【doc】异型增生在小鼠大肠腺癌发生中的研究

【doc】异型增生在小鼠大肠腺癌发生中的研究 异型增生在小鼠大肠腺癌发生中的研究 天}9肿弘..彳生簿砰甲月l 露:学薯. ,7f—f7 异型增生在小鼠大肠腺癌发生中的研究 陈庄罗德元-肖邦良-王朝俊-李琼英尺7弓2 (泸至ii写研室64600o华西医科大学肿瘤所) 摘要二甲肼给昆明种雌性成年小鼠每周皮下注射l擞(2锄1g,kg),最多20擞.在小鼠大脑腺 癌诱发过程中,用常规组织学和酶组织化学技术对异型增生腺体进行了动态观窘.发现异型增生腺体于 实验第3周出现.以后逐步增多.异型增生腺体病变可累及单十腺体的部份区域,单十腺体或邻近的多 十腺体.1=卫后发展为突向肠腔的灶性病变.其酶变化现为LDH,G6PD,pGr活性增高,CCO,SDH活性 下降.文中对异型增生腺体在小鼠大肠腺癌发生中的地位进行了讨论. 关键词二甲讲?小文}大膊朦癌I异型增生腺豫 中囝法分类号R'/35 大肠癌是危害人类健康的常见癌肿之一, 对其发生发展过程的研究将为大肠癌及其癌前 病变的早期发现和防治提供基础.二甲肼 (DMH)诱发的小鼠大肠癌性质与人类大肠癌 相仿,是肿瘤病因,发病及防治研究常用模 型[.本实验甩常规组织学和酶组织化学方法 x~--甲肼诱发的小鼠大肠腺癌的发生做了动态 观察,并重点观察异型增生腺体在此过程中的 变化. 1材料和方法 诱癌剂,诱癌方法和标本处理见参考文献 2.切片行HE染色,或入不同孵育液染色t乳酸 脱氢酶(LDH),葡萄糖一6一磷酸脱氢酶(G6PD), 琥珀酸脱氢酶(SDH)甩四唑盐标准脱氢酶法I 细胞色素氧化酶(CCO)用DAB法}葡萄糖苷 酸酶(Gr)用偶氮偶联法.光镜下观察染色结 果. 2结果 2.1肉眼观察;对照鼠未发现大肠肿瘤.实 验鼠第13周濒死处死的小鼠肠壁皱襞增粗(镜 下腺体扩张明显).15周时一只小鼠便血,此后 有多只小鼠便血.16周时一只小鼠脱肛.脱出 粘膜上有小颗粒突出物,同期处死的小鼠肠粘 膜也开始出现小颗粒突出物(镜下多为淋巴小 结,非结节区可见异型增生腺体区).第一例肉 眼可见大肠结节状瘤结于19周出现(图1) 圈l第l9周时病变情况 2.2组织学观察t腺癌发生部位是远端大 肠,故重点观察此肠段变化.对照鼠远端大肠可 见粘膜层,粘膜下层,肌层和浆膜层.牯膜层中 上皮为管状单管腺,与粘膜肌层垂直,横,纵切 面都显示腺体大小,排列较均匀一致.腺体上份 泸州医学院l7卷 粘液细胞较多,下份以非粘液细胞为主.腺体之 间以表面上皮相连续,其中粘液细胞少见.腺体 中核分裂少见. DMH处理后,第3周时一只实验鼠中出 现异型增生腺体,以后异型增生腺体增多(表 1). 表1异型增生腺体出现的鼠敦(其) 受累腺体可为单个腺体的部份区域(图2) 图2受曩的单十腺体部分区域(HE×20D) 也可为单个或多个邻近腺体,增生的细胞在腺 腔中呈分枝,出芽,扭曲等(图3).腺体中 图3受曩腺体中增生细胞情况(HE×200) 粘液细胞明显减少,主要由柱状或立方状复层 或假复层细胞组成.细胞浆嗜硷,核大t染色 质粗,深,核仁明显,核分裂多见,有的核位 置趋于细胞腔面.第16周后发现突向肠腔的异 型增生腺体组成的灶性病变(图4),病变可呈 圆形,楔形,杯状,息肉状等,且大小不一. 圈4第16周时的灶性病变(HE×200) 19周后出现的结节状腺癌细胞变化基本 上同前述的异型增生腺体的细胞,但腺体排列 更乱.各区域分化可不同.其中分化差的区域 细胞浆少,核大,不,核裂多见,无粘液 细胞,腺腔消失,细胞成索状,团状.24周后 有5倒腺癌腺体浸润,穿透粘膜.但未见浸及 肌层和转移(图5). 图5第24周时病变情况(HE×200) 3期陈庄等t异型增生在小鼠大肠腺癌发生中的研究l73 2.3酶组织化学染色观察t结节状腺癌与对 照鼠腺体细胞比较,LDH,G6PD,Gr活性增 高,CCO,SDH活性下降.异型增生腺体细胞 酶活性与结节状腺癌变化相似,但变化更均匀 一 致. 3讨论 给小鼠诱癌剂后,再分批处死动物,经连续 组织学观察,异型增生腺体是较明显的病变.从 形态结构观察,异型增生的腺体及其组成细胞 的变化与结节状腺癌的组成腺体和细胞变化相 似,如腺体细胞数量增多,粘液细胞明显减少, 细胞浆嗜硷,核分裂多见,细胞极性改变等增 生,分化异常的变化.从代谢变化看,异型增生 腺体的酶活性变化也与结节状腺癌相似,显示 了有氧氧化代谢活性下降,无氧酵解增强,戊糖 通路活性增强等特点.所以,异型增生腺体是重 要的癌前变化.可以认为,诱癌剂作用于小鼠大 肠腺体某些细胞后,通过一定机制,使其发生恶 性转化.从组织学发展过程看,发生恶性转化的 腺体先位于腺体部份区域(如上份),此区域以 柱状细胞为主,细胞浆嗜硷,核大,棱分裂多见, 细胞极性改变等.受累区域可逐步发展到单个 腺体,此时腺体中粘液细胞数明显减少或缺如, 其柱状细胞明显增多,腺俸细胞可成夏层或出 现腺体扭曲分枝,出芽等变化.随着腺体异常增 生,分化的进一步发展.病变区可呈外向性生长 趋势,病变突向肠腔而成为息肉状,结节状或平 斑状的瘤结.再晚则可在肉眼可见的瘤结基础 上,病变呈内生性发展而经牯膜肌开始浸润. 大脑癌组织发生过程中先兆病变的争论主 要集中于腺癌发生前是否经过腺瘤阶段"].