非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体P-gp活性影响的随机、安慰剂对照研究

非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体P-gp活性影响的随机、安慰剂对照研究 非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体 P-gp活性影响的随机、安慰剂对照研究 韭塞韭塑定体卤拯盐法.壶窒垒剂量黄蓝趋盘 厶体 里:盟适眭曼煎鲍随狃:塞慰剂盘照珏究 ? 厂 作者签名: 型盔 指导教师签名: 论文.平阅人:盆麴』副圭堡药痖』逝江太堂医堂陡啦届箜三医院 平阅人:搂送型』型圭廷药垣』逝婆太堂医堂睦随属簋三匡瞳 评阅人:王建壬』副圭堡药垣』浙江省主医院 答辩委员会主席:麽』二缝』圭堡垫瘟』逝塑太堂医堂睦隘届箜三医睦 委员:垂胜造』盈究员』逝婆省医堂牡堂瞳 委员:至堑圭焦荭痖』浙塑太堂医堂陡隘属童健健匡暄 委员:丢亟蕉』副圭堡医垣』逝婆太堂医堂瞳隘属箍医院 委员..阮邹苤副盟究虽』逝江太堂医堂瞳瞄属箜三医院 . : 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研 究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表 或撰写过的研究成果,也不包含为获得浙江太堂或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示谢意。 ? 签字日期:。口 年月。日 学位论文作者签名:叶景 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 浙婆太堂.有权保留并向国家有关部门或机构 送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江太堂可以 将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 保密的学位论文在解密后适用本授权书 学位论文作者签名: 导师签名: 叶磊 胁 签字魄划。年‘月?日 签字魄‖多铲仁善致谢 致 谢 本论文是在导师周权主任的指导下完成的。周老师本着严谨求实的治 学态度、踏实苦干的精神、活跃的学术思想和渊博的专业知识,不仅是我 工作和学习上的楷模,也将引导我走过今后的人生道路。值此论文完成之 际,谨向周权老师致以崇高的敬意和衷心的感谢 感谢浙江大学医学院附属二院药剂科对我工作方面的支持 浙江大学附属第一医院临床药理中心提供了良好的学习和实验的环 境,浙江大学附属第二医院临床药理室阮邹荣、袁虹老师在试验和统 计方面的指导,感谢浙江大学附属第一医院临床药理中心申屠建中主 任和吴丽花老师在实验方面的指导和帮助 感谢实验室的胡兴江、朱梅湘、黄明珠、吴国兰等同志在实验上的帮 助感谢江波同志在人体志愿者实验中的帮助感谢汤姝岚、朱勇、高强 等同学在实验上的协助在此表示衷心的感谢 最后还要衷心感谢一贯支持和照顾我的父母和所有其他关心、帮助过 我的人们中文摘要 浙江大学硕士学位论文 非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体.活性影 响的随机、安慰剂对照研究 浙江大学药学院 药物分析学 级硕士研究生 叶蓁 导师 周 权 中文摘要 日的: .探讨黄芪颗粒对人体.活性的影响,以预期黄芪颗粒与常见合并用药相互作 用 的临床可能性; .