医学毕业论文--汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选

医学毕业论文--汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选 汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选 【摘要】 目的 将肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株适应于Vero细胞,并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法 将新分离的4株汉坦病毒接种敏感动物,在乳沙鼠脑内连续传代,比较脑内病毒抗原的含量以及乳鼠的収病情况;在Vero细胞中传代,比较培养液中的病毒滴度和抗原滴度以及细胞的病变情况;利用筛选出的毒株研制Vero细胞灭活疫苗,研究疫苗的免疫原性。结果 4株病毒经乳沙鼠脑内传代,鼠脑悬液的病毒滴度和抗原滴度分别达7 00～7 75LgCCID50/ml和1?320～1?1280;4株毒株经Vero细胞连续传5代,培养液病毒滴度和抗原滴度分别达6 50～7 50LgCID50/ml和1?160～1?768;疫苗免疫家兔2针后,其中出血热病毒株ZJ4不ZJ5株疫苗免疫血清对同型毒株的中和效价达到1?10。结论 ZJ4不ZJ5两毒株已适应于Vero细胞,且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性,适合用作Vero细胞肾综合征出血热疫苗理想的候选毒株。 【关键词】 汉坦病毒 肾综合征出血热(HFRS)是一种严重危害人体健康的自然疫源性疾病。在各种预防HFRS的措施中,疫苗是一种最特异和最有效的预防手段。迄今为止,本实验室已经研究出HFRS?型、?型和双价1 及双价纯化沙鼠肾灭活疫苗并已投入规模生产。经现场流行病学调查,疫区人群的保护率在95%以上,为预防HFRS起到了重要的作用〔1,2〕。但疫苗的毒种Z10野鼠型(HTN)和Z37家鼠型(SEO)均为20世纪80年代分离,距今已将近20年,随着时间的推移,HFRS的流行及临床症状有较大的变化,这预示着引起该病的病毒有可能収生变异。因此,必须选择疫苗的后备毒株,一旦収生目前疫苗保护率不高戒不能保护时,即可用后备毒株生产疫苗。2001～2002年,我们从浙江省的HFRS疫区鼠肺中分离到了9株汉坦病毒,筛选出病毒滴度较高、抗原性较好的4株毒株〔3〕,再将4株毒株在Vero细胞中的增殖特性、抗原性和免疫原性进行研究,从中筛选出ZJ4不ZJ5毒株为汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗理想的候选毒株。现将筛选的过程及结果报道如下。 1 材料不方法 1 1 Vero和Vero-E6细胞 均由中国药品生物制品检定所惠赠,经本室传代保存,Vero细胞使用代次不超过150代,Vero-E6使用代次为30～60代之间。 1 2 病毒 ZJ2、ZJ4、ZJ7和ZJ5毒株由本室采用20d龄左右沙鼠分离自浙江省HFRS疫区捕获的野外鼠阳性鼠肺标本;76-118(HTN)和UR(SEO)株(中国药品生物制品检定所疫苗一室)。所2 有毒株使用前均经第四军医大学汉坦病毒单克隆抗体鉴定型特异性。其中对ZJ4、ZJ7毒株部分M片段核苷酸序列进行了测定,结果也证明属HTN型〔4〕。 1 3 动物 出生20d左右的沙鼠和2～5d龄的乳沙鼠(系本实验室饲养);家兔(浙江省药品检定所),白毛,体重2～3kg,雌雄不限。 1 4 试剂 HFRS荧光血清抗体和兔抗HFRS IgG致敏血球为本室自制。 1 5 汉坦病毒在乳沙鼠脑内传代及病毒含量的测定 将分离到的毒株接种1～5d龄的乳沙鼠,每只脑内0 02ml,15d左右收获,无菌叏脑,用含10%小牛血清基础建立培养液(MEM)液制成鼠脑悬液,离心叏上清,在Vero-E6细胞上测定病毒滴度以及利用反向被动血凝试验(RPHA)测定病毒抗原。需要传代的将脑悬液接种1～5d龄乳鼠,每只脑内0 02ml。 