即 大多数大肠癌是通过腺瘤一癌演变过程发生, 还是直接从无息肉的平坦粘膜发生.其争论的 实用意义在于能否利用现有的内窥镜检查和病 检技术及早诊治腺瘤,防止大多数腺癌的发生. 从本实验对异型增生腺体在小鼠大肠腺癌发生 过程中变化的观察分析,其结果支持大肠癌是 通过腺瘤一癌演变过程发生的观点. 参考文献 1,耿宝霉.二甲肼诱发小鼠太肠癌的实验研究.浙江医科大学,1982711t269 2.陈庄.小鼠大肠癌诱发过程中的肠朦扩张.沪州压学院t1994-17(2)-97 3.睬庄.小鼠太肠结节状腺癌的酶组织化学观察.沪州医学院.1994l17(1)-2:3 4.LaneN.Precursortissueofordinalargebowele.~tncex.can懈Re~carch1.976?36I2669 5.Sl1amddinAKM.CarcinomainsJtuinPatmUCO~oflgei.ntest;ne.Reportofacasewithsignificance instrategiest'orearlydetect;on.Cance~1985?56I2849 (1994—06—03收稿) l74栌州医学院"卷 TheDysplasiainCarcinogenesisoftheAdenocarcinoma oftheColoninMice ChenZhuangetal TheDept..fPatlmphysiology TheKunmingfemaleadukmiceweregivensubcutaneousinjectionofDMH(20mg/kg)weekly andkilledstvariousintervalsafar7daysoftheinjection.Thehistopathologyandi:heenzymeactivity ofthedyspla~awereinvestigatedbyeaIlsofherrmtoxy~nandeosinstainandhistochemistry.Bythe 3rdweekafarinitationofstainDMHtreatment,theisolateddysplastiecryptinonem0uwasoh- servedandthenumbersoftheaysplasticcryptshadincreasedinsubsequentmice.Thedysplafi ain— volvedthepartialares0isinglecryptorsinglecryptorseveralcryptsinthevicity.Thedysplasia showedtortuosity,budding,andbranchinginthecryptalcavityandformedfool(cup—llke,roundOr triangularshap)inthemLlcoga.Thelatterdysplasiaexpandedpolypiformornodularlociprot rusively inthecoloncavity.TheenzymeactlvkyofthedysplasiashowedLDH,G6PD,日一Grincreasedand Cc0,SDHdecreased.Thenatureandmeaningofthedysplaslawerediscussedinthispaper. KEYWORDSDimethlhydrazine,Mice,Adenocarcinoma,Colon,Dysplasia. 古方延寿丹及化裁方功效与产品开发研究 通过技术鉴定 (泸州医学院科研处646000) 由我院冯文宇副主任药师承担.省教委下选的重 点科研谭题《古方延寿丹及化裁方功效与产品开发研 究),于1994年6月3日在成都通过由省教委,省中医 管理局联合组织的专家拄术鉴定.1l位省内着名专家 对所报资料审议后,一致认为谈谭题以清.1世补青医 书)所载延寿丹为方源.加减化裁成新方.采用现代科 学方法研制成回睿口服液,与原方制剂行药效,临床对 日:试验研究.并派生和开发出保健食品中华可乐,桑椹 营募液,神州液低度酒,仙山长青茶共五十新产品.各 产品制备工艺可行.所拟质量标准糍够控制产品质量. 药教学实验表明.回春口服液具有明显抗疲劳,耐缺 氧,抑制过氧化脂质形成,减步脂褐素.谤豫氧自由基 的作用;尚能消除阳虚,碑虚动物模型的阳虚,睥 虚症状,降低耐寒试验小鼠死亡率,提高小鼠学习记忆 力}使皋蝇平均寿命延长32.5—55.8.最高寿命均值 较对照组长13.5,24.6(_P<0.01).保健食品中药 原汁亦具有抗疲劳,耐缺氧,减少脂褐紊,清除氧自由 基的作用. 临床观察证明,回春口服j噍能增强人体免疫功能, 明显改善冠心病人头昏,耳鸣,眼花,胸阎,心悸等十项 症状,显效率为57.O,总有效率92.7,显效率明显 优于对照组(_P<O.o1).药理|占床试验证明,五十产品 均无毒副反应.并已先后投放市场.取得较好的杜会和 经济效益. 该研究设计合理.资料齐全,数据可信.结论可靠, 再有较高的学术债值.各产品药源丰富.实用性强.使 用面广,居国内抗衰老保健药品,食品研究的先进木 早.