【doc】视锥光感受器内向整流电流特性和功能

【doc】视锥光感受器内向整流电流特性和功能 视锥光感受器内向整流电流特性和功能 ?1e) Jtin.199915(2)103,109 神经解剖学杂志 (ChineseJournalofNeuroanatomy)一2吖 /7\7/7/,\'矿 视锥光感受器内向整流电流特性和功能. 垫持皇坚 (中国科学院上海生理研究所神经生物学开放实验室,上海200031) 摘要应甩牛蛙槛髓膜博片标车,在缸外可视条件下r运用全细胞记录技术研究了税锥内向整流电流的特性.内向整流电流可 被c8完全阻断.对内向整梳电梳.1控特性分折显示,饿电流的翻转电位约为一35mVPN,/PK约为0.33不显示击活(ine~tiv tion)?最太半教话电压为一88mV?陡度约儿mVI动力学分析揭示,内向整梳电械赣活(activatj咖)相可用楹性相反的双指戥函数 相好地拟音?内向整梳电斌失话(dettj曲)相刚符合单指戥函戥规律.进而.视锥在超极化至一6O,一70mv时产生的电压辟变 成分可为Ca阻断?表明谈反应成分系出内向整流电潍舟导的.上述结果提示r内向整流电流对视锥强光反应具有重要的整搿功 能 芙t词视惟光盛受器内向整流电流门控特性反应动力学 THEPR0PERTIESANDFUNCTIONOFINWARD—RECTIFYINC CURRENTSINBULLFROCCONEPHOTORECEPTORS DuJiulin,YangXiongli (Shanghai]nstltuteolPhysiologyattdKeyLaboratories ofNeurobiology.ChineseAcademyofSciencesrShm~ghal~00031) AbstractInthepresentwork,whole—cell?voltage— clamprecordingsmadefromvisuallyidentified?photoreeeptorsin hall/tog(Ran.6M)retinalslicepreparationsunderinfra-redilluminationtOcharacterizethepropertiesand~unctionof inward— rectifyhagcurrtnts(1h).1hcouldbeblockedcompletelybyexternal5mmol/LCs.Ananalysis.fgatingpropert~sre— vealndthatthiscurrentshowed1ittleinactivationwitharece~aalpotentialof一 35mVandaP/PKpermeabtfftyratioof0.33. Thehalf"一maximumactivationvoltageoflh一 88mVwithaslopeof-11mV.Thekinetictimecoursesofactivationanddeacti— vati0nofhcouldhewelldescribedasaSLImof-cw0exponentialsofoppositepol~[tiesandasingleexponentia1.respectively Moreover.Cscouldabo]ishtransientpotentialsevokedwhenerehyperpolarizedbeyond60,一70mV.indicatingthat thetransientpotentiMsmayhemediatedbykTheseresultssuggestthath-playsamaiorroleinshapingthe?eresponsetO brightlight Keywordscone.inward—rectifyingcunrent.gatingproperties.kineticcharacteristics 光感受器(视锥和视杆)是视觉通路的始端.光 信号在光感受器外段经光电换能产生一个表观上的 超极化电流,该电流在流人内段后引起内段上多种 电压门控离子通道的响应,从而产生复杂的电压变 化即对光反应.因而内段上各种离子电流的鉴定 及其生物物理特性的研究,对于了解光感受器对光 反应形成机制具有十分重要的意义. 在视锥内段上除钙电流(Ica)一,延迟整流钾 电流(IK+)rs],钙依赖钾电流(IK. )H和钙依赖氯电 流(Imc.)[5外,还存在一个为超极化电压驱动的内 向整流电流(I)L5].已有工作提示,I对光感受器的 光反应具有整形作用f-~,C. ?国家科委攀登计划基盘(No39670253),国家自然科学基金(No.39770256),~1上 湃生命科学中心的资助项目 神经解剖学杂志第l5卷第2期1999年6月 以前对I的研究均在酶解的分离细胞上进行. 有工作表明,酶解过程可能造成细胞离子通道和受 体特性的变化,并从而影响细胞的生理状态一.此 外,分离过程也会导致细胞精细突起及其上的通道 和受体的丢失.本研究用视阿膜薄片标本详细研究 了牛蛙视网膜视锥I特性及其生理功能.