考察在中国人中 和 基因多态性对非索非那定 药动学的影响; .考察黄芪颗粒对 和 不同基因亚组的影响。 方法: .首先建立血浆浓度的测定方法。以乙腈直接沉淀法处理弘血浆样品, 高速离心后上清液吹干,复溶后直接进样分析。分析柱: 色谱 柱.,;流动相:.?.醋酸铵溶液.乙腈:,/; 流速:?~,检测器:荧光检测器激发波长为,发射波长;以 苯海拉明为内标,用内标法定量,进行色谱确证试验。 .设计一项随机、双周期、安慰剂对照临床试验,以药动学参数作为人体内 , 活性的探针。名健康男性志愿者随机口服黄芪颗粒 或安慰剂 多剂量连续服用一周后,服用探针药物片,采集不同时间点的血浆,经色 谱测定和..统计软件分析,选择非房室模型计算药动学参数,并进行生物等 效 性统计分析。比较安 广中文摘要 浙江大学硕士学位论文 和 .利用黄芪颗粒.相互作用研究中志愿者全血样本,检测 两个位点的突变情况,对不同基因型亚组中的药动学参数进行数 据挖掘。 结果: .本研究建立的色谱方法专属性强。在. /浓度范围内线性良好 .,。定量限为 /。高、中、低质控样品的日内、日日均小于 %,方法学回收率为.%,提取回收率为.%。 . .在安慰剂组中,的药动学参数:/ ..;戤. /; 。嗽.. ;../%;一../木。 .:. .钍. ;啪 在黄芪颗粒组中,的药动学参数:/ /;砒 .. /木。黄 ;.. ‖宰;.... 芪颗粒对的药动学影响无统计学意义.。片在服用安慰剂组和服用 黄芪颗粒组中人体内生物等效。与国外文献报道相比较,发现戤、和的差 异无统计学意义.,陀与国内文献报道值..较为接近,但小于 国外文献报道的.:.。 .名健康志愿者中 基因型的分型结果:野生型纯合子; 突变型纯合子、突变型杂合子。 基因型分型结 果:;。 . 基因型与非索非那定药动学关系:突变基因携带者中, 的/要高于野生型基因型携带者中的数据、、,.。 在黄芪组中,未观察到/的基因剂量效应、、?、、 , .。通过比较安慰剂组和黄芪组中相应基因型的药动学参 数,发现/的差异具有统计学意义.,/安慰荆/黄蓖组。 .在安慰剂组中的参数并没有呈现 的基因剂量效应。黄 芪颗粒预处理后,与 野生型纯合子相比,突变型杂合体携带浙江大学硕十学 位论文 中文摘要 . 者中的呦有升高迹象. ../,.。 结论: .本实验建立的冲.法快速简便、灵敏、专属、准确,可用于的临床药 动学研究; .黄芪颗粒预处理一周不会显著影响人体?活性,但它的影响具有 基因型依赖性。在 基因型分亚组的情况下,显示了黄芪颗粒对. 的影响。黄芪颗粒对野生型等位基因个体中的.有一定的抑制作用。野生型 个体中的 .受到的抑制作用程度要大于突变型个体中?受到的抑制作用程度。 .肖除速率可能存在民族差异性,值得进一步研究。 .黄芪颗粒预处理一周对中国健康志愿者 活性可能有抑制作用。 关键词: 非索非那定, 黄芪,糖蛋白, 底物探针, 药动学, 药物基因组学 浙江大学硕士学位论文 英文摘要: , :: : : . ; . 。 : . .,. ./.,. ,/ /. . . . . 浙江大学硕士学位论文 英文摘要 . ,,,? , . ?... ? ... ... . : ., . ~ ./.,,/. %.一. .%..%. . :/.. ”;. ./;“.. ;.../木;一.../宰。 ::/..;戤.钍../;舣.. ;.../轧;一.士../ 牢. .. . ’ , .. . 缸, , .。 . : ,; ,; :; ,。 浙江人学硕士学位论文 英文摘要 。 。 ,/ ,,,..? /,,号,,,.. / , .,/ /。 ..