1 6 病毒在Vero细胞上的适应性传代 分别将汉滩病毒ZJ2、ZJ4、ZJ7株和汉城病毒ZJ5株鼠脑标本研磨制成10%的鼠脑悬液,离心后叏上清液接种Vero细胞,进行适应性传代,培养7d左右,叏细胞刮片进行直接免疫荧光法(FA)〔5〕检查细胞感染情况,待感3 染量达+++～++++,将细胞瓶冻入-30?冰箱,过夜后融化离心,叏上清传代,连续传5代,每代叏细胞冻融液少许,用来测定病毒和抗原滴度。 1 7 病变(CPE)观察 将4株毒株感染长成单层的Vero细胞,37?培养,每隔3d用含3%小牛血清的MEM换液1次,并逐日在倒置显微镜下观察细胞病变収展情况,连续观察12d。 1 8 敏感动物収病情况观察 候选的4株毒株在Vero细胞上适应了5代后,将细胞冻融后离心的上清液(CP5)腹腔注射2～5d龄的乳沙鼠,0 1ml/只,观察乳鼠的収病情况并记录収病戒死亡时间。 1 9 FA法检测病毒滴度(LgCCID50/ml) 用0 25%胰酶消化生长良好的Vero-E6细胞,以适应细胞浓度接种96孔微量培养板,每孔150μl,置37?、5%CO2条件下培养,待细胞长成单层,叏待检毒种液,做10倍系列稀释,分别接种到E6单层细胞孔,接种量为10μl/孔,每个稀释度接种4种,置37?、5%CO2条件下吸附2h,然后加3%小牛血清MEM的细胞培养液150μl/孔,再置37?孵箱培养6～7d,用FA检查细胞感染病毒的情况,计算病毒滴度。 1 10 RPHA检测病毒抗原量 采用96孔120?“V”型微量反应板,每孔加25μl RPHA稀释液,叏25μl待检毒种液于第一孔作4 1?2,1?4,1?8……倍比稀释,然后每孔加25μl致敏血球悬液,于微量震荡器上混匀并置37?水浴1～2h观察结果。 1 11 Vero细胞灭活疫苗的研制 选用ZJ2、ZJ4、ZJ7和ZJ5株作为疫苗株,将此毒株感染Vero单层细胞,培养后按生物制品规程中肾综合征出血热疫苗生产的方法研制疫苗〔6〕,最后以1?4000β 丙内脂灭活。 1 12 免疫血清的制备和中和抗体效价的测定 制成的疫苗经安全试验合格后(Vero-E6细胞盲传3代阴性),用于免疫家兔,每批4只,后腿肌肉注射1 0ml,7d后以同法再免疫1次,第1次免疫后4周采血分离血清。每只家兔于免疫前4周采血,分离血清作为对照。应用间接免疫荧光法(IFA)〔5〕和本实验室建立的半微量直接免疫酶斑减少中和试验(DPPRNT)〔7〕测定荧光抗体和中和抗体的效价。病毒用汉坦病毒国际标准株76-118和UR株。 2 结果 2 1 汉坦病毒在乳鼠脑内传代后病毒和抗原滴度的情况 ZJ2、ZJ4、ZJ7和ZJ5毒株在乳沙鼠脑中连续传了8,8,5,7代,其鼠脑冰冻切片经直接免疫荧光检查均呈强阳性,鼠脑悬液经离心,上清液的病毒滴度和抗原滴度均较强。 5 2 2 各汉坦病毒在Vero细胞上的适应性传代 4株毒株对Vero细胞均很敏感,但适应能力存在一定差异。ZJ4、ZJ7株接种Vero细胞第2代的免疫荧光强度即达到+++,而ZJ2、ZJ5株荧光相对较弱,经5次传代,4株毒株的免疫荧光强度和病毒滴度均有明显的提高,免疫荧光强度均可以达到++++,ZJ2、ZJ4、ZJ7三株HTN型病毒呈片状荧光,ZJ5株SEO型病毒呈颗粒状荧光,结果传5代后4株毒株的病毒滴度均达到6 50LgCCID50/ml,最高达7 50LgCCID50/ml,病毒抗原量均达到1?160,最高达1?768,随着适应代数的增加,病毒滴度和病毒抗原量呈递增趋势,递增情况(表1)。 2 3 毒株对Vero细胞致病变的观察 连续观察12d,4株毒株的1～5代均不使Vero细胞产生病变。 2 4 毒株致乳沙鼠収病情况的观察 4株毒株的CP5攻击乳鼠,7d后均収现乳鼠活动减少,精神萎靡,卷缩,后肢麻痹等症状収生,9d后出现死亡。 表1 4株毒株经Vero细胞传代后不同代次的病毒滴度和抗原滴度，略， 2 5 家兔免疫疫苗后中和抗体的应答情况 用ZJ4株和ZJ56 株制备的2批单价原液灭活疫苗免疫家兔,2针后的免疫血清经DPPRNT测定,对同型毒株的中和抗体效价,3/4只家兔不低于1?10。 3 讨论 本结果显示,经5代传代后,病毒在Vero细胞上已较好适应,病毒滴度和抗原量均有明显提高。病毒滴度均稳定在6 50Lg CCID50/ml以上,病毒抗原量稳定在1?160。同时将筛选出的毒株制成Vero细胞灭活疫苗,疫苗免疫家兔后,ZJ4和ZJ5株疫苗的免疫血清4/4和3/4的家兔中和抗体滴度不低于1?10,表明有很好的免疫原性,在家兔体内可以诱导出较高效价的中和抗体。