薄片标 本口的特点是,一方面细胞仍然处在其自身的神经 网络中,更接近细胞的生理状态,避免了分离过程造 成的细胞损伤,从而有利于对I特性的研究;另一 方面可以结合细胞的对光反应等手段来揭示该电流 的生理功能.本文对I在视锥光反应中的作用也做 了较详细的分析. 材料与方法 1.标奉和成象系统 牛蛙(RanaCatesbeiana)(150g左右)从市场购 得.薄片标本的制备详见Wu口和MatsuiDe2等的报 道.实验前将动物暗适应1h,然后在暗红光下用针 锥经枕骨太孔损毁脊髓和脑,迅速摘出眼球,切除其 含角膜和晶状体的前半部,在任氏液中将后半部切 成小片,再将其贴在微孔滤纸上(含视阿膜的一侧朝 下),分离出视网膜.然后从滤纸的另一面用负压吸 除玻璃体,使视网膜紧贴滤纸.用组织切片机将视网 膜切成厚约100p-m的薄片,并以切面向上的方向 将薄片粘贴在记录槽底并用尼龙丝网加以机械固 定.记录槽置于经改装的载物台固定的正置式显微 镜(Zeiss,ACM)的载物台上.薄片的切面通过水镜 (×40,0.75NA,工作距离为2.9mm),光学系统 (Hoffmanmodulationcontrastopticssystem)和红 外摄像系统(Inffa—redCCD),在黑白监视器上观 察, 2.细胞的辨识 视网膜细胞组构在监视器上清晰可见.视锥和 视杆的胞体均处于外核层,易与其它细胞区分.视锥 内段上部(episoild)有折光极强的油滴,在监视器上 比较明亮,且其外段直径远小于视杆外段.根据这两 个形态上的特征,可将视锥与视杆区别开来.在电极 内液中加人荧光黄(IuciferYellow,LY),在全细 胞记录过程中,lY扩散到细胞中,借助于显微镜的 荧光光源,可以清晰地显示出细胞形态. 3灌流系统和细胞外液 细胞外液在蠕动泵(Minipulse3)的驱动下流 人和流出记录槽正常细胞外液的组成(mmol/l) 为:NaC1150,KCI2,CaCl22,MgC121, HEPES10,G[ucose10,pH7.8,渗透压310 mOsm.为阻断Ix+,I,I叭和I用等渗的 TEACI,4AP和Co取代NaCI,此时外液组成 (mmol/I)为:NaCl100,TEA—Cl30,4-AP5, KCI2,CoCI22,MgCI11.HEPES10, Glueose10,pH7.8,渗透压310mOsm. 4.记录系统 记录电极是用外径为1.6mm的厚壁CGl7 玻璃毛胚在两步电极拉制仪(PB一7)上拉制而成,阻 抗为8,12M0.电极内液组成(mmol/I)为:KCI 40,KF100.5,NaCI3,CaCI20.1,MgCI2 0.4,EGTA1,HEPES10,IuciferYellow0. 1,pH7.7,渗透压300mOsm.由于水镜的工作 距离短,为增大电极尖端和细胞表面的接触角度,提 高细胞巨欧姆封接的成功率,在距电极尖端750m .电极尖端在接触细胞表面前 处将电极烧弯约60度 从电极尾端施加约50cnl水柱的正压,用以清洁电 极尖端和被记录细胞的表面.当电极尖端接触到细 胞表面时,撤去正压,电极尖端和细胞表面便可很快 地形成巨欧姆封接.此时,施加脉冲式负压,吸破细 胞膜,形成全细胞记录.在视锥胞体和内段下部 (myoid)处记录,结果无明显差异. 全细胞记录时,由pCIAMP6.02产生的指令 电压或电流施加于被记录细胞所引起的电流【电压 钳记录)或电压(电流钳记录)经钳位放大器(CEZ一 2300)和A/D—D/A(DigiData1200A)后,再由 pCIAMP6.02采集和处理,并记录于计算机的硬盘 中.采样频率为2.5kHz,滤波频率为1kHz. 结果 1.税锥h分爵 本实验用细胞外液中TEA,4-AP阻断I+.同 时用Co阻断k",Ic和IxFig.1A显示在不 同指令电压下视锥所诱导的电流,钳位电压为一40 mV.当施加去极化电压时,细胞产生一个较小的外 向电流,且无时间依赖性;超极化电压则诱导一个随 时间变化的内向整流电流即I.在外液中加人5 mrnol/ICsCI则可完全阻断该电流此时,在整个 测量电压范围内,只留下一个不依旗于时间的电流. 这个残留的电流成分可能是细胞的被动膜电流或蒲 电流.因而,本实验在以下的数据处理中均减去这个 杜久林等:视锥光感受器内向整流电流特性和功能 电流成分.Fig:1B是该视锥在加人CsC1前后的电 流一电压关系.加人CsC12前,在一40mV,2OmV范 围内,细胞的电导基本不变,约0.5nS;而在一160 mV一60mV范围内,Ih被澈活,表现为细胞电导显 着增大,在该细胞中其斜率电导达5nS左右.加人 CsCIz后,在整个测量电压范围内,电导保持在0.5 nS附近,基本不变. A B 口 Fig.1Effectsofcaesium?If,A.Currentsevoked fromabullfrogconebyvoltagestepswithaholding【 tentialof一40mV.Thevoltagepulsesw~2rt~between — l6Oand20mVli1increme~tsof20mVTheeel【 …superfusedwithRinger'ssolutionwithout(contro1) andwith(Cs+)5mmol/LCs—B,Vrelationsof lhofthecelldeterminedinRinger'ssolutlonwitbout (titledsquares)andwith5mmol/Lcaesiumtopenclr cles)Thesteady-statecurrealuhownLn(A) wereplottedagainstthestepvoltage. 