【word】 HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量

【word】 HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量 HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量 2007盘 第2l卷第7期 实用中医内科杂志 JOURNALOFPRACTICALTRADITIONALCHINESEINTERNALME DICINE JUL.2007 V01.2lNo.7 ? 实验研究? HPLC法测定清热解毒颗粒中靛玉红含量 李亚秋孟宪生 (1.辽宁中医药大学附属医院,辽宁沈阳110032;2.辽宁中医药大学药学院,辽宁沈阳110032) 关键词:清热解毒颗粒;靛玉红; 中图分类号:R283文献标识码:A 薄层扫描法 文章编号:1671—7813(2007)07—023—02 本制剂由金银花,大青叶等药味经提取加工制 成,具有清热解毒,凉血消斑之功效.为控制其质 量,本制剂采用反相液相色谱法测定大青叶中靛玉 红含量,经方法学考察,方法的专属性,精密度,稳定 性,重复性,回收率试验均符合有关规定,为该制剂 质量分析,提供了可行的控制方法. 1仪器与试剂 仪器:岛津LC一6A液相色谱仪.中北工作站. 试剂:甲醇为色谱纯,其他试剂均为分析纯.靛玉红 对照品购自中国药品生物制品检定所. 2测定条件 色谱柱:Shim—packCLC—ODS柱(4.6ramX 150mm,5Ixm),柱温40%.为流动相甲醇一水(80: 20),流速:1ml/min,检测波长289nm,理论塔板数按 靛玉红峰计不低于4000. 3试验方法与结果 线性范围考察精密称取对照品10.02mg,置 500ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制 成每1ml含0.04rag的对照品溶液,分别吸取2.0, 4.0,6.0,8.0,10.01xl,注入液相色谱仪中测定,测 定结果回归处理.回归方程为:Y=692412.1X+ 405.1r=0.9996,对照品样量在0.040,0.2g范 围内,线性关系良好. 供试品溶液制备方法考察根据靛玉红的化学 性质,本试验经参考有关文献,采用氯仿为提取溶 剂,对不同提取方法加以考察,考察结果见表l. 表l不同提取方法考察结果 测定结果提示:索氏提取4h供试品中靛玉红已 基本提取完全. 供试品制备方法为:取本品3g,研细,精密称 定,置索氏提取器中加氯仿回流提取4h,将溶液定 容至lOOml量瓶中. 精密度试验考察精密吸取供试液各l0l,注 入液相色谱仪中,以前述色谱条件测定,测定色谱 峰面积,测定结果为RSD为1.41%,符合有关规定. 稳定性试验考察精密吸取供试品溶液l0, 以前述色谱条件测定,间隔0,1.0,2.0,3.0,4.0,5. Oh测定色谱峰面积,测定结果为RSD为1.81%. 稳定性测定结果提示,供试液制备后5h内点样,测 定,靛玉红化学性质稳定. 重复性试验考察取同一批号样品各3g,精密 称定,按已确立的方法制成供试液,精密吸取供试液 l0l,对照液5p.1,进样分析,测定结果(n=5)为:平 均每g含靛玉红为0.658mg. 回收率试验考察取已知准确含量的样品1. 5g,精密称定,精密加入靛玉红对照品溶液(0. 03956mg/m1)25ml,按已拟定的方法测定,测定结果 为:平均回收率97.3%(n=5),RSD为1.7%,符合 有关规定. 表2加样回收率实验(n=6) 样品含量测定结果取不同批号的样品3g,按 已确立的方法测定,测定结果见表3. 表3样品含量测定结果 批号靛玉红含量(mg/g) 06O52l O6O6l3 O.65 O.68 O.59 4讨论 ? 23? 2007年 第21卷第7期 实用中医内科杂志 JOURNALOFPRACTICALTRADITIONALCHINESEINTERNALME DICINE JUL.2007 Vo1.21No.7 骨愈灵胶囊对骨性关节炎 家兔模型血清及关节液中IL—l表达的影响 杨涛指导:刘元禄 (辽宁中医药大学附属第一临床医院,辽宁沈阳110032) 关键词:骨性关节炎;中医疗法; 中图分类号:R274文献标识码:A IL—l;关节软骨;关节液 文章编号:1671—7813(2007)07—024—02 骨性关节炎作为一种常见病,多发病越来越得 到人们的关注.早期主要临床表现是:以僵硬为主, 劳累,受凉或轻微外伤而加重,肢体从一个位置换到 另一个位置时困难,稍活动疼痛僵硬很快缓解,发展 到晚期关节疼痛加重,夜间休息时能疼醒,疼痛为持 续不断,直至关节变形,肿大,功能活动受到障碍,生 活不能自理.现代医学认为,骨性关节炎(osteoar- thritis,OA)是机械性和生物性因素相互作用,使关 节软骨细胞,细胞外基质和软骨下骨合成与降解的 正常进行失去平衡的结果.不过,OA可由多种因 素引发,包括遗传,发育,代谢和创伤因素,OA疾病 可累及可动关节的全部组织.OA疾病的最终表现 是:由于软骨细胞与基质形态学,生物化学,分子生 物学和生物力学的改变,从而导致关节软骨软化,纤 维化,溃疡,减少,软骨下骨的硬化与象牙化,骨赘形 成和软骨下骨囊肿”J.本实验通过观察骨愈灵胶囊 对骨性关节炎家兔模型血清及关节液IL—l表达的 影响,来考察中医中药治疗骨性关节炎的效果,并从 分子生物学角度探讨其作用机理. l材料与方法 材料实验动物:5,8月龄家兔28只,体重 1.4,2.5kg,皆为雄性,由辽宁中医药大学动物实验 中心提供. 实验药品?骨愈灵胶囊(主要成份:三七,血 竭,红花,当归,川芎,赤芍,乳香(制),没药(制),大 黄,续断,骨碎补,五加皮等十六味,购于辽宁中医药 大学附属第一临床医院(由陕西宏府怡悦制药有限 公司生产),加入蒸馏水配成lmg/rrd的混悬液.? 双氯芬酸钠(购于辽宁中医药大学附属第一临床医 院)加入蒸馏水配成0.25mg/ml的混悬液.各药混 悬液封瓶后置于冰箱保存备用. 试剂及设备?IL一1试剂盒(购于沈阳博而 美公司)?相关检测设备由中国医科大学提供. 实验动物的分组将28只家兔随即分4组:骨 愈灵胶囊组(A组),双氯芬酸钠组(B组),模型组 (C组),正常对照组(D组),每组7只. 造模方法A,B,C组按照Hulth方法造模: 腹腔注射苯巴比妥钠(50nlg/kg)麻醉后,按无菌操 鹾伏 ; i !l55 1 ll鹄 { } . 点曼一一,. 靛玉红对照品HPLC色谱图清热解毒颗粒HPLC色谱图清热解毒颗 粒阴性液HPLC色谱图 本试验先后采用乙腈一水(65:35),甲醇一水附液相色谱图. (85:15),甲醇一水(80:20)为流动相,试验结果提参考文献 示,在第三种流动相下,供试液中靛玉红色谱峰与相 邻组分分离度良好,方法专属性重复性均良好.见 ? 24? E1]国家药委员会.@~2oo5版一部[M].第1版.北[标签:快照]