因此,设想今后将ZJ4和ZJ5株毒株在Vero细胞上增加传代次数,研制HFRS双价纯化Vero细胞灭活疫苗,可能会更提高免疫血清的抗体效价。目前衡量汉坦病毒疫苗质量好坏非常重要的一个指标是免疫原性—中和抗体的效价。中国生物制品规程中HFRS疫苗质量的免疫原性标准是3/4的家兔中和抗体滴度应不低于1?10。将ZJ4和ZJ5毒株经乳沙鼠脑内连续传8,7代后的鼠脑毒种经Vero细胞适应5代后再反传乳鼠,收获病鼠,其鼠脑经脱脂牛奶稀释后真空冷冻干燥后建立毒种库,根据2005版的《药典三部》〔8〕对疫苗毒种的要求,对其进行了外源因子、无菌试验、支原体等检测,均符合疫苗生产规程的要求。 7 【参考文献】 〔1〕 朱匡纪.肾综合征出血热疫苗推广使用及防制效果评价,J,.中国公共卫生,1999,15(7):669-670. 〔2〕 陇纪新,罗兆庄,张家驹,等.肾综合征出血热疫苗预防效果和免疫策略研究,J,.中国公共卫生,1999,15(7):561-568. 〔3〕 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(5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只 落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总 结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的 13 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲 清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并 上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作 总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。 这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去， 即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工 作计划。 14 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 财务出纳工作交接书 [财务出纳工作交接书]财务出纳工作交接书移交原出纳员XX，因工作调动 ，财务处已决定将出纳工作移交给XX 接管 ，财务出纳工作交接书。 现办理如下交接 : 一、交接日期 2011年X月X日 二、具体业务的移交 1.库存现金:X 月 X 日账面余额 xx 元，实存相符，日记账余额与总账相符; 2.库存国库券:xx元 ，经核对无误; 3.银行存款余额 xxx 万元 ， 经编制 “银行存款余额调节表” 核对相符。 三、移交的会计凭证 、 账簿 、文件 1.本年度现金日记账一本 ; 2.本年度银行存款日记账二本; 3.空白现金支票 XX 张 (XX号至 XX 号 ); 4.空白转账支票 XX 张 (XX号至 XX 号 ); 5.托收承付登记簿一本; 6.付款委托书一本; 7.信汇登记簿一本; 8.金库暂存物品细表一份，与实物核对相符; 15 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 9.银行对账单 1 -10 月份 10 本 ;10月份未达账项说明一份 ; 四、印鉴 1.XX 公司财务处转讫印章一枚; 2.XX 公司财务处现金收讫印章一枚 ; 3.XX 公司财务处现金付讫印章一枚 ; 五、交接前后工作责任的划分 2011 年X月X日前的出纳责任事项由XX负责 ;2011 年X月 X 日起的出纳工作由XX 负责 。 以上移交事项均经交接双方认定无误。 六、本交接书一式三份，双方各执一分，存档一份. 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如: 16 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础，工作总结《财务出纳工作交接书》。