懈. .? . ./,., . : . ,,,, ; . ? ?. ? ... . . . ?. :, ,, , , 浙江大学硕上学位论文 缩写、符口.清单、术语 缩写、符号清单、术语 缩写 中文全称 英文金称 .糖蛋白 ? ? . 细胞色素 ”有机阴离子转运多肽多药耐药基因的编码基因单核苷酸多态性 非索非那 定 . 反相高效液相色谱法 质谱法碳十八烷基键合硅胶 最低定量下限 相对标准偏差 样本标准差 血药峰浓度 达峰时间 血药浓度.时间曲线下面积 半衰期 / 平均滞留时问滞留时间方差 /表观清除率消除速率常数药代动力学 聚合酶链反应 正电子发射显像 浙江大学硕:学位论文 目次 目 次 致谢??.. 中文摘要?一 英文摘要?. 缩写、符号清单、术语表? 目次 第一章引言. 第二章.测定.探针底物非索非那定的血药浓度 第三章非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体活性影响的随机、 安慰剂对照研究 第四章和基因多态性对非索非那定药动学的影响? 参考文献? 综述?.. 作者简历及在学期间所取得的科研成果引言 浙江大学硕上学位 第一章 引言 .糖蛋白,?是由个氨基酸组成的跨膜蛋白,分子量 为。它在大肠及小肠的黏膜、血脑屏障、睾丸毛细血管上皮细胞、肝细胞、 肾上腺及肾近端小管均有分布,是人体重要的转运体。 .在药物吸收、分布、代谢及排泄方面有重要的作用【’.在吸收环节, 分布在肠粘膜上皮细胞部位,功能是将底物外排泌至肠腔中,其作用是限制 药物 的吸收。在分布环节,存在于脑毛细血管内皮细胞上的?参与了血脑屏障的外排 作用。抑制.能够影响其底物的组织分布,进而改变它们的消除速率以及毒性特 别是在中枢神经系统毒性方面。在代谢环节,起到相当重要的作用。因为 与.底物存在显著的重叠性,而且两者在小肠、肾及肝可联合表达。当 药物分子横跨肠上皮细胞的腔膜面以后大部分药物可被?从上皮细胞泵回到肠 腔,其中一部分会被重吸收。在反复的泵出和吸收过程中,延长了药物在细胞 内的停留时间,增加与肠壁药物代谢酶特别是的接触时间,从而提高药物 在肠道内的代谢。在排泄环节,胆小管膜上的?起到药物的外排作用,是药物自 胆道排泄的重要转运体之一。肾小管也分布着.外排转运体,它的功能是阻止药 物的重吸收。 的底物、诱导剂和抑制剂见表.。 底物 抑制剂 诱导剂 利福平. 抗癌药:长春新碱,多柔比星,米托蒽醌,长春碱,放线 激素:黄体酮,睾酮 贯叶连翘 菌素,柔红霉素,依托泊苷,丝裂霉素,紫杉醇,表 柔比星 提取物 抗真菌药;伊曲康唑,酮康唑 受体阻断药:布尼洛尔,塞利洛尔,他林洛尔 钙拮抗荆:非洛地平,尼卡地平,硝苯地平, 强心苷:地高辛 尼群地平,维拉帕米 .还原酶抑制剂:洛伐他汀,辛伐他汀,普伐他 抗心律失常药:胺碘酮,利多卡因,奎尼丁’ 汀,阿托伐他汀,瑞舒伐他汀 抗病毒药:茚地那韦,利托那韦,沙奎那韦,奈非那韦 蛋白酶抑制药:奈非那韦’,利托那韦‘,沙奎 那韦’,茚地那韦’ 免疫抑制药:环孢素‘,他克奠司‘ 免疫抑制药:环孢素,他克奠司,雷帕霉素 抗菌药物:红霉素,左氧氟沙星,利福平 红霉素’,罗红霉素,克拉霉素 其他药物:吗啡,苯妥英,多潘立酮,地塞米松,西咪 其他:米非司酮,特非那定,卡维地洛‘,葡 萄柚汁 替丁,奎尼丁,维拉帕米,非索非那定,银杏黄酮,芦 丁硫酸酯 注:摘自周权.临床药物代谢动力学与药物相互作用.曾苏主编《临床药物代谢动力学》.浙江大学硕士学位 引苦 人民卫生出版社,,北京. 因此,调节.可以影响.底物的生物利用度、血浆峰浓度、表观清除率、 药一时曲线下面积等药动学参数。