2.视锥I门控特性的分析 2.1翻转电位(Erev)和离子通透性 本实验运用尾电流方法测定视锥I的翻转电 位(Erev)…一,如Fig.2A所示,先将钳位电压从一40 mV阶跃到120mV并保持400ms,待充分澈活I 使其达到最大值后,再分别阶跃到一80mV,20mV (间隔10mV)的测量电压上,从而得到的一组电流 即为Ih的尾电流在从一12OmV阶跃到各测量电压 这一时间点上(即t一0,测量电压的始端)时,Ih通道 还未及进入失活状态,尚仍处于激活状态.随着时间 的推移,通道逐渐失活因而,在不同测量电压的始 端,通道的电导值相同.但由于此时各测量电压上电 流的驱动力(E—Erev,E为测量电压)不同,从而导致 尾电流大小(I)不同.根据: ,一G(E—E)(1) 得:Erev=E—I/G当I一0时,Erev—E. 为测得Erev,需知在各测量电压下t一0时I 尾电流的大小(用Iv表示),从而得到尾电流的电 流一电压曲线,该曲线与电压轴线的交点即为Erev. I尾电流能很好地为下列单指数函数所拟合 (见Fig.2A中的虚曲线) 0)=lexp(一(一)/r)+(2) A B . // 7…Fig2Determinationofthereversalpotenc】al0fIhA.h. 【ajlturrentslnducedfYotllacofleThemembranepo teatia『oftheeell…steppedfromahoIdtngpotential of4OmVt0一l20mVfor400nactivateI】.After Ihreachedamaximalvaluethe删brahepotential wasfurthersteppedfor400msfrom一80to20mV?tl ~rementsofl0mV(testpotentia[s)Thedottedc…e superimposedoi1thetailcurrentgarefittingsingleex ponentla[sThedottedvertica『linerepresentsthe…I uesofLa】lcurenobtainedwithhackextrapolationto thestartingpoiatofthestpolentiaIsB.】…V— lationoftheI】Itai【cul~en[softhecell 106神经解剖学杂志第15卷第2期1999年6月 经单指数函数拟台后反推获得一组I..(见b Fig.2A中虚直线处的拟台值),依此值得到的电流一 电压曲线见Fig.2B.由图可得该视锥I的Erev约 为一32.1mV.在所测量的5个视锥中,I的平均 Erev一一35.4:k3.9mV士).电流一电压曲线近似 为斜率约2.3的直线,这表明I通道在各测量电压 的始端电导值相近,约为2.3nS. 以往的文献_1报道Ih通道主要通透Na和 K,按本研究的实验条件和GHK方程 Erev=(RT/F)ln"[+尸?口/P[Na) /{[K+P/P[Na)J(3) 可以计算出视锥I通道对Na和K的通透比 (PN/PK)为0.33?0.03(士). 2.2激活曲线和去活曲线 在Fig.3A中,先将视锥从一40mV分别阶跃到 0mV,一110mV(问隔10mV)的条件电压上,待Ih 充分激活后再阶跃到一120mV的测量电压上.分别 取条件电压和测量电压结束前25ms时的电流值, 按方程(1)计算出相应的的电导值(G),从而得到I 的激活曲线和去活曲线.Fig.3B是7个视锥的统计 结果.去活曲线可近似地为G/G一一1的直线所描 述,表明I不去活,实际上从Fig.1A,Fig.2A和 Fig.3A中的Ih反应曲线可直观地看到这一点.而 激活曲线则能很好地为下列形式的Boltzman方程 所拟台. G/G:{1+exp{(—V^)/s)(4) 其中G为电导值,G一为最大电导值,Vh为最大半 激活电压,S为曲线陡度.曲线拟合的结果为Vh=一 88.3mV,S一10.6mV. Ae Fig.3Act[vationand【nactivationCUffVeSofIhofCODES. A.kmsevokedfromabyvoltagestepsfor400 m5fromaholdingpotentialof一40mVtO一110and0 l?V1n【?en协ofl0mV.Thecurrentva]tlesdeter— minedat25m.qbeforetheendofvoltagesteps(dotted IinerRarkedbyafilledcircLe)wereusedtoealcu【&rethe correspond;ngcO~uctancesofhatdifferent0】tage