液基薄层细胞学检测联合人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈病变筛查中的应用价值评估

液基薄层细胞学检测联合人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈病变筛查中的应用价值评估 【摘要】 目的:探讨液基薄层细胞学检测(TCT)联合人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测在宫颈病变筛查中的作用。方法:2012年6月至12月，对我院432名TCT、高危型HPV检查阳性及临床怀疑宫颈有病变的患者行阴道镜下取宫颈活检，并对资料进行分析。结果:432名患者中病理检查异常者为68例(阳性率15.74%);行TCT检查异常者为80例(阳性率18.51%)， 其中病理学异常者45例，占总病理学异常患者的66.17%;行高危型HPV-DNA检测阳性者为116例(阳性率26.85%)，其中病理学异常者53例，占总病理学异常患者的77.94%;68例病理异常的患者中，TCT联合高危型HPV检查阳性病例为58例，检出率为85.29%。TCT检出率与联合检查的检出率进行统计学分析，差异具有统计学意义(χ2=6.762， P=0.0092)。HPV检出率与联合检查的检出率进行统计学分析，差异具有统计学意义(χ2=4.917， P=0.027)。TCT和HPV-DNA检查的阳性率随宫颈病变严重程度的增高而升高。结论:TCT联合HPV基因分型检测可提高宫颈病变检出率，为宫颈病变的早期诊断提供重要的参考依据。定期进行TCT及HPV筛查，不仅可以降低HPV感染发病率，减少宫颈病变发病率，也可以防止宫颈癌的发生。 【关键词】 TCT技术; HPV分型; 宫颈病变 宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率位居第二，仅次于乳腺癌。近年来宫颈癌的发病率有明显的年轻化趋势，每年新发病例中80%发生在发展中国家。而高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)持续感染是宫颈癌的明确病因[1，2]。从宫颈上皮内瘤变发展为原位癌平均需要10,20年，其发生和发展经历了较长的演变过程。宫颈上皮内瘤变分为 CIN?、CIN?，级别越高，越容易发展为宫颈浸润癌。因此，早期发现及3级即CIN?、 治疗癌前病变以阻断宫颈癌的发生尤为关键，而行之有效的筛查成为发现宫颈癌前病变，阻断、降低宫颈癌发生的重要环节[3，4]。有效的诊断是临床的首要因素，但在临床检查诊断的过程中，目前临床上常用超薄液基细胞技术筛查宫颈病变，但单独使用液基薄层细胞学检测(TCT)或人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测容易漏诊或误诊，其准确性较低。本研究通过对存在宫颈病变的患者同时进行TCT联合HPV分型检测，尤其是高危型HPV检测进行筛查，探讨这两种方法在诊断宫颈病变中的应用价值，为妇女宫颈病变的早期发现、早期干预以阻断进一步癌变提供帮助。 1资料与方法 1.1一般资料 选择2012年6月至12月来我院就诊，存在宫颈异常的患者432例，同时用TCT联合HPV基因分型检测，对结果阳性及临床怀疑宫颈有病变的患者行阴道镜下取宫颈活检，以病理组织学为金，并对资料进行分析。患者年龄19,68岁，平均年龄(34.3?6.5)岁，均有性生活史。 1.2方法 1.2.1TCT检测检查时间选取患者非月经期，且近3d无阴道冲洗或放药，24h内无性生活，使用专用取样刷对宫颈可疑的病变区域进行采样，将可以分离的采集器刷头置于保存液之中，采用新柏式 2000全自动制片机进行程序化处理。按照2001年国际癌症协会(NCI)推荐的 TBS分级标准进行阅片，对细胞改变的诊断包括: 良性细胞改变(NILM)、不能意义的非典型鳞状上皮细胞(AS-CUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)、鳞状细胞癌(SCC)和腺癌，其中细胞学异常是指ASCUS及以上病变。 1.2.2HPV-DNA基因分型检测用HPV基因分型检测试剂盒(PCR-反向点杂交法)，应用DNA反向斑点杂交技术，结合专业数码凝胶成像与分析系统，通过P值(积分光密度差值)检测判断中国人群中广泛分布的19种HPV基因型别[5]，其中包括16种与宫颈癌密切 相关的高危型别(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、亚型 CP8304型)及3种低危型别(6、11、43型)。本研究只计算HPV-DNA检测结果为高危型 的患者。 1.2.3宫颈病理活检用SLC-2000阴道镜对宫颈进行观察，并做醋酸白试验和碘试验， 对可疑部位进行多点活检，对阴道镜下无异常时则取 3点、6点、9点、12点处组织，将标 本用甲醛固定后送病理科经同一病理医生进行诊断。宫颈病理结果按级别分为宫颈炎 (NILM)、宫颈轻度上皮内瘤变(CIN I)、宫颈中度上皮内瘤变(CIN?)