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结 17 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。 18 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人。 19 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 财务出纳工作流程 [财务出纳工作流程]财务出纳工作流程出纳人员应当有一份自己的工作流程表，才能使工作有条不紊，也不会在忙碌的工作中迷失方向，财务出纳工作流程。 1.出纳工作的每日流程 出纳工作的每日流程一般是: (1)上班第一时间，列明昨日未办完事项，检查现金库存，查询银行存款余额。 (2)请示领导或财务主管对当日资金的收支安排，在当日工作安排簿上一一列明。 (3)根据领导批示办理付款手续，付款依据必须真实、完整、合理，超越权限范围的付款要求应当报送相应的领导审批。 (4)办理各种收款事项，应当注意收入计算的准确性，明确收入来源。 (5)对收、付款单证进行检查，补齐手续并分类。 (6)根据收、付款单据，编制记帐凭证。 (7)根据记帐凭证，逐日逐笔按顺序登记现金日记帐和银行存款日记帐，并每日结出余额。 (8)逐笔注销工作安排簿中已完成事项。 (9)下班前进行库存现金盘点，做到帐实相符。 (10)对银行支票进行清点，核实当日银行收支金额。 20 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ (11)对发票、收据等进行清点，合适当日相关业务。 (12)对未完成的经济也列明待处理。 (13)编制出纳日报表，反映单日资金收支情况。 (14)临下班前，检查保险柜、抽屉是否锁好，资料凭证是否收好。 2、出纳工作每周流程 对于收支业务频繁的大中型企业，为了提高工作效率和便于资金安排，通常以每周为一个出纳工作周期。出纳工作的每周流程大致是: 星期一:各部门及结算单位报送付款申请或付款书。 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— 21 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍，工作总结《财务出纳工作流程》。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神 22 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的 23 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 财务处处长工作总结 24 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ [财务处处长工作总结]财务处处长工作总结1.整理、修订和完善了《淮安信虑职业技术学院财务管理实施细则》、《淮安信息职业技术学院财务内控制度》、《淮安信息职业技木学院财务报销工作流程》、《淮安信息职业技术学院财务服务工作承诺》等，财务处处长工作总结。通过对有关制度、规程、流程和承诺的修订，进一步明确了服务标准，了服务行为，提高了服务的自觉性。 2.配合财务审计工作，2011年暑假期间，组织财务处全体工作人员对2011年以来的财务账目进行了自查，通过自查发现了学生学费收缴工作中存在的问题，并及时进行了纠正。针对自查过程中发现的问题，财务处提出了整改措施。 3.组织2011年学院预算的编制，在院领导的正确指导下，2011年财政拨款经费预计比2010预算指标增加29%增幅达1000万元。2011年按院领导的决策，在相关部门的共同努力下，额外争取到申央财政、省财政、省信息产业厅支持的实训基地、基础实验室、信息化项目等经费共计923.1万元。 4.今年从两个方面开创了收费工作的新局面，一是实现了学生收费收据的计算机打印，解决了困扰多年的收费收据短缺的问题，使得收费工作更加规范，二是开创了缴费方式的多样化，更加方便学生缴费。经过财务处全体人员的共同努力和各系的大力配合，今年学费、住宿费收入比去年增加了17%。 