stepsThemembranepotentialwBsthenfurther steppedfor400to120mVandtheconductancesof k呲re—determined(dottedJLnemarkedbyanopen circle)Theprotocol;sshownbelowthecHrffe~t trR~e$.BActivation(fiLledcircles)andnact[va— tion(opencircles)curvtsofkof?s(n=7).Con duefances(G)determinedIn(A)weTenormalized;n termsoftheextrapo[atedmaximumalue(Gx)Vh andErevrepresentthehail—maxima[activationvoltage andthereversa】potentia1.respectively{E1.E2andE3 indicatetherestingmemhra~potentialsofconesin darkness.hyperpolarizingresponsestodimandbright flashesofttght.respectively.ErmrbarsareSD. 3.视锥I动力学分析 3.1激活相的动力学分析 对记录的19个视锥,从高于一40mV的条件电 压阶跃到各个测量电压上时,如Fig.4A所示,所产 生的I可为下列双指数函数所拟台. 0)=1,exp(一(z一^)/)+11exp(一(t-k)/)+(5) 其中,I,,和In分别为慢成分和快成分的电流幅 值和时问常数,I为稳态电流值.Fig.4A中虚线为 拟台曲线.Fig.4B和Fig.4C分别显示Fig.4A的电 流经拟台得到的时问常数和电流幅值与测量电压的 关系.L具有电压依赖性,即随负向电压的增大而 减小,这表明I的慢,快成分均随视锥的超极化而 加快,且r在各电压上均大于L和h极性相反, 均基本无电压依赖性,而I随细胞超极化而增大. 杜A林荨:视锥光感受器内向整械电梳特性和功能107 A B C 100 0 Fig4KineticanalysisoftheactivationphaseofkA,Ih wasevokedfromaCODebyvoltagestepsfor400ms fromaholdingpotentialof一40mVtO一160and一40mV lnlneTement~l0f20mVActivationphasesofIhwel'e wellfitwithdouble—exponemJa]functions0{opposite dependenceof polarity(dottedcu~es),B,Voltage— thehstandslowtimeeonstant~oftheactivationphase ofhC.Vottage-dependenceoftheamplitudesof thefast.slowandsteadycomponentsoftheactivation phaseofIh 3.2失活相的动力学分析 如上列2.1所述,本研究已经看到1的失活依 照单指数函数(方程(2))规律为了进一步观察失活 过程的电压依赖性,又利用方程(1)将Fig.2中尾电 流曲线转换成电导曲线(Fig.5).从图中可以看出, 在t一0ms时,各测量电压上I通道的电导值基本 相同,约为2.0,2.4nS(即为Fig.2B中的斜率电 导值).随后,通道进入失活相在一8O,一50mV之 间,失活相对较慢,但随细胞去极化程度的加深,失 活显着加快.当电压去极化到一10mV时,失活接近 最快速度.由于一4OmV和一3OmV接近1的翻转电 位,此时电流很小,干扰相对较大,曲线不能真实反 应I-.通道失活过程,图中未给出这两条曲线. Fig5KineticanalysisofthedeactivationphaseofIh. Conductancesoflhtailcurrent5determined?cvarious voltage*qweredepicted?functmnoftime. -5—] l_70rrlv 0 - 1SPA ]一 Fig.6Physiologiealfunctionof.Membranevoltagesin responsetohyperpolarizingcurrentpulsesof15pA rtobtainedundercurrencclampinaconebathedin Ringer'ssolutionwithout(contro1)andwith5mmol/L C$(Cs+).respectively. 4.视锥1h的生理功能 上述实验结果(见Fig.3B)显示,只有当视锥膜 电位超极化到约一5OmV以下时,1才被激活.由于 视锥在暗中膜电位及其对弱光反应在一3O,一45mV 左右,这时T基本不能被激活;而在强光反应中可 超极化至一70mV附近.从而激活Ih,产生内向电 流,使细胞向去极化方向发展. 为此,本研究采用电流钳记录方式,在正常细胞 外液中,向视锥内注射15pA的超极化电流,用以 模拟细胞的强光反应(Fig.6).