传统意义上讲,通过介导的药物代谢的改 变,是许多药物相互作用的原因。但越来越多的事实表明,一部分被认为是代谢 消除改变导致药物相互作用的,其实是因为改变了转运体的活性造成的。.介导 的相互作用最为常见。基于.机制的相互作用往往会使其底物的疗效增加, 生物利用度提高,这一点可以被临床所用,但同时也应注意毒性也可能随之增加。 通过对.诱导的相互作用常导致被诱导药物清除率增加或生物利用度和血药浓 度下降,从而减弱疗效。另外,近年来基于机制的相互作用也越来越引 起研究者和临床的重视。 植物药、天然产物 化学药的相互作用问题越来越 受到药物研发部门、临床药理与临床药学部门的重视【。】。在体外实验中,银杏、‘ 人参皂苷、奶蓟和类黄酮中的水飞蓟素、辣椒素、白藜芦醇可抑制.的活性;浙江大学硕士学位 引言 肾病综合症等多种疾病,临床应用十分广泛。黄芪中已有多种成分被证实和分 离,主要的有效成分例如黄芪多糖、黄芪甲苷和黄芪异黄酮等。黄芪制剂一 般需 要长期服用,临床剂量的黄芪制剂是否影响.和的活性,继而影响? 和底物的临床药物代谢动力学,目前未见文献报道。另外,迄今为止, 人体内.活性尚没有直接的测定方法,一般采用体内探针的方法。利用非索非那 定药动学参数为指标,可以考察.介导相互作用的研究。 本研究以非索非那定药动学参数作为体内./舌性的探针,通过观察黄芪颗粒 对非所非那定人体内药物代谢动力学的影响,来探讨黄芪对.活性的影响,以预 期黄芪颗粒与常见合并用药相互作用的临床可能性。同时,非索非那定是?和 的双重底物【】,在中国人和基因多态性对其药动学是 否有影响,尚未见文献报道。 鉴于 和 的较高发生频率,我们通过测定黄芪颗 粒.非索非那定相互作用研究中志愿者 和 两个位点 的突变情况,来综合考虑不同的基因型对非索非那定转运吸收、分布和排泄 可能带来的影响、与黄芪颗粒.非索非那定药动学相互作用程度的相关性以及黄芪 颗粒对 和 不同基因亚组转运体活性的影响。 本研究获得以下基金项目资助:浙江省中医药管理局科技计 划、国家自然科学基金项目编号。浙江大学硕十学位 第二章?测定.探针底物非索非那定的【药浓度 第二章冲.测定?探针底物非索非那定的血药浓度 非索非那定,是特非那定的活性代谢物,它没有心脏毒 性和镇静不良反应,代谢性相互作用风险极低,因此,临床优势明显。的血药 文 浓度测定方法国外已有报道,包括.。和.荧光检测法【】。 献报道的人血浆样品处理方法为有机溶剂提取方法或固相萃取法,这使得样 品 处理比较繁琐、成本较高,且所需血浆体积较大。本实验首次报道用%纯乙腈 直接沉淀血浆蛋白,高速离心后取上清液吹干,%甲醇溶液复溶后直接进样, 采 用荧光检测法测定的血药浓度。方法准确、灵敏、快速和简便,可用于 的药动学研究。 . 仪器与试药高效液相色谱仪、 荧光检测器、 色谱处理软件美国沃特斯中国有限公司、离心机德国 公司、旋涡混合器海门市其林贝尔仪器制造有限公司。.. 药动学软件皖南医学院弋矶山医院孙瑞元教授编制。 对照品批号,含量.%,浙江省食品药品检验所,非索非 那定片剂莱多菲,,批号:,浙江万马药业,内标苯海拉明批 号:., 含量.%,中国药品生物制品检定所。醋酸铵为分析纯,乙 腈和甲醇均为色谱纯。浙江大学硕上学位 第一二章?测定探针底物索那定的血药浓度 使成./的贮备液。精密吸取该贮备液至棕色量瓶中,加甲醇摇匀 并稀释至刻度,使成工作溶液 /,置。冷藏备用。 精密称取苯海拉明对照品.至棕色量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻 至 度,使成. 