafbloodtransfusiononimmune functlen.Are5Surg1987{182'88 6方軎英,何菊梅.髟响手工法制备洗涤RBC质量因葺的探 讨.中国输血杂志1993}6(z)86 TadrosT-et.Bloodtra~fuslonimpairsthehealing口f experimentalint~tlnalanast0眦螂AnnSurg1992;215 (3){876 8FosterRS,eta1.Adverserelationshipbetweenblood", fusions8ndsurvivalaftercolectomyforcolon?. Caner1985{85:1198 9GillTJ.eta】.Themajorhistocompatlb[1itycomplexofIhe rat.Transplantation1887l43{773 10Barbu]A,eta1.Theeffect.invlvoT—helperandT—sup? pmessor]ymph.ytedepletiononwoundhealing.Ann Surg1989;808{479 (1995—09—19收精{1998—05—03任回) 敬告读者 《中国输血杂志》编辑部可提供下列书刊:《{缶床输血学(41.9/册),{PCR检验技术》(3o元/册),《怎样提高投 稿命中率》(6元/册)和《中国输血杂志~1988,1989,1990,1992,1995年各卷精装合订本,前3年各卷均为15元,后 2年各卷均为20元1994年增刊(血液制品安垒性专辑)3元/册1995年增fl(第4届垒国临床输血学术会议论丈 专辑)4元/册邮局汇款时,务请在附言处注明书名,刊期(年卷)及册数