、宫颈重度上皮 内瘤变(CIN?)、宫颈鳞状细胞癌(SCC)。其中CINI即TCT标准的LSIL， CINII、CIN ? 即TCT标准的HSIL。 1.3统计学方法 应用SPSS14.0软件对数据进行处理，采用χ2检验，P 参考文献 [1]Pimple S， Muwonge R， Amin G， et al. Cytology versus HPV testing for the detection of high-grade cervical lesions in women found positive on visual inspection in Mumbai， India. Int J Gynaecol Obstet， 2010， 108(3): 236-239. [2]李丹，张霞，曾碧冰.203例女性外阴尖锐湿疣患者宫颈 HPV基因型检测及分析. 中国性科学，2012， 21( 3 ):26-29. [3]章文华.宫颈癌筛查方法与我国宫颈癌筛查面临的新问题.中华肿瘤杂志，2008，30 (12):881- 884. [4]芮平.HPV-DNA亚型检测联合液基细胞学对宫颈癌筛查的临床价值.中国性科学， 2012，21(7):48-50. [5]布洁，李韧，宋微，等.252 锎中子腔内照射加外照射治疗宫颈癌110 例临床分析. 中华肿瘤杂志，2010，32(8):619- 621. [6]Dhakal HP，Pradhan M. Histological pattern of gynecological cancers. JNMAJ Nepal Med Assoc，2009，48(176):301- 305. [7]Wright TC， Cox Jr JT， Massad S，et al. 2001 Consensus guidelines for the Managerment of women with cervical intraepithelial neoPlasia.AJOG，2003(189): 295-304. [8]Wright TC， Cox Jr JT， Massad S，et al. 2001 Consensus guidelines for the Managerment of women with cervical cytological abnormalities. JAMA， 2002(287): 2120-2129. [9]Solomon D， Nayar R. The Bethesda system for reporting cervical cytology. 2nd ed. New York: Springer-Verlag， 2004: 67-87. [10]Ferris Dq Cox TJ. Modem colposeopy: textbook and atlas. 2nd ed. USA: Kendal/hunt publishing Company ，2004: 144-483. [11]Yoon JH，Yoo SC，Kim WY，et al. Role of HPV DNA testing for detection of high- grade cervical lesions in women with atypical squamous cells of undetermined significance: a prospective study in a Korean population.Eur J Gynaecol Oncol，2009，30(3):271- 274. [12]Lerma E，Quintana MJ，Quilez M，et al. Effectiveness of liquid- based cytology and papanicolaou tests in a lowrisk population .Acta Cytol，2007，51(3):399- 406. [13]郑占才，张晓宁，赵华英，等.重组人干扰素肌注与干扰素阴道栓联合使用治疗宫 颈高危型HPV感染.中国性科学， 2011，20(10):10-13. [14]Marlow LA，Waller J，Wardle J. Public awareness that HPV is a risk factor for cervical cancer.Br J Cancer，2007，3(5):691- 694. [15]尚慧玲，黄雪坤，等.HPV 感染与液基细胞学联合检测宫颈病变的临床意义.中国 实验诊断学，2010，14(2):232- 235. [16]姜志欣，吴玉鳞.HPV感染及预防性HPV疫苗研究.中国生育学杂志， 2008，151(5): 315-316. [17]范晓霞，余晓，徐小敏.1280例宫颈病变女性中人乳头瘤病毒基因型分析，中国现代医生，2012，50(18):13-15. [18]林文芳.液基细胞学与高危型人乳头瘤病毒检测在筛查宫颈病变中的价值比较研究.中国医药科学，2012，02(1):67-68.