棕色量瓶中,加甲 /的贮备液。精密吸取该贮备液 醇摇匀并稀释至刻度,使成内标工作溶液 /,置。冷藏备用。临用前 再用甲醇稀释至 ?一。 ..血浆样品处理 精密吸取血浆样品 置. 离心管中,加入 苯海拉明 内标溶液 /,涡漩混匀秒后,再加入 乙腈,涡旋混匀秒钟, %甲醇溶液复 ?‘离心。取上清液室温下用纯氮气吹干,残渣用 溶后,直接注入色谱系统。 ..方法专属性考察 取份不同的健康人空白血浆,按“..”项下处理,记录色谱图,发现内源性 成分不干扰出峰。的出峰时间为,药物峰形尖锐、对称。内标保留 时间为.。整个色谱分析周期为.。 ..标准曲线的制备 用空白血浆将稀释成相当于血药浓度为,,,,,/ 的系列质量浓度标准血浆,按“..”下操作,以峰面积与内标峰面积比值 对质量浓度/进行线性回归,得标准曲线回归方程为:.一. .,。线性范围一/。最低定量曼为/%, 。结果见图.。浙江大学硕士学位 第二章测定巾探针底物非索非那定的药浓度 越 : 。。 ? ? 飞~ 加入非索非那定至 非那定片剂后血浙江大学硕十学位 第二章冲测定?探针底物非索那定的血药浓度 面积比/内标 . . . . . . 一. . . 浓度/。一 图.人血浆非索非那定标准曲线 ..准确度和精密度 用空白血浆将稀释成相当于血药浓度为,,嵋/的种质控血 浆,按“..”项处理后分析,考察的日内每日测定次、日间精密度测 定天,每天次和方法回收率,结果见表.和.。 表.非索非那定的日内精密度及方法回收率 加入浓度/?‖ . . . . . . . . . . . . . . . 士 .土. .士. .土. 日内% . . . . . . 方法回收率% 浙江大学硕士学位 第二章.测定探针底物非索非那定的舡药浓度 表.非索非那定的日间精密度 加入浓度// . . . . . . . . . . . . . . . 孓士 .士. . . .士. . . . 日间% ..提取回收率 测定,,./ 种质量浓度的质控血浆各份的峰面积。用. 醋酸盐缓冲液稀释制备,, 溶液。各种质量浓度的质控 ./ %甲醇 血浆分别取,加纯乙腈,涡旋混合后用氮气吹干,用 溶液复溶吹干残渣后直接进样分析,记录峰面积。相应浓度的峰面积之比即 为提 种质控血样的提取回收率分别为.士. 取回收率。,,?。 %,..%,.士.%,分别为.%,.%,.%。同法, 计算内标提取回收率为.士.%。 ..稳定性试验 ...血浆样品光照试验 取,, /质控血浆各份,即时测定;于置日光灯下充分暴 露、光照后测定结果和色谱图比较,结果,,, /质控血浆的平 均峰面积分别下降.%,.%和.%,未具统计学意义,提示样品稳定。 ...处理后血浆样品 取,,./质控血浆各份,经“..”项下处理后,室温避光 放置,在,测定,结果各浓度的回收率为.%..%,表明在内基本 稳定。 浙江人学硕士学位 第二章.测定探针底物索那定的血药浓度 ...冻融循环 取,, ‖质控血浆即时测定,再冷冻保存后,在室温条件下 解冻后连续测定,连续测定次。结果各浓度的回收率为...%。表明对照 品经过冻融后的稳定性良好。 ...长期稳定性 取,,?‖质控血浆即时测定,于一。冷冻保存后再次测定, 各浓度的回收率为.%..%。表明冷冻保存在.。的内稳定性良 好。 .方法应用 名男性健康志愿者试验前签署知情同意书,进行一般体检包括血压、心率 等、血尿常规、生化及心电图等试验室检查。实验当天口服非索非那定片剂 菜 多菲,服药后统一进食低脂肪饮食。于服药前和服药后.,,., ,.,,,,,,取上臂静脉血,每次,用用乙二胺四乙酸二钾抗 凝, ?。