HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐胶囊中黄芪甲苷的含量

HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐胶囊中黄芪甲苷的含量 HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐胶囊中黄芪 甲苷的含量 2007年3月第27卷第2期 March.2007V01.27No.2 现代中医药 ModernTraditionalChineseMedicine?67? HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐 胶囊中黄芪甲苷的含量 李小安张军科侯亚兰史美佳 (陕西海天制药有限公司,陕西成阳712000) 摘要:目的建立HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐胶囊中黄芪甲苷含量的方法.方法色谱柱为WatersclE (4.6mm×150ram,51xm),流动相为甲醇一水(8020),流速1.0mL-rain一;柱温35?;ELSD漂移管温度85?.结 朵黄芪甲苷在1.14,l1.41xg范围内线性关系良好,平均回收率97.1%,RSD2.02%(n=6).结论本法简便,准 确,可作暖胃舒乐胶囊的质量控制方法. 关键词:高效液相色谱法;暖胃舒乐胶囊;黄芪甲苷;含量测定 中图分类号:R282.6文献标识码:B文章编号:1672—0571(2007)02—0067—02 暖胃舒乐胶囊是部颁第八册(WS3一B一 1661—93)收载的成方制剂,由黄芪,大红袍,延胡 索,白芍等l2味药材组成,具有温中补虚,调和肝 脾,行气活血,止痛生肌的功能,用于脾胃虚寒及肝 胃不和型胃溃疡,12指肠溃疡,慢性胃炎,症见脘 腹疼痛,腹胀喜温,反酸嗳气.为保证制剂的有效 性,进一步完善该制剂的质量控制方法,笔者采用 高效液相色谱法测定该制剂中黄芪中有效成分黄 芪甲苷的含量,实验结果表明该方法简便,准确,可 作为本制剂质量控制方法. 1仪器与试药 1.1仪器日本岛津Waters高效液相色谱仪, Waters2420蒸发光散射检测器,Waters1525泵, Empower色谱工作站,梅特勒AE一240电子分析电 平. 1.2试药黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制 品检定所(编号:0781—200311);甲醇为色谱纯 (迪马公司);水为重蒸馏水;其它试剂为分析纯. 三批暖胃舒乐胶囊由陕西海天制药有限公司提供. 2方法与结果 回收率(%)=————可l;兰篆善;×-..% 表2样品的加样回收率试验结果 2.9样品的含量测定按上述黄芩苷含量测定方 法对3批试制样品黄芩苷含量进行了测定,结果见 表3. 表3样品中黄芩苷的含量测定 根据3批试制样品的测定结果,暂定本品每袋 含黄芩以黄芩苷计不得少于2.5mg. 3结论与讨论 黄芩苷是为复方胡黄颗粒的主要有效成分,采 用HPLC测定复方胡黄颗粒中黄芩苷的含量,分离 效果好,精密度高,准确可靠,可用于该制剂的内存 质量控制. 参考文献, [1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京:化 学工业出版社,2005.361. [2]谢秀环.中药新制剂开发与应用[M].北京:人民卫生出 版社.2000.9 (收稿日期:2006—09—21) 现代中医药 ? 68?ModemTraditionalChineseMedicine 2007年3月第27卷第2期 March.2O07V01.27No.2 2.1色谱条件WatersCl8色谱柱(4.6mm× 150mm,5m);甲醇一水(8020)为流动相;流速 1.0mL?min一;空气流速2.3mL?rain;柱温为 35?;ELSD漂移管温度85?.进样量1OL;在上 述的色谱条件下黄芪甲苷完全达到基线分离.与 邻峰分离度大于1.5,按黄芪甲苷计算理论板数均 在3000以上. 2.2溶液的配制 2.2.1对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适 量,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,即得. 2.2.2供试品溶液的制备取本品装量差项下的 内容物10g,研匀,精密称定,置索氏提取器中,加甲 醇适量,加热回流提取至甲醇液无色,提取液蒸干, 残渣加水30mL使溶解并转移至分液漏斗中,用水 饱和的正丁醇提取4次,每次30mL,合并正丁醇 液,用2%氢氧化钠溶液洗涤2次,每次30mL,弃去 液,再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次30mL,正 丁醇液蒸干,残渣加甲醇5mL使溶解,加于已处理 好的中性氧化铝柱(100,200目,5g.内径1O, 15mm)上,用6o%甲醇100mL洗脱,收集洗脱液, 蒸干,残渣加甲醇使溶解转移至5mL量瓶中,加甲 醇至刻度,摇匀,滤过,取滤液,即得. 2.3空白干扰试验按处方组成份量按工艺及制 法制成缺黄芪的空白样品,同供试品溶液制备方法 制得空白对照进样.结果空白对照溶液在与对照 品溶液色谱保留时间相应的位置上无其它色谱峰 出现,说明其它成份对黄芪甲苷无干扰. 2.4钱性关系的考察取黄芪甲苷对照品适量, 加甲醇制成0.57mg?mL的溶液,分别进样2, 4,6,12,16,20,以折算成统一进样体积 (2OL)浓度的常用对数为横坐标(Y),峰面积常 用对数为纵坐标(x).绘制标准曲线,计算回归方 程:Y=0.6811X+1.7839,r=0.9992,黄芪甲苷在 l1.114,11.4g范围内呈良好的线性关系. 2.5稳定性试验取同一批供试品(产品批号: 051201)溶液,分别在0,1,4,8,12h注入液相色谱 仪测定峰面积,结果RSDT.02%,表明供试品溶液 在12h内稳定. 2.6精密度试验取对照品溶液(O.57mg?mL一 1)溶液各10,连续5次注入液相色谱仪,测定峰 面积结果RSD1.21%,说明仪器的精密度较好.’ 2.7重现性试验同一批供试品(051201)6份按 正文含量测定方法测定,RSD1.25%说明方法的重 现性好. 2.8加样回收试验精密称取黄芪甲苷对照品适 量,加入已知含量的样品(约为测定方法中样品的 半量)中,按正文含量测定方法测定,计算回收率, 结果见表1.说明本方法回收率较好,方法可行. 表1回收率试验结果 2.9样品测定按正文方法对3批暖胃舒乐胶囊中黄芪甲苷测定结果见表2. 表23批暖胃舒乐胶囊中黄芪甲苷测定结果 3结论与讨论 采用HPLC—ELSD法测定暖胃舒乐胶囊中黄 芪甲苷含量,方法准确,可靠,可用于暖胃舒乐胶囊 的质量控制. 参考文献 [1]邬成华.高效液相色谱一蒸发光散射检测法测定黄芪注 射液中黄芪甲苷含量[J].上海医药,2001,22(2):83. [2]张爱华.高效液相色谱一蒸发光散射检测法测定爱婴催乳 液中黄芪甲苷含量[J].药物分析杂志,2/302,20(6):415, [3]吴巧风,范英.HPLC法测定补血胶囊中黄芪甲苷含量 [J].中成药,2003,34(5):425. (收稿日期i2oo6—09—23)