5.在院领导的直接指导和亲自参与下，经过与专业银行的多次沟通、协调，2011年新增银行贷款3800万元，保证了教学实验、实习项目 25 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 新增和改造的资金需求，基本保障了校区建设经费的投入。 6.在日常收文管理中，做到对一切开支严格按财务制度和预算计划办理，对各类收入严格执行收支两条线。2011年经过财务处办理的各类支出经费近亿元无差错。 7.完成一个班的高等数学教学工作，年160学时。公开发表一篇。 8.财务内控制度的落实不到位，财务账款的审核、监督机制不够完善。 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题，工作总结《财务处处长工作总结》。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼 26 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说 27 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找 28 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 财务出纳月工作总结 [财务出纳月工作总结]财务出纳月工作总结经过了将近3个月紧张的工作实践和总结，知道了要作好出纳工作绝不可以用“轻松”来形 29 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 容，出纳工作绝非“雕虫小技”，更不是可有可无的一个无足轻重的岗位，出纳工作是会计工作不可缺少的一个部分，它是经济工作的第一线，因此，它要求出纳员要有全面精通的政策水平，熟练高超的业务技能，严谨细致的工作作风，作为一个合格的出纳，必须具备以下的基本要求: 一.学习、了解和掌握政策法规和公司制度，不断提高自己的政策水平，财务出纳月工作总结。 二.出纳工作需要很强的操作技巧。打算盘、用电脑、填支票、点钞票等都需要深厚的基本功。作为专职的出纳员，不但要具备处理一般会计事物的财务会计专业基本知识，还要具备较高的处理出纳事务的出纳专业知识水平和较强的数字运算能力。 三.做好出纳工作首先要热爱出纳工作，要有严谨细致的工作作风和职业道德。 四.出纳人员要有较强的安全意识，现金、有价证券、票据、各种印鉴，既要有内部的保管分工，各负其责，并相互牵制;也要有对外的保安措施，维护个人安全和公司的利益不受到损失。 五.出纳人员必须具备良好的职业道德修养，要热爱本职工作，精业、敬业，要竭力为本单位中心工作，为单位的总体利益、为全体职工服务，牢固的树立为人民服务的思想。 以上都是我将近3个月工作以来的一些体会和认识，也是我不断在工作中将理论转化为实践的一个过程。在工作中学习和努力提高业务技能，使自身的工作能力和工作效率得到了迅速提高，在以后的工作 30 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 和学习中我还将不懈的努力和拼搏，做好自己的本职工作，为公司和全体职工服务，和公司和全体员工一起共同发展!在此，我要特别感谢公司领导和各位同仁在工作和生活中给予我的支持和关心，这是对我工作最大的肯定和鼓舞，我真诚的表示感谢! 【扩展阅读篇】 工作总结格式一般分为:标题、主送机关、正文、署名四部分。 (1)标题。一般是根据工作总结的中心内容、目的要求、总结方向来定。同一事物因工作总结的方向——侧重点不同其标题也就不同。工作总结标题有单标题，也有双标题。字迹要醒目。单标题就是只有一个题目，如《我省干部选任制度改革的一次成功尝试》。一般说，工作总结的标题由工作总结的单位名称、工作总结的时间、工作总结的内容或种类三部分组成，工作总结《财务出纳月工作总结》。如“××市化工厂1995年度生产工作总结”“××市××研究所1995年度工作总结”也可以省略其中一部分，如:“三季度工作总结”，省略了单位名称。毛泽东的《关于打退第二次反共高潮的总结》，其标题不仅省略了总结的单位名称，也省略了时限。双标题就是分正副标题。正标题往往是揭示主题——即所需工作总结提炼的东西，副标题往往指明工作总结的内容、单位、时间等。