离心分离出血浆,于一冷冻储存,用于血药浓度测定。每个分 析批制备新的标准曲线,并随行测定,,./个质量浓度的双份质控 样品。测定血药浓度后所得的平均血药浓度.时间曲线见图.。经软件 ..处理,得到主要药动学参数,并与文献报道进行比较,结果见表.。与 文献报道相比较,发现腿、和.的差异无统计学意义., 但本实验得到的非索非那定的消除半衰期要小于报道的..】,与国内 刘茜等【”文献报道值..较为接近,提示非索非那定消除速率可能存在 民族差异性,值得进一步研究。浙江大学硕十学位 第二章?测定探针底物非索非那定的血药浓度 / / 图. 名健康志愿者口服非索非那定片后的平均血药浓度一时间曲线 疗 啪. / /?’ /??。 .. 士 .士. 士.. 士 .. 土.讨论 文献报道测定所用的样品预处理方法包括有机溶剂提取法和固相 萃取法。前者操作繁琐,后者成本较高,而且血浆样品需要,分离需要用到梯 度洗脱方法。我们建立的方法中,采用直接沉淀法预处理血浆样本,应用 荧光检测器检测,即可达到 /。本法的优点在于血浆取样量少, 预处理简便快速以及不受固相萃取的限制,可以适合于药动学研究大量生物样本 的需要。 方法建立中曾尝试用. 短柱进行 样品分离,但其所得待测峰的峰型和响应值不如长柱所得的好,因此选择 后者进行样品分离。曾比较过.%和.醋酸铵缓冲液对于分离条件的 影响,由于在.醋酸铵缓冲液中待测峰的峰型和响应更好,所以选择其作为缓 冲液。比较了内标候选物地西泮、西替利嗪和苯海拉明,结果发现苯海拉明最优。 参考国外文献,曾尝试将荧光检测器的激发波长和发射波长分别设定为和 浙江大学硕上学位 第二章?测定.探针底物非索竹那定的血药浓度 ;但其荧光响应值不如激发波长和发射波长分别设定为和时 强,故本实验选择荧光激发波长,发射波长。在血浆样品处理的摸 索过程中,还曾尝试用甲醇、%高氯酸溶液、丙酮作为沉淀剂沉淀蛋白。结果表 明,甲醇和丙酮沉淀蛋白并不完全,色谱峰上杂质峰多,会干扰目标峰和内标峰; 而%高氯酸沉淀血浆蛋白虽然完全,色谱峰杂质少,但是目标峰也不出峰,这 可能由于%高氯酸酸性过强,破坏了非索非那定的结构所致。浙江大学硕士学位 第三章非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体 ?活性影响的随机、安慰剂对照研究 第三章非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒对人体. 活性影响的随机、安慰剂对照研究 黄芪为我国名贵中药材,主要药理作用是“益气固表”,可以“利水”,也可以“托 毒生肌”, 民间还有冬令取黄芪配成滋补强身之食品的习惯。目前市场上黄芪已 被制成注射剂、颗粒剂等多种制剂用于治疗心力衰竭、心肌梗死、调节血压血糖、 肾病综合症等多种疾病,临床应用十分广泛。黄芪中已有多种成分被证实和分 离,主要的有效成分例如黄芪多糖、黄芪甲苷和黄芪异黄酮等。 ?作为膜转运蛋白,对药物的吸收、排泄和代谢起着至关重要的作用,基于 .机制的药动学相互作用研究也成了热点。黄芪制剂一般需要长期服用,临床剂 量的黄芪制剂是否影响一印的活性,继而影响.底物的临床药物代谢动力学,目 前未见文献报道。迄今为止,人体内.活性尚没有直接的测定方法,一般采用体 内探针的方法。本研究以非索非那定参数作为体内.活性的探针,通过观察 黄芪颗粒对非所非那定的影响,来探讨黄芪对.活性的影响,以预期黄芪颗 粒与常见合并用药相互作用的临床可能性。 .材料与方法 ..试验药物浙江大学硕士学位 第三章非索非那定体内探针法考察多剂量黄 苠颗粒对人体 ?