当电流注入时,视锥 }中经解剖学杂志第15卷第2期19g9年6月 膜电位迅速超极化,在约一70mV处,产生一个瞬变 的膜电位向去极化方向的回跳,类似于强光反应中 的瞬变成分":在加A5mmol/I的CsCI阻断I 后,膜电位则维持在恒定水平,不再出现回跳这说 明视锥强光反应中的瞬变电压成分是由In介导的 讨论 1.视锥h的特性 从对宏观电流的动力学分析中可以了解介导该 电流的离子通道的生物物理特性.根据1在激活相 所表现出的极性相反的双指数函数特性以及失活相 的单指数函数特性,按Hodgkin—Huxley的离子通 道动力学模型理论,此时的1h通道具有两个关闭 状态(c和c)和一个开放状态f(=1),即: Cl#C2}0 在条件电压下通道处于C,进入激活相后,通道必 须经过C:后方能进人开放态0,从而在电流曲线上 表现为一个时间上的延迟,体现出双指数函数的规 律.失话时,通道只需经过一个开放态.即可进人 关闭态C,从而表现为单指数函数的规律. 牛蛙视网膜视锥Ih半激活电压接近一90mV,与 在虎蝾螈和蜥蜴分离视锥上所得到的结果(一65, 一 80mV)"'有所差异.此差异固然可能是由于动物 种属不同所造成,但更可能是由于视网膜薄片标本 更接近细胞的生理状态的缘故.与此相似,在薄片 上,本文作者等的观察(未发表结果)和他人的工 作一均显示,视锥Ic:+在一40IllV时即可激活,而 Barnes等"在分离的视锥上发现,必须去极化到 10mV左右才能激活IC.2+. 2祝锥Ih的生理功能 视锥内段电压门控离子通道,一方面参与维持 暗中细胞膜电位,另一方面参与形成细胞的对光反 应.在暗中,视锥的膜电位约一?,一4omV(见 Fig.3),对弱光的反应只有几十mV的超极化, 据本文的实验结果,在这个电压范围内1通道处于 关闭状态或仅有百分之几(约0.2nS)被激活,同时 由于这时的电压驱动力(EErev)只有几个mV,激 活的1n也就很小,因而它对暗中膜电位的维持和弱 光反应的形成作用很小.有的工作显示,当加人 足够量Cs阻断I的情况下,光感受器的膜电位和 暗光反应并未受到明显影响;而强光刺激时,视锥可 超极化至一70mVlI,此时约有25的Ih通道被激 活(约1.25nS),产生40pA左右的内向电流.由于 此时细胞电阻约为0.2,0.5GF*,因而该电流能使 细胞去极化达10mV左右,从而使视锥在对强光的 反应中形成一个几mV的瞬变电压成分. 1对视锥强光反应的上升相,最大超极化幅度, 持续相和下降相各有何种不同影响?根据视锥光电 流'1和1两者激活相动力学的比较,可知在强光反 应的上升相中,I已被激活,这一方面使得上升相变 慢,另一方面使其最大超极化幅度变小.在持续相中 则产生一个上述的瞬变的电压成分.当视锥在撤光 后回到暗中膜电位水平(一3O,一40mV)时,虽然In 通道失活缓慢(Fig.5),在相当长的时间内仍处于开 放状态,但由于此时通道的驱动力只有几个mV,所 产生的电流很小,因而1n在这种状态下对强光反应 的下降相几无影响;如果视锥在撤光后回到一50mV 或更低的水平(如明适应状态),这时一方面由于1n 通道失活更为缓慢,另一方面,通道驱动力较大,从 而产生持续较长,幅度较大的I尾电流.在这种状 况下I必然会影响强光反应的下降相上述分析从 Fig.6中可以直观地看到:【h踪了形成一个瞬变电 压成分外,还使得电压反应的上升相变慢,最大反应 幅值略有减小.1对强光反应上升相的延缓,瞬变成 分的形成,实质上是在时域中对视觉信号频谱特性 的调谐. 结合Maricq等,Hegtrin[:和Barnes等的 工作可以看到,视锥In与视杆相比,激活快,幅度 小.这些差异可能是导致视锥强光反应和视杆强光 反应波形有所不同口..的原因.从1h激活速度的差异 推知它在视锥中较视杆更早地介人到强光反应的上 升相中,使前者强光反应上升相慢于后者;而视锥I 较小的幅度则表现为视锥光反应的初始瞬变电压成 分比视杆的小. 本工作承蒙国家科委攀登计蜊基金,国家自然科学基金 和上海生命科学中心的资助,谨致谢忱 (收藕1999,02一aT) 参考文献 [1]KamiyamaY.OguraT,UsuisionicCUFren~modelofthe, tebraterodphotoreeeptor.VisionRes.1996.36,4059,4076 [2]SavchenkoA.BarnesS.KramerRHCyclic—nudemidegated channelsmediatesynapticfeedbackbynitrideoxideNature, 1鲫7}390694,698 [司MaricqAV,Korenhrot儿Pot—iumcurre?bitheierseg- 杜久林等:税锥光癣受嚣内向整流电流特性和功电109 mentofretinalconephotorecepto~.JNeurophysio[,1990B4: 1929,1940 [4]BarnesSAftertraneduction}responseshapingandcontrolof transmissionbyionchannelsofthephotoreceptorinnerseg- ment.Neuro~Ciance.1994:581447,459 [5]Mar[cqAV.KorenhrotJI.Calciumandcalcium—dependeat chloridecuri~ntsgenerateactionpotentialsinsolitaryconepho— toreceptorsNeuron?1988:1:503,515 [63MaricqAV,KorenhrotJI.Inwardrectificationintheinnerseg— mcntof目ingleretinnlconephotoreceptors.】Neurophysiol, 1990}64:1917,1928 [73HestrinS.Thepropertiesfunctionofinwardrectificationin rodph0t.recept0rs.fthetigersalamander.JPhysiol(Lond). 1987{390:319,333 [83McCarrenM,AlgerBE.Papoineffectsonrathippoeampa[ neur0?intheslicepreparationNeurosc[Lett.1987{78:307, 310 [83WuSMSynapticconnectionsbetweenneuronsinlivingslices ofthelarvaltigersalamanderretina.】NeurosciMeth,1987; 20:139,150 [1O3MatsuiK.HosoiN.TachibanaM.Excitatorysynaptictrans— missionintheinnerretinaIpairedrecordingsofbipolarcells andneHronsofthegang]ioncelllayerJNeurosc1.1898;18: 4500,45l0 [11]SonthehaerHWhole—cellpatch—clamprecordings.Neu— romethods,1992{26:37,53 [1Z3BederCR.BertraodD.Effectsofchangesofintra—andextra- col】u]arsodiumonthelnward(anomalous)rectificationnsala— manderphotoreceptors.JPhysiol(Lond).1984{347;611,631 E133HodgMnAL?HuxleyAF.Aquantitativedescriptionofmem- braecurrentanditsappilcationtoconductionandexcitationin 腿rve.JPhysiol(Load),1952}117:500,544 [143YangxL,WuSM.Responsesensitivityandvoltagegainof therod一8ndcone-horizontalcellsynapsesindarkandlight- adaptedtigersalamanderretinaJNeurophysin1.1996;76; 3863~3874 [183"J~oresonWB.NitzanR,MillerRF.ReducingextraceUular CI—suppressesdihydr0?dinefitLveCacurrentsand synaptictransmissioninamphibianphotoeceptors.JNeuro— physio[.1997}77:2175,2185 [16]BarnesS,BuiQModulationofcalcium—activatedchloridecur— k,~ntviapH-ioducedchangesofcalciumchannelpropertiesin conephotoreceptors.】Neruose,1991{11I4015,4023 [173Bay]orDA.Photoreceptorsignalsandvision.IVOS.1987:28: ,49 [163BaylorDAtIv{atthe~rsG,Nun?BJ,Locationandfunctionof vohag~sensitivecoeductancesinretinalrodsofthesalamander ^mbD'tie…JPhysiol(Lond).1984;354:203,223 [19]McNanghtonP.Lightresponseofvertebratephotoreceptors. PhysinlRev.1990{70:847,684 [203BarnesS.HilinBIonicchannelsoftheinnersegmentoftiger salamandercQnephotoreceptorsJGenPhysio1.198994}7l9 ,743 [213YangxL.WuSMModulationofrod—conecouplingbylight Science.1969;244:35Z,354