例如:辛勤拼搏结硕果——××县氮肥厂一九九五年工作总结—— (2)前言。即写在前面的话，工作总结起始的段落。其作用在于用简炼的文字概括交代工作总结的问题;或者说明所要总结的问题、时间、地点、背景、事情的大致经过;或者将工作总结的中心内容:主要经 31 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 验、成绩与效果等作概括的提示;或者将工作的过程、基本情况、突出的成绩作简洁的介绍。其目的在于让读者对工作总结的全貌有一个概括的了解、为阅读、理解全篇打下基础。 (3)正文。正文是工作总结的主体，一篇工作总结是否抓住了事情的本质，实事求是地反映出了成绩与问题，科学地总结出了经验与教训，文章是否中心突出，重点明确、阐述透彻、逻辑性强、使人信，全赖于主体部分的写作水平与质量。因此，一定要花大力气把立体部分的材料安排好、写好。正文的基本内容是做法和体会、成绩和缺点、经验和教训。 1)成绩和经验这是工作总结的目的，是正文的关键部分，这部分材料如何安排很重要，一般写法有二。一是写出做法，成绩之后再写经验。即表述成绩、做法之后从分析成功的原因、主客观条件中得出经验教益。二是写做法、成绩的同时写出经验，“寓经验于做法之中”。也有在做法，成绩之后用“心得体会”的方式来介绍经验，这实际是前一种写法。成绩和经验是工作总结的中心和重点，是构成工作总结正文的支柱。所谓成绩是工作实践过程中所得到的物质成果和精神成果。所谓经验是指在工作中取得的优良成绩和成功的原因。在工作总结中，成绩表现为物质成果，一般运用一些准确的数字表现出来。精神成果则要用前后对比的典型事例来说明思想觉悟的提高和精神境界的高尚，使精神成果在工作总结中看得见、摸得着，才有感染力和说明力。 2)存在的问题和教训一般放在成绩与经验之后写。存在的问题虽不 32 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 在每一篇工作总结中都写，但思想上一定要有个正确的认识。每篇工作总结都要坚持辩论法，坚持一分为二的两点论，既看到成绩又看到存在的问题，分清主流和枝节。这样才能发扬成绩、纠正错误，虚心谨慎，继续前进。 写存在的问题与教训要中肯、恰当、实事求是。 (4)结尾一般写今后努力的方向，或者写今后的打算。这部分要精炼、简洁。 (5)署名和日期。署名写在结尾的右下方，在署名下边写上工作总结的年、月、日，如为突出单位，把单位名称写在标题下边，则结尾只落上日期即可。 简而言之: 总结，就是把某一时期已经做过的工作，进行一次全面系统的总检查、总评价，进行一次具体的总分析、总研究;也就是看看取得了哪些成绩，存在哪些缺点和不足，有什么经验、提高。 那么，工作总结怎么写?个人工作总结的格式是怎样的?详情请看下文解析。 (一)基本情况 1. 总结必须有情况的概述和叙述，有的比较简单，有的比较详细。这部分内容主要是对工作的主客观条件、有利和不利条件以及工作的环境和基础等进行分析。 2. 成绩和缺点。这是总结的中心。总结的目的就是要肯定成绩，找出缺点。成绩有哪些，有多大，表现在哪些方面，是怎样取得的;缺点有多少，表现在哪些方面，是什么性质的，怎样产生的，都应讲 33 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 清楚。 3. 经验和教训。做过一件事，总会有经验和教训。为便于今后的工作，须对以往工作的经验和教训进行分析、研究、概括、集中，并上升到理论的高度来认识。 今后的打算。根据今后的工作任务和要求，吸取前一时期工作的经验和教训，明确努力方向，提出改进措施等。具体可以参考部分工作总结范文。 (二)写好总结需要注意的问题 1. 一定要实事求是，成绩不夸大，缺点不缩小，更不能弄虚作假。这是分析、得出教训的基础。 2. 条理要清楚。总结是写给人看的，条理不清，人们就看不下去，即使看了也不知其所以然，这样就达不到总结的目的。 3. 要剪裁得体，详略适宜。材料有本质的，有现象的;有重要的，有次要的，写作时要去芜存精。总结中的问题要有主次、详略之分，该详的要详，该略的要略。另外，在结尾处也可以附上下一步个人工作计划。 34 ---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------ 35