活性影响的随机、安慰剂对照研究 料的饮料和食物。受试者试验前签署知情同意书。 ..试验方法 本试验获浙江大学医学院附属第二医院医学伦理委员会批准批件号: 伦审研第号。采用两周期、双交叉、随机、安慰剂对照试验。志愿者人, 按区组随机表,分为甲乙两组,每组人表.。 表.区组随机表分组 甲 乙 第一周期:实验第?天,乙组每天服用黄芪颗粒,.常饮食, 甲组每天服用安慰剂,加正常饮食;实验第天前夜禁食,实验第 天当天早上:静脉留置针放置,并抽取空白血浆。空腹单次口服非索非那定片 后方可饮水, 剂,用温开水送服。服药 后统一进低脂清淡 饮食。分别于服药后.,, .,,.,,,,,,小时自上臂静 脉抽血。洗脱期为周,周后开始试验的第二周期;第二周期两组人员平行 交换,服药方法以及取血取尿样等皆不改变。第二周期的实验第天早上: 取完最后一个点的血样后,另外抽取志愿者全血/人,以供基因型测定用。 试验期间制定专门医学人员对所有志愿者进行医学观察,记录可能发生的不 良事 件。浙江大学硕士学位 第三章非索非那定体内探针法考察多剂量黄芪颗粒 对人体 ?活性影响的随机、安慰剂对照研究 ..人血浆样本的药物测定 检测条件、血浆样品处理、方法学的考察同第二章。 ..数据处理 血药浓度.时间数据采用..药动学软件皖南医学院弋矶山医院孙瑞元 教授编制处理。选择非房室模型计算药动学参数。该软件采用用梯形面积法 计 算.,用末端相点浓度对数对时间进行回归得到末端相消除速率常数娩, 末端相最后一点浓度除以计算得到。,?,以半 对数作图法、由消除相浓度点计算和/,侧和觚采用实测值。药动学参 数’。和戤值经对数转换后,作交叉试验的方差分析,根据方差分 析得出的误差均方进行双单侧检验,参照分布计算均值比率的%的置信区 间;。采用非参数法配对比较分析 ,以评价安慰剂和 黄芪组不同预处理方式下的的生物等效性。 .结果 ..血药浓度.时间关系 健康志愿者单用和合用黄芪颗粒时,的血药浓度.时间关系见表.和表 .。药时曲线见图.和图.。 ,一 岔 寸 ? 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一 卜 寸 凸 口 寸 。口 卜 ? 卜 ? ? 卜 卜 ? ? 卜 卜 盘 寸 ? 一 一 “ 卜 一 一 一 一 卜 。??岔 寸 一 一 。 ? ? 一 口 寸 ? 寸 ? 一 ? 心寸 口 。 卜 寸 寸 也 一 ?口 . 一一 ? 也? 卜葛卜 、 一 ? ? . ? ? 一 ? 寸 一 寸 ? ’?寸 ??.凑? 一 。 昏 卜 卜 卜 一 卜 一 . 。 ?。。卜 卜 寸 寸 . 卜 岔 西 一 葛? 卜 寸 一 一 寸 寸 寸 寸 岔 一 卜 ? 昏 一 ?一 ? 。 凸 是 寸 寸 。 。? 寸。。 。 心 ? 寸 ? 凸一 卜 ?寸 寸 ?口 卜 卜 蓬 一一口卜 一 卜 。。 ?? 口 一 ?卜 ? 岔 。 口 寸 寸 卜 西 装誊甏靛属臻强二安淫辱醛兰.烬暑.肇茛鞑娶磁鳆:酉幕讯涤衬爆攀母肇删 最般告籽川球 ? 。 卜 卜 口一 ? 口 寸 寸? ? ? 口 ? 卜 ?凸 凸 ? 一 。 卜 卜 凸 西 一 .寸 ? 寸 ? ? 卜合 寸 口 ? 卜 寸 寸 一 搽攥墩拣蛊谁咝帕七留迎匿、碾越舷暖《岭.碟 工 鲁 . 一 一 魈 瓷 ? 瓷. : : 上 上 ‘ 上 趔 蜓 /, 摹 黎 ,、 蜒 ,.、 ,、 ,、 /.、 叵 古 古 舔 里 丫 乍吉 《。 吉 袋 回 × 主 卜 匕 螋主 卜 日 备 嚆 矗 母 士 配 比 \ ? 胃 苗 螺 《 《 《 《 芝 主